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        用NEB的BpuEI酶1ul,切1ug的质粒失败,多加酶也不行,是酶量不够?应该用多少计量?

        相关实验:酶切实验

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        浪子在天涯

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        5 个回答

        user-title

        棋NKKP

        有帮助

        酶切体系商业化很稳定,首先要确定自己的酶切位点是不是正确

        user-title

        汤姆卜丽波

        有帮助

        酶量是够的,你可以看看说明书上对于酶活性的定义,根据你的质粒浓度和量来计算需要的酶量。一般情况下1ul绝对够的。

        user-title

        balalaLy

        有帮助

        10x buffer有没有失效?如果buffer没有分装,反复使用的话也是影响酶切效率

        user-title

        bamboopiggy

        有帮助

        你先要确定你的酶切位点没有选错,再就是你们的酶没有失效。否则加多少都没用。

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        心细北方

        有帮助

        酶量应该差不多,你用的酶切时间是多少,可以增加一下酶切时间试试,NEB的内切酶建议的酶切时间是37°C,30 min,通常延长一下时间会更好,如果实在很难切开的话,可以延长至4 h或过夜!

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