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科研学霸天团,48小时有问必答
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问
PCR混检电泳阴性正常无条带,但单检电泳阴性出现和阳性相同位置的条带,向高手请教?
汤姆卜丽波
混检的时候模板量混在一起每个都不高,通过扩增,假阴性结果很容易出现的。
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问
大体系PEI转染293S细胞,细胞1.undefined10^6/ml,质粒与PEI比例为1:4,第二天细胞过滤下降,是什么原因呢?有做过的吗
bamboopiggy
293S细胞是被驯化成能够悬浮培养且能够耐受低钙离子培养条件的293细胞系。你可以靠过梯度做质粒与pei的浓度比例:从1:2到1:8
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问
户外核酸检测时,室外温度较高,是否需要给试剂降温存放,最长存放多长时间不会影响检测结果?
汤姆卜丽波
最好低温存放,一般24小时之内不影响检测结果
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问
将目的基因通过BP反应构到中间载体中,菌P检测电泳条带大小正确,但是提质粒后跑电泳,质粒的条带大小不对,请问为什么啊?
汤姆卜丽波
可能菌液pcr.出现了假阳性,提质粒出来是空载体
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问
药品稳定性过程杂质超标,处方如何调整
天一湖医者
药品稳定性过程杂质超标,最好进行质控。如目前不做,则需进行研究,给出解释。并做好进行质控准备。处方可以根据情况进行同类药物调整。
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问
咽拭子试剂撒出,是不是整换都要重新采集?
未来9
不一定,要看洒落后剩余试剂的量够不够PCR检测的要求
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问
咽拭子采集以后要在多长时间之内检测?对温度有什么要求吗?
天一湖医者
在24小时内检测的话,4度保存就可以了,24小时外采集,0度保存。
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问
小鼠小肠固有层淋巴细胞提取细胞量都很少,综合了很多文献中的方法,细胞量依然达不到?求大家的建议。
秋秋欣欣
消化液要用不含钙离子的,均匀缓慢加入
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问
双荧光素酶的酶标仪使用
bamboopiggy
你要看你用的是那个厂家的仪器啊,这个一般第一次做,可以咨询平台的老师,或者找个做过的人带着你做,别自己去乱鼓捣。
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问
做蛋白组学Prm样本要设定几个重复,重复数在结果中怎么体现?重复数会影响审稿吗
balalaLy
至少3个,重复数体现在统计数据的bar值
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问
K599发根农杆菌注射大豆子叶,为什么只长愈伤不长根
dxy_g9y5gije
首先考虑植物激素使用问题,植物组织培养过程中,植物激素的使用顺序及比例都会影响结果,植物组织培养过程中,若只分裂而不分化出芽和根,其可能原因是细胞分裂素和生长素配比不对,你查查文献,看看人家都激素使用
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问
四联抗生素C57伪无菌小鼠构建
bamboopiggy
看参考文献,有人用的是灌胃的方法,你如果要小鼠喝的话,建议每天换液,因为抗生素也有个降解的时间啊。
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问
有使用APAP导致AML12 造模肝损伤的大神没?
汤姆卜丽波
体内外实验都有见过用APAP诱导急性肝损伤的,是可以的AML21和G2都可以
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问
初步做合成肽的抑菌圈时,订购的肽纯度要选在多少呢?
汤姆卜丽波
这种程度的筛选大概纯度在75以上就够用了
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问
蛋白质和三氯乙酸/苦味酸的反应原理?
bamboopiggy
蛋白质和三氯乙酸的反应是不可逆的。生物碱是植物中具有显著生理作用的—类含氮的碱性物质。凡能使生物碱沉淀,或能与生物碱作用产生颜色反应的物质,称为生物碱 试剂 。如鞣酸、苦味酸和磷钨酸等。当蛋白质溶液pH值低于其等电点时,蛋白质为阳离子,能与生物碱 试剂 的阴离子结合成性盐而沉淀。溶液中的蛋白亦能被有机酸沉淀,其中以三氯醋酸的作用最为灵敏而且特异
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问
Huh7细胞裸鼠皮下接瘤,瘤子比较软而且外面看是黑色,请问是正常的吗
汤姆卜丽波
正常的,本来恶性肿瘤所需的血供就更充分,瘤体内含有众多细小血管,只要不破溃化脓就可以
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问
请问大家jurkat转染siRNA的话,前一天铺板,铺12孔板的话,都是铺多少细胞呀
balalaLy
一般是按照转染时的细胞数达到50-60%的密度,如建议不要铺太多,多了影响转染效率,少了可以再等一等
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问
大质粒转染
迟C迟
电转或者化转都试试吧,哪种转进去长出来就行,注意验证。
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问
小鼠的脾脏做流式需要用到淋巴细胞分离液吗
yanlai000
我们一般都要淋巴细胞分离液密度离心,能裂红最好
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问
如何撰写综述?在肿瘤靶向治疗方面
天一湖医者
撰写综述需要阅读大量的文献,需要作者检索文献,筛选文献,从文献中提取重要的信息以及进行批判性的思考。如果读文献时,自己想到的如果不及时写下来,那么在写综述的时候,就需要超级好的记忆力。不过大多数人没有这么好的记忆力,所以, 读文献时,最好能将重要的内容和自己的想法写下来。要想一下,这篇文献应该放在综述里面的什么位置。有了这些笔记,写作时再进一步组织正文就容易得多。 最好避免在没有阅读笔记时写综述,
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