大家跑过pmd19-t的载体吗，其中有一个control片段，我连接后直接跑凝胶，为啥那么歪歪扭扭，而且位置不对（第二泳道）

考虑是凝胶浓度不适合、分离胶浓度可以提高一下

PMD19-T载体中的Control片段可能跑凝胶时位置不正常的原因包括:

1. 控制DNA片段质量不好。可能在提取、储存过程中降解或污染,导致其在凝胶电泳中迁移位置不正常。

2. DNA上样量不准确。上样量过多会使DNA在凝胶中迁移变形。应准确计量上样量。

3. 凝胶浓度不适合。如果凝胶浓度过低,DNA片段易于变形。应选用适合DNA大小的凝胶浓度。

4. 电泳电压设置不当。电压过高会产生过热,影响DNA在凝胶中的迁移。应选择适宜的电压。

5. 载体回收不纯。提取的载体可能混有质粒本体或其它DNA污染,影响凝胶迁移。应重新纯化载体。

6. 连接产物扩增不足。连接反应效率低,产物量少,难以观察。应优化连接条件,获得足量产物。

7. 交联程度不当。凝胶交联度过高或过低,也会影响DNA迁移行为。

建议重新准备Control DNA片段,注意上样量,选择合适的凝胶系统进行电泳,或提高连接产物的量,以获得清晰的电泳结果。必要时也可重新纯化载体提高实验质量。

需要怀疑除了制胶以外，是否上样的量太多而且跑胶时间不充足的可能