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问
制备感受态一定要从挑单菌开始吗?
huarenqiang5
感受态制备时不是一定要挑单菌落,可以在活化好的平板上划一条线挑菌去小摇。操作时只要保证无菌就可以。另外,补充二楼的转化后挑菌:一定要挑单菌落,而且要利索,不能沾到周围培养基上的空白地方,因为如果不小心碰到,上面有很多连接产物及片段会随着进一步划线在新的培养基上积累,如果用pcr去筛选阳性,会有很多假阳性的。
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问
酶连接过程中,打开了PCR仪机盖会怎么样
土井挞克树
只是打开的外机器盖子影响不大,小心污染问题
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问
在质粒DNA提取实验结果中出现 A230为负数,A260/A280=3点多 有可能是什么原因?
土井挞克树
质粒提取的不够纯,有其他物质在干扰就会这样
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问
miRNA和mRNA的测序区别?
土井挞克树
mRNA组就是测某个条件下的mature mRNA,mRNA有一个Poly-A tail,mRNA测序文库构建时,利用「oligo(dT)磁珠能特异结合Poly-A tail」的原理,特异地将mRNA从总RNA中分离出来实现富集。而「miRNA作用测序」主要是沉默mRNA以实现「调控基因表达」
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问
【求助】DNA ladder
汤姆卜丽波
用氯仿再提,然后酚氯仿抽提,无水乙醇沉淀
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问
T7聚合酶必须反式提供?
土井挞克树
一般是指由反义RNA合成,与引物方向相反
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问
孟德尔分析
土井挞克树
如果没有超过三分之一,我建议可以忽略,如果太多建议你计算后再考虑。
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问
请教各位老师关于meta分析异质性太大的问题
dxyc42u
异质性并不是什么洪水猛兽,也不是说有异质性的meta分析一定不能发表,关键是如何解读异质性!相对于追求所谓的异质性不显著,莫不如通过亚组分析、meta回归等方法探讨异质性来源,讨论异质性对结果的影响。
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问
菌液pcr
土井挞克树
如果只有一个位点还有目的条带的话可能是有非特异性结合
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问
问下各位老师同学,为什么我跑出来的电泳条带会这样
balalaLy
有几个问题:1、你的内槽running buffer应该是漏的,这个是导致电流不均衡,体现在你的sample条带像山坡一样,不在一个水平线上。2、你使用的loading buffer不行,不能将sample压缩成比较小的体积,或者你试一下加入10分之一的巯基乙醇试试。又或者你是不是用错了DNA的loadingbuffer。3、加10ul marker唯一的好处是能证明你们课题组经费比较宽裕,mar
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问
电镜看心肌组织的焦亡
精准检验每一天
透射的要好用很多,多找几个面应该能找到!
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问
EMSA未加蛋白的孔出现条带
土井挞克树
考虑是上样量太少,增加上样量,延长孵育时间。
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问
单B细胞分选
土井挞克树
加大样本量,更换筛选孔径,多用pbs清洗。
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问
蛋白组labefree缺失值如何处理?
Amor良
如一个蛋白中三个重复,2个有值,建议保留,1个有值,严格一点考虑过滤掉。
2 回答
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问
求助FC标签蛋白如何切除
土井挞克树
如果二者不是重叠序列的话可以不切除,互相不影响
1 回答
576 围观
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问
提取肌腱蛋白
土井挞克树
机器研磨就可以,结缔组织要加蛋白酶和裂解剂,可以研磨好一些。
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609 围观
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问
重组质粒单酶切后转入酵母菌X33,菌落长出来了很多的但是做菌落PCR却都不对,为什么
土井挞克树
考虑是有杂菌污染,优势菌繁殖不明显。
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问
有人养过金葡菌usa4300吗
huarenqiang5
usa300里面一般都自带质粒,但你这都不知道保存的具体情况,做实验估计结果有影响。
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问
萤火虫荧光素酶的酶活检测
huarenqiang5
荧光素酶活性与细胞状态、转染条件、转染量、载体结构、启动子活性等有关。可以从这些方面查找一下原因。
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问
UGT1A1测序方法有哪些?
huarenqiang5
主要有:1、芯片法。 2、UGT1A1的基因型特异性荧光引物、缓冲液以及Taq酶等成分组成,采用PCR体外扩增的方法,在一条PCR引物的5’端标记荧光染料,在PCR扩增时,PCR产物带上荧光标记,然后采用高分辨率胶电泳对扩增片段进行分离,通过荧光检测系统确定扩增片段的长度,来实现对人类基因组DNA的UGT1A1基因TA6/6、TA6/7、TA7/7基因型进行定性检测。
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