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实验问答23,692,086 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

其他

问C57来源的BMDC做抗原提呈实验，请问该怎么做？

周末也要努力呀

1. 骨髓细胞培养：从C57小鼠的骨髓中收集细胞，并将其培养在含有GM-CSF和IL-4的培养基中，以促进骨髓细胞分化为BMDC。2. 培养BMDC：将骨髓细胞在培养皿中培养7-10天，每隔2-3天更换新的培养基。3. 收集BMDC：收集培养皿中的BMDC，可以通过轻轻洗涤的方式将非附着的细胞收集起来。4. 处理抗原：将需要研究的抗原（如蛋白质、多肽或细胞裂解物）加入到BMDC的培养基中，使其与B

2 回答1026 围观

问PEDV一种病毒，大家是怎么分离的呀，求救

dxy_mqg1dtg8

PEDV（猪流行性腹泻病毒）的分离通常涉及到以下步骤：1. 采集病毒样本：从猪体内的粪便、肠道、血液等样本中采集病毒样本。2. 病毒富集：将采集到的样本进行离心、过滤、超速离心等操作，以富集病毒。3. 细胞培养：将病毒样本接种到感受器细胞上进行培养，例如Vero细胞、PK-15细胞、LLC-PK1细胞等。4. 病毒分离：观察细胞的形态变化、病毒感染的效果等，通过形态学和免疫学等方法进行初步鉴定，筛

3 回答1157 围观

问HepG2细胞造急性酒精损伤模型需要无血清同步之后再造模么

高山云初

HepG2细胞造急性酒精损伤模型需要无血清同步之后再造模，造模后给药

3 回答554 围观

问髌下脂肪垫炎症评分

高山云初

髌下脂肪垫炎症评分标准可以用可以用hoffa进。

3 回答363 围观

问光遗传和钙成像病毒讨论

此用户已注销

怎么样楼主，你做的会影响么？会么

3 回答780 围观

问投稿时动物安乐死怎么写呢，跪求模板，我是这样描述的

sswei

宠物安乐死协议书宠物主人姓名电话号码宠物主人住址宠物种类宠物品种性别宠物特征年龄我清醒地认识到我的宠物病情危重,在目前已有的条件下无治疗价值,为避免宠物痛苦,我同意给我的宠物实行安乐死,一切责任由自己承担,与宠物医院及安乐死实施人无任何关系。宠物主人签字年月日

4 回答220 围观

问Caseviewer 显示如此，跪求大佬告知解决办法

sswei

意思是查看器找不到具有指定文件路径的幻灯片。需要重新指定文件路径。

3 回答3866 围观

问帕金森大鼠‖APO诱导转圈没有装置，可以人工观察数圈吗？

高山云初

用转圈装置或者人工观察数圈都可以

3 回答328 围观

问DC细胞的抗原提呈实验步骤？

周末也要努力呀

DC细胞抗原提呈实验步骤如下：1. 培养和收集DC细胞：使用培养基（如RPMI 1640）培养DC细胞，通常使用骨髓源或外周血单个核细胞（PBMC）分离的细胞。收集细胞后，用PBS洗涤细胞。2. 处理抗原：选择合适的抗原，如蛋白质、多肽或细胞裂解物。将抗原处理成合适的浓度。3. 刺激DC细胞：将DC细胞与抗原共同培养。通常使用1-2μg/mL的抗原浓度。培养时间可以根据实验需要而定，一般为24-4

3 回答1626 围观

问纯肽与钙螯合，加入9倍乙醇但没有螯合物的沉淀，如何能得到肽钙螯合物的沉淀呢？

dxy_sbyagsy6

同学你好，请问你解决了吗，我也遇到这个问题了，求求了🙏

5 回答433 围观

问有何种方法可以证明TLR4受体可以识别PGN?

周末也要努力呀

1. 细胞系实验：使用TLR4表达的细胞系（如HEK293T/TLR4细胞）和对照细胞系（如HEK293T/空白细胞）进行实验。将PGN添加到细胞培养基中，观察TLR4细胞系是否产生细胞因子（如TNF-α、IL-6等）的释放，而对照细胞系则不产生。这表明TLR4受体能够识别PGN并触发细胞信号通路。2. RNA或蛋白质水平的检测：使用实时定量PCR或免疫印迹等技术，检测TLR4基因或蛋白质的表达水

3 回答540 围观

问测定禽流感病毒H9N2的EID50，接胚后48h吸取尿囊液测血凝，发现都无血凝性，是怎么回事？-7稀释度死亡3个，-8死亡2个

土井挞克树

是否存在抗凝剂污染导致的凝集度改变，也有可能是细菌感染了

4 回答698 围观

问求问怎么用软件预测蛋白的靶标位点，用什么软件比较好，求问，有偿求助

Dr_劉医生

都是用机器学习的方法，比较常用的是CSS-Palm，入门相对简单，首先搜索“CSS-Palm”或者复制网站地址进入（http://csspalm.biocuckoo.org/）。 STEP1：点击“ONLINE”，左侧显示的是我们可以预测的修饰类型。比如我们以乙酰化为例，点击进入乙酰化位点预测界面。 STEP2：点击界面上方“PREDICTION”，这里需要用到的蛋白序列的FASTA格式，选中所

3 回答1751 围观

问用邻甲酚酞络合酮比色法测肽钙螯合物的钙含量时，是否需要将肽钙螯合物的钙脱除下来转变为离子钙再进行测定？如何脱除？

huarenqiang5

操作步骤：1、制备样品：①血浆、血清样品：血浆、血清按照常规方法制备，可以直接用于该试剂盒的测定，-20℃冻存，用于 Ca的检测。②细胞或组织样品：取恰当细胞或组织进行匀浆，低速离心取上清，-20℃冻存，用于 Ca的检测。③高浓度样品：如果样品中含有较高浓度的 Ca，可以使用 ddH2O稀释，不宜使用普通蒸馏水稀释。2、配制 Ca显色工作液：临用前，取 Ca Assay Buffer和 OCPC显

4 回答520 围观

问siRNA转染细胞，24小时可以提RNA吗？

龙大人驾到

在进行siRNA转染后的24小时内，通常无法直接从细胞中提取足够的RNA用于下游分析。这是因为siRNA转染后，siRNA需要一定时间才能进入细胞并发挥作用，以降低目标基因的表达水平。此过程需要一定的时间，并且目标基因的降低可能需要更长的时间才能观察到。通常，在进行siRNA转染后，需要等待一定的时间（通常是24至72小时）以使siRNA充分发挥作用并降低目标基因的表达。这样，细胞中的RNA水平才

5 回答3624 围观

问石蜡切片细胞不成形，部分组织脱落。求大神指点！应该怎么解决呢？

龙大人驾到

当在制备石蜡切片过程中遇到细胞不成形和组织部分脱落的问题时，以下是一些可能的解决方案：1. 固定和处理组织时注意优化：确保你在固定组织时使用适当的固定剂和处理方法。不同类型的组织和细胞可能需要不同的固定和处理条件。确保使用适当的浓度和固定时间，并遵循标准的组织处理步骤。2. 组织处理中的脱水和浸渍：在脱水和浸渍步骤中，确保逐渐将组织转移到石蜡中，以确保组织的完整性。逐渐增加浓度的醇溶液（例如，70

5 回答878 围观

问Lineweaver-Burk 双倒数法判断出对α-葡萄糖苷酶的抑制类型，具体步骤怎么做

龙大人驾到

使用Lineweaver-Burk双倒数法（Lineweaver-Burk plot）可以帮助确定对α-葡萄糖苷酶的抑制类型，常见的抑制类型包括竞争性抑制、非竞争性抑制和混合型抑制。以下是使用Lineweaver-Burk双倒数法进行抑制类型判断的具体步骤：1. 准备实验样品：准备一定浓度范围内的底物（α-葡萄糖）和不同浓度的抑制剂（例如，抑制剂A、B、C等）。确保所有试剂的浓度和制备方式准确无误

3 回答4559 围观

问用PBS重悬细胞300g离心10min，重复两次，第一次离心细胞沉淀还多，第二次离心没有看到细胞沉淀请问这是怎么回事

huarenqiang5

考虑可能是没有离下来或是你弃上清的时候将细胞团块不小心吸走了。

3 回答1192 围观

问c57小鼠，8周龄，结肠炎模型，需要定制高色氨酸饲料，饲料中添加色氨酸的量一般为多少啊？在原基础上添

huarenqiang5

饲料中在原基础上添加色氨酸为0.05%左右。

4 回答513 围观

问质粒转染和提取的全步骤

小小翻车鱼

以下是质粒转染和提取的全步骤：质粒转染步骤：1. 质粒DNA制备：首先从含有目标基因的质粒中提取质粒DNA。提取过程包括细胞裂解、质粒与染色体DNA分离、乙醇沉淀等步骤。2. 转染试剂和培养基的准备：选择合适的转染试剂，如脂质体转染试剂、电穿孔转染试剂等。准备好宿主细胞，如细菌、酵母、昆虫细胞或哺乳动物细胞，并将细胞接种到合适的培养基中。3. 转染操作：将质粒DNA与转染试剂混合，形成转染复合物。

4 回答5610 围观

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