PCR实验什么情况下需要使用RNase H？

RNase H可以特异性地水解DNA-RNA杂合链中的RNA。当PCR实验RNA/DNA杂合体不能正常水解时，需要考虑使用

RT-PCR引物设计和一般PCR引物设计可以遵循同样的原则。细心地进行引物设计是PCR中最重要的一步。理想的引物对只同目的序列两侧的单一序列而非其他序列退火。

在PCR之前使用RNaseH处理cDNA合成反应可以提高灵敏度。对于某些模板，据认为cDNA合成反应中的RNA会阻止扩增产物的结合，在这种情况下，RNaseH处理可以增加灵敏度。一般当扩增较长的全长 cDNA目标模板时，RNaseH处理是必需的，比如低拷贝的。对这种困难模板，RNaseH的处理加强了或AMV合成的cDNA所产生的信号。对于多数 RT-PCR反应，RNaseH处理是可选的，因为95℃保温的PCR变性步骤一般会将RNA：DNA复合物中的RNA水解掉。

RNase H是一种核酸内切酶，能够消化大部分RNA，在提质粒或gDNA时可以使用它来去除RNA影响。

在一轮PCR中RNA/DNA杂合体不能正常变性时。