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        buffer相同,反应温度时间不同的双酶切应该怎么做?

        相关实验:质粒构建技术

        user-title

        dxy_2cu73r37

        两个酶用的是同样的buffer,一个酶反应37度5min,一个酶是30度15min。Takara的两个酶说明书体系都是10-50微升,加10Xbuffer1-5微升(保持1X浓度),两个酶都是固定1微升(不能超过总量的1/10),DNA≤1微克,剩余灭菌水补齐。我想问我是可以第一个酶30度15分钟反应完直接再加1微的第二种酶37度酶切5分钟,还是我第一种酶酶切完需要切胶回收再进行第二种酶切,这两种方法每次的体系我都应该怎么配啊

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