双酶切插入目的基因的方向
dxy_tphcsz00
是采用pET28a+质粒，HindIII是173，NdeI是238。 上游引物酶切位点是NdeI 下游引物酶切位点是 HindIII，经过PCR扩增以后，发现目的基因片段连到质粒上必须是反的才可以，正向连不上去。可是我查阅的文章目的基因反着插到质粒去。
别人的文章，不单单是这一篇，好多目的基因片段的方向和质粒的方向相反的
2 个回答
周周zyl
有帮助
双酶切插入目的基因的方向是反相的，多调整几次，应该就可以了，但顺序不能搞错。
土井挞克树
有帮助
可以反向插，你记住插入的顺序，后续分析的时候做调整就行
相关产品推荐
基因合成（免费设计方案/酶切位点的设计、密码子的优化/签订服务协议和保密合同/将合成的基因克隆到指定的载体上）/擎科生物TSINGKE
询价
ZBP1/ZBP1蛋白/DNA-dependent activator of IFN-regulatory factors;DAI;Tumor stroma and activated macrophage protein DLM-1蛋白/Recombinant Human Z-DNA-binding protein 1 (ZBP1)重组蛋白
￥69
酶切片段化法DNA建库试剂盒（VAHTS Universal Plus DNA Library Prep Kit for Illumina V2）（ND627/NDB627）
￥6400
Thrombin（凝血酶）（融合蛋白标签酶切：His-tag、GST-tag等）
￥120
Enterokinase（肠激酶）（融合蛋白标签酶切：His-tag、GST-tag等）
￥380
相关问答
关于丁香通
公司信息
个人用户
企业机构
提问
扫一扫
实验小助手
扫码领资料
反馈
TOP
打开小程序