实验问答22,878,806 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

问放射处理克隆形成的一些问题

烧伤科常医生

设计两个组，一组不经过放射处理，另外一组经过放射处理观察，形成克隆的时间，就能知道是否克隆时间形成延长了

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问室内饲养蜘蛛如何人工制作洞穴

烧伤科常医生

一组挖好洞的，一组不挖洞的，观察蜘蛛是自愿钻到现成的洞里，还是自行挖洞

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问组织体内磺胺嘧啶浓度测定

土井挞克树

可能是产物重氮盐，重氮盐进一步与β-萘酚发生偶合反应，生成由橙黄到猩红色的沉淀。

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问HPV假病毒生产的感染率很低要如何解决？

Leila_Lei

是哪个型别呢？也在做这个实验，可以交流一下。

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问多肽浓度测定方法的选择及相关问题

huarenqiang5

这种情况一般使用BCA法进行测定，两种方法的对比如下: BCA法检测浓度下限可以达到25μg/mL，最小检测蛋白量达到0.5μg，在20-2000μg/ml浓度范围内有良好的线性关系； Bradford法检测浓度下限可以达到25μg/mL，最小检测蛋白量达到1μg，在 50～1000 µg/mL浓度范围内有良好的线性关系。

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问先冻干在进行脱色脱脂还是先脱色脱脂再冻干

烧伤科常医生

你所表述的第二个步骤程序是正确的顺序

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问样品前处理中脱色脱脂需要什么试剂及仪器

烧伤科常医生

CBE-5/10L亚临界萃取实验装备，引入plc电脑控制技术，物料萃取设备改为快开结构，用程序自动控制料容比，萃取时间，温度，压力次数等参数，使操作更简便，得到的数据更准确。

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问动物脱色脱脂是要先烘干弄成粉末，再加脱脂试剂进行脱脂吗

烧伤科常医生

我的经验是先烘干，然后再加脱脂试剂

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问刚刚接触这个，体外转录时，为什么需要还需要反向DNA oligo,将其退火后为双链转录模板，转录什么

dxy_mqg1dtg8

在体外转录实验中，反向DNA oligo的主要作用是用作DNA模板。由于反向DNA oligo是单链的，因此需要通过退火的方式将其转变为双链DNA模板。这样可以在转录反应中提供一个可靠的DNA模板，以便RNA聚合酶与其结合，从而合成RNA分子。反向DNA oligo可以编码各种类型的RNA，例如mRNA，siRNA，miRNA等。在转录反应中，RNA聚合酶会根据DNA模板序列合成RNA分子，这些R

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问外泌体在水凝胶中的释放

dxy_mqg1dtg8

从你的描述中，我猜测你是在使用水凝胶来固定细胞，并收集水凝胶上的外泌体。在这种情况下，你需要注意一些细节，以确保测量结果的准确性：1. 在测量前，需要将所有水凝胶上的外泌体充分释放。为此，可以使用一定浓度的洗涤缓冲液来洗涤水凝胶，以收集所有的外泌体。通常来说，需要多次洗涤，并将每次洗涤所得的上清汇总，用于后续的测量。2. 测量时，需要将每个时间点所得的上清进行分别测量。如果你想计算总释放量，可以将

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问5-氟尿嘧啶的正常使用剂量是多少，应该如何搜索。谢谢大家。

dxyc42u

单药静脉注射剂量一般为按体重一日10～20mg/kg，连用5～10日，每疗程5～7克（甚至10克）。若为静脉滴注，通常按体表面积一日300～500mg/m2，连用3～5天，每次静脉滴注时间不得少于6～8小时；静脉滴注时可用输液泵连续给药维持24小时。

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问嘌呤霉素用紫外线照射后还可能用吗

dxyc42u

可以先做预实验看看还有效果吗，紫外线容易使其化学结构改变

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问DNA斑点杂交加底物溶液为什么30min内甚至7小时都无斑点？是静止孵育吗

土井挞克树

可能是阻断封闭不足，建议将经过杂交和严格清洗后的膜用马来酸缓冲液漂洗1~5min；将膜在l00ul阻断液中孵育30min。

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问海参提蛋白前脱色脱脂方法

sswei

传统脱色方法包括活性炭吸附法等，但是这些方法损失率高，利用膜分离法脱色则会克服传统脱色方法缺点。

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问兔耳血液循环障碍要注意什么？

dxy_mqg1dtg8

注意以下几点可能有助于避免或减少兔耳血液循环障碍的发生：1. 确保兔子的饮食充足、均衡，提供足够的水和维生素，避免营养不良导致的贫血等问题。2. 经常检查兔子的体温、心率、呼吸等生命体征，及时发现异常并采取相应措施。3. 定期检查兔子的健康状况，发现疾病及时治疗，避免感染等问题。4. 给予适当的运动，防止长期缺乏运动引起的心血管疾病。5. 避免过度紧张、惊吓和不适当的处理方法，以免引起兔子的心理压

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问求问双倒数法测酶活计算步骤？

土井挞克树

双倒数作图法(double reciprocal plot),又称为林-贝氏(Lineweaver- Burk)作图法 1.Vmax[S] Km+[S] 两边同取倒数 2.Km 1/V= + 1/Vmax 1/[S] Vmax (林-贝氏方程) 3.V= 1/V 1/Vmax -1/Km 1/[S] 以“1/v”对“1/[s]”作图,直线与x 轴交点即为-1/Km。4.代入回归方程求得酶活曲线

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问1.如何去除杂交膜气泡？ 2.杂交液中鲑鱼精的作用？ 3.探针浓度有什么讲究？若杂交液含探针十几微升，每个探针都要十几微吗

土井挞克树

1.杂交膜气泡如果已经产生，一般选用震荡的方式去除。2.杂交液中鲑鱼精可以起到封闭样品中非特异性片段的作用

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问蛋白质提取方法优化（硫酸铵沉淀法，胃蛋白酶沉淀法）

dxyc42u

实验室的话一般采用蛋白酶沉淀法这样得到的蛋白质更纯，硫酸铵一般用于大规模提取蛋白

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问流式不同批次的结果是否有可比性？

feixue7758527w

据我所知，流式细胞结果还是只能同一批次进行对比的，不同批次结果没办法进行对比，只能进行实验组调整，放到同一批次进行比较。

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问氮蓝四唑法测定SOD活性时，反应液和酶液进行光照反应后，反应液出现混浊，暗中静止10分钟还是程混浊状态是什么原因？

loveliufudan

可能有以下几种原因： 1. 沉淀形成：在氮蓝四唑法中，光照反应会产生氮蓝四唑还原产物，有时会形成沉淀，导致反应液的混浊。这种沉淀可能是反应产物的沉淀或其他反应副产物的沉淀。 2. 蛋白质凝聚：反应过程中，可能发生蛋白质的凝聚现象，导致反应液的混浊。这可能是由于特定条件下蛋白质的聚集作用，例如过高的温度、pH变化或其他离子条件。 3. 反应失效或其他问题：在进行实验时，如果反应液中的某个组分出现问题

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