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        EMSA 看不到迁移带是什么原因?如何解决?

        相关实验:凝胶迁移实验(EMSA)

        最新修订时间:

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        合作专家 | 唐婕妤硕士

        临床医学 中南大学

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        审核专家 | 聂壹峰博士

        纳米生物医学 中国科学院大学

        材料与仪器

        蛋白、探针;

        步骤

        1、蛋白降解或者蛋白在细胞系中表达低。对策:用蛋白跑一次 WB 可排除,若是这种情况,则需要更换样品或者加大样品量。

        2、探针上没有与蛋白结合的位点。对策:更换探针可解决。

        3、转膜效率低或者成像时间过短。对策:改善转膜条件,一般在 0.5X TBE 中恒压 60 V 转膜 1 h,最好放在冰上;成像时间也须从短时间逐渐延长,直至能看到成像。

        4、抗体级别不行。对策:更换 EMSA 级别的抗体可解决。

        5、电源出现故障同样也会导致迁移带无法形成,还有干扰电流通路的情况。对策:这些情况下需要检查电流是否通畅正常。

        来源:丁香实验

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