测序结果放入seqman后F和R链都是同一个方向，这是为什么？

别只看sequence，看一下你的峰图，是单一曲线，还是双曲线，还有你要克隆的序列是否存在回文结构？

有几种可能导致该情况的原因：

1. 样品污染：检查样品处理过程中是否存在污染，是否有样品重复等错误。
2. 混合体积不均：检查每个样品分别加入2ul DNA的过程中是否有样品积累多或少的体积，导致结果不同。
3. 反应条件不合适：检查试剂配制、混合、稳定性是否正确，反应温度、时间是否适当。
4. 其他设备问题：检查设备是否出现问题，如预热不到位，稳定性差等。

为了解决这个问题，需要先检查试剂配制和样品处理过程，再检查试剂是否稳定，然后再检查设备是否出现问题。

推测体系中还是有二聚体或多聚体形成。