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科研学霸天团,48小时有问必答
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问
秋水仙素处理为何可以诱发多倍体形成,除此之外还有什么替代品?
bamboopiggy
秋水仙碱能抑制有丝分裂,破坏纺锤体,使染色体停滞在分裂中期。紫杉醇也可以诱导
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问
流式检测时 荧光值是负的是怎么回事?
dxy_gwrp7ndq
这里的负值,针对的是信号分布,并非指表达强度是负数。
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问
小弟最近做RNA稳定性实验。用放线菌素D,参考大多数文章的浓度5。靶基因在2,4,6小时逐渐上升,求大佬解答
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问
请问有IBS-SSS量表吗?
天一湖医者
医学量表、计算器 / 消化 / IBS病情严重程度调查表(IBS-SSS)
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问
大肠菌群实验结晶紫培养是阳性,需要煌绿乳糖胆盐肉汤实验验证吗
Topmicro
需要,从结晶紫中性红胆盐琼脂平板上挑选可疑菌落分别接种到煌绿乳糖胆盐肉汤管内培养,观察产气情况进行验证。
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问
求问,我做的ROC曲线联合指标的面积比不上单个指标的面积,啥情况呢?我做的对不对啊,求大佬帮帮我说两句原因,我是个小白
bamboopiggy
如果单纯看你的说法,就是你的联合治疗,不如单药治疗,你首先看你下,你两个单药治疗的ROC曲线下面积是不是都大于0.5,如果都大于0.5,那没有办法了,如果其中一个小于0.5,你可以把这个结果翻转一下,再联合分析。
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问
20220412分光光度计培训 提问
bamboopiggy
是的,是仪器自动把光程归一化为1cm了。光程归一化为1cm后,则吸光值A为1时,相当于dsDNA浓度约为50ng/μL、或ssDNA浓度约为33ng/μL、或RNA浓度约为40ng/μL。由此,可根据吸光度估算核酸的浓度,这种计算在许多仪器中可自动进行。
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问
求助6.12.24孔板细胞铺板密度,有大佬能给4倍镜下的照片参考一下吗?
dxy_gwrp7ndq
一般最适浓度为5~10×105细胞/ml。如一般10cm皿的细胞约300-500万个,一些细胞个体小也能达到1000-2000万,可根据所需细胞数目取出部分作稀释或连续稀释后计数。
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问
测定酵母中的海藻糖含量,菌体已经收好存于-80摄氏度,拿出来之后可以先解冻了在用细胞破碎以破碎细胞吗?
Topmicro
可以先解冻再破碎,酵母有细胞壁比较皮实,而且解冻之后破碎也更方便。
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问
为什么药物对肿瘤细胞突然没效?
府宅
会不会与每个孔中细胞的数目有关系?如果你每个孔中细胞数目与文献采用的细胞数不一样,也会导致抑制率不同。还有细胞还受培养环境的影响,温度溶剂都与文献报道的一致吗?并且实验的干扰因素也很多,建议每一批次做三次重复实验。多设置几个药物梯度(一般都是做九个梯度);24h和48h接种不同的细胞密度。
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问
大概多久测一次过氧化氢酶活性
未来9
测定方法中说是一分钟测一次,共测4次
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问
样品中有无机杂质影响蛋白含量测定,有什么办法能降低干扰?
bamboopiggy
蛋白质的测定方法有好多,如:凯氏定氮法,双缩脲法,folin-酚法,考马斯亮蓝法,等等,你可以找一种与你的无机杂质不反应的方法来测。
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问
利用Ni-NTA纯化蛋白的buffer,里面的咪唑成分大概能保存多久?
天一湖医者
2-8度避光一般可以保存2年。
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问
重组人rac1蛋白检测生物活性方法
丁香粉猪猪
仅供参考可以看看这个,学习一下
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问
用新的镍珠纯化蛋白,目的蛋白为什么挂不上珠?
天一湖医者
1. 因为 His标签被包到了蛋白三维结构里面。镍介质无法接触His 标签;2. 纯化工艺不利于结合作用发挥,例如咪唑;3. 蛋白不稳定,标签掉落
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问
WB时怎么选择合适的内参蛋白呀
迟C迟
(1)根据样本的种属来源选择,如哺乳动物或者植物等(2)考虑目的蛋白的分子量大小,一般需要与目的蛋白的分子量相差5kd以上(3)根据蛋白表达位置选择不同的内参,不同的细胞器中选择的内参也不同
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问
WB结果中,目的条带后面为什么有细细的条带?
未来9
可能是样品溶解不好,或存在一定程度的蛋白降解
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问
请问在做bifc时,如何确定荧光发出的原因,是因为两个蛋白间相互作用,而不是因为两个蛋白浓度过高物理靠近发出的,如何界定这个浓度
天一湖医者
本实验需要设置阴性对照。即用pIB-YN155和pIB-nVC156 (VC156的N端带有atg,可以单独表VC156蛋白)。利用荧光显微镜观察时,需要调节荧光强度,在阴性对照组无荧光信号的情况下,观察实验组的荧光信号。
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蛋白质和脂质互作都有什么实验可以验证?
dxywode
如果你搜“PIP Strips”,就会发现,它是脂质与蛋白质相互作用的研究神器。Echelon专攻各种抗体、分析检测试剂盒、抑制剂等科研领域,尤其擅长以细胞信号、脂类代谢和标记物研究为主。为研究治疗诸如癌症、糖尿病、炎症、感染和心脑血管疾病专家提供了有效的科研工具。PIP条带是2 x 6 cm的疏水膜,其上有100 pmol的八种磷脂酰肌醇和七种其他重要的生物脂质。它们用于在简单的蛋白质-脂质叠加
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问
线虫寿命曲线应该如何制作
府宅
秀丽线虫进入成虫期开始产卵后,每天将秀丽线虫转移至新的培养基上。待10d后每天记录秀丽线虫的存活、死亡和丢失的数量。死亡判定标准为铂金丝轻轻碰触秀丽线虫半分钟不动则为死亡;当秀丽线虫在培养皿壁上干 、体内有子代孵化导致死亡的排除在外不计入死亡数内。收集每日数据,绘制寿命曲线
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