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        【求助】请问各位我的发现有意义吗?

        丁香园论坛

        1061
        我在养一种细胞,分别用低糖培养液和高糖培养液,然后做RT-PCR,我扩增得这种基因在低糖得时候不能扩增出来,但是在高糖得时候能扩增出来。可能就是在低糖的时候不转录,而在高糖得时候转录。我的发现有没有意义啊?
        你的发现理论上是有意义的。但是不知道你的基因到底是什么基因了,细胞到底是什么细胞了?因为如果你养的是肿瘤细胞,并且你发现的这个基因是原癌基因的话,你的这个发现就更有意义了。因为有传统的饮食疗法,就是所谓的“饥饿疗法”是对肿瘤有抑制作用的。你的发现是有意义,但是你要做起来就比较麻烦了,因为我认为其下调是一个间接作用,不是一个直接作用?
        个人观点哈,欢迎大家一起参与讨论!
        zhuoer9401 wrote:
        我在养一种细胞,分别用低糖培养液和高糖培养液,然后做RT-PCR,我扩增得这种基因在低糖得时候不能扩增出来,但是在高糖得时候能扩增出来。可能就是在低糖的时候不转录,而在高糖得时候转录。我的发现有没有意义啊?


        楼主应该确定该基因在低糖培养时是否真的不表达,单靠RT-PCR实验就说明其不表达是不可靠的,有时同一管的cDNA做多管常规PCR,有的有条带,有的没有,意味着人为因素在影响。建议采用其他实验进一步证明其是否真的不表达。

        楼主的信息不够详细,该基因在低糖的环境不表达是否有意义或意义有多“大”无法下结论。

        既然可以设计确定的引物做RT-PCR,意味着该基因不是新基因,那么可以结合该基因已有的研究,再结合低糖高糖的环境作进一步分析其不表达是否有意义。

        个人认为一般细胞,尤其大多数肿瘤细胞,低糖已足够其能量供应了,高糖更有利于细胞贴壁而已,当然对于能量需求特别大的细胞就另当别论了。所以我对楼主目前检测的准确性持怀疑态度。:)

        如果真实情况如你所说,期待更详细的资料供我们讨论。

        PS:绝对没打击意思,一个有意义的发现也是值得“同道人”高兴的。
        恩!!很有意义呀,坚持研究下去嘛!!说不定又是一个新发现呢。
        还是要看这个基因到底是什么功能。如果是比较重要的基因,别人没报道过的,那比较有意义的。否则抓一把泥灭一下菌,放进细胞,然后用基因芯片一测,也能发现上百个基因发生变化的。关键是有没有意义。
        kiki2009 wrote:
        楼主应该确定该基因在低糖培养时是否真的不表达,单靠RT-PCR实验就说明其不表达是不可靠的,有时同一管的cDNA做多管常规PCR,有的有条带,有的没有,意味着人为因素在影响。建议采用其他实验进一步证明其是否真的不表达。

        楼主的信息不够详细,该基因在低糖的环境不表达是否有意义或意义有多“大”无法下结论。

        既然可以设计确定的引物做RT-PCR,意味着该基因不是新基因,那么可以结合该基因已有的研究,再结合低糖高糖的环境作进一步分析其不表达是否有意义。

        个人认为一般细胞,尤其大多数肿瘤细胞,低糖已足够其能量供应了,高糖更有利于细胞贴壁而已,当然对于能量需求特别大的细胞就另当别论了。所以我对楼主目前检测的准确性持怀疑态度。:)

        如果真实情况如你所说,期待更详细的资料供我们讨论。

        PS:绝对没打击意思,一个有意义的发现也是值得“同道人”高兴的。

        目前的肿瘤细胞培养基一般是高糖,本人做过实验,降低glucose的浓度至正常水平(具体数字我记不得了),肿瘤细胞的生长速度减慢很多
        是要看这个基因到底是什么功能。如果是比较重要的基因,别人没报道过的,那比较有意义的。否则抓一把泥灭一下菌,放进细胞,然后用基因芯片一测,也能发现上百个基因发生变化的。关键是有没有意义。
        这个现象是否有意义,还要看是个什么基因,如果是个呼吸/代谢/合成的基因就一般了,
        当然还可能和细胞的分裂有关,是不是低糖的时候不能快速生长,细胞周期相关分子会有变化。
        但是如果是个重要的信号分子,和肿瘤/细胞大小之类有关就好玩了。
        当然最直接的是看看你的gene的promotor区域又没有有关糖代谢通路的TF的binding site,比如cAMP 激活的TF之类。

        本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴

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