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        双酶切插入目的基因的方向

        相关实验：DNA 的酶切与连接

        user-title

        dxy_tphcsz00

        是采用pET28a+质粒，HindIII是173，NdeI是238。 上游引物酶切位点是NdeI 下游引物酶切位点是 HindIII，经过PCR扩增以后，发现目的基因片段连到质粒上必须是反的才可以，正向连不上去。可是我查阅的文章目的基因反着插到质粒去。图片描述

        别人的文章，不单单是这一篇，好多目的基因片段的方向和质粒的方向相反的图片描述

        图片描述

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        2 个回答

        user-title

        周周zyl

        有帮助

        双酶切插入目的基因的方向是反相的，多调整几次，应该就可以了，但顺序不能搞错。

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        可以反向插，你记住插入的顺序，后续分析的时候做调整就行

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