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        目的片段和表达载体双酶切产物胶回收

        相关实验:🔥 分子克隆技术

        user-title

        Smile-li

        目的片段和表达载体双酶切产物胶回收做转化,转化有一步复苏菌液,1个小时没摇浑,然后涂板,长出了菌落,但摇菌10个小时都没浑,pcr鉴定没有目的片段,这种情况如何解决呀

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        4 个回答

        user-title

        balalaLy

        有帮助

        没看明白你的问题,酶切产物胶回收做的转化?这就没有完整的质粒呀,不是应该胶回收后的连接产物再转化吗?你长出来的克隆应该是杂菌。

        user-title

        bamboopiggy

        有帮助

        你是不是缺了一步连接?然后活化菌的那一个小时菌液不会太混,但是感觉你这个长的是杂菌

        user-title

        Smile-liuser-title

        少写了连接,连接过夜了

        user-title

        申东熙老伯

        有帮助

        这种就是目的片段和表达载体没有连接上,酶切胶回收这一步没出问题的话,建议重新连接。

        user-title

        汤姆卜丽波

        有帮助

        有可能是回收没收回来也有可能是你连接的时候比例不对没连上

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