实验问答22,383,403 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

问蛋白标签

龙大人驾到

可能有如下几方面的问题蛋白质表达水平过低：如果蛋白质的表达水平很低，那么Flag标签就可能很难被检测到。1.Flag抗体效仿不足：Flag抗体可能不够敏感，导致Flag标签没有被检测到。2.Flag标签不稳定：Flag标签在表达和纯化过程中可能不稳定，导致在Western blot实验中没有被检测到。3.Western blot技术问题：有可能是技术问题，例如抗体稀释比例不合适，板材过于热或者环境

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问求助想验证多糖和细胞膜上蛋白结合可以用什么方法

龙大人驾到

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问【SOS】转染实验实在是搞不出来😭

土井挞克树

你的试剂没有问题，考虑还是时间不合适，可以验证一下时间的适应性。

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问小鼠光遗传病毒注射？正常病毒和cre病毒的区别

loveliufudan

正常病毒和cre病毒的区别在于cre病毒通过把某些特定基因的表达删除，用于调控特定基因的表达。相比之下，正常病毒是在细胞中直接表达某个基因，不需要进行其他的基因操作。两种方法的区别在于，第一种方法是直接对普通C57小鼠注射，第二种方法则先对小鼠进行了一次基因调控操作。因此，第二种方法更灵活，可以在表达的基础上进行更多的操作，但同时也更复杂。

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问求助各位大神过氧化氢诱导细胞衰老模型怎么构建？用200uM刺激4h培养24h，b-半乳糖苷酶未染上色

龙大人驾到

构建过氧化氢诱导细胞衰老模型的方法如下：1.细胞培养：选择需要研究的细胞株，并在培养皿中进行细胞培养。2.添加过氧化氢：在培养液中添加适量的过氧化氢（通常为200 μM），然后用于刺激细胞4小时。3.细胞观察：在刺激后1天，观察细胞的生长情况，并进行相关的实验操作。对于b-半乳糖苷酶未染上色的情况，可能是由于染色方法不正确或染色时间过短造成的。也有可能是由于细胞衰老的过程影响了b-半乳糖苷酶的表达

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问分子实验两复孔具有可靠性吗

loveliufudan

一般来说，三复孔实验比双复孔实验更加可靠，因为它提供了三个独立的数据点，以降低实验误差。在双复孔实验中，仅有两个数据点，因此实验误差较大，可靠性较低。如果您仅使用双复孔实验，可以考虑重复实验以确保实验结果的可靠性。您也可以使用外标法对结果进行校正。如果您需要最大程度地提高实验结果的可靠性，建议您使用三复孔实验。请注意，实验条件（如样品类型、实验材料、仪器设备等）以及操作技巧也可能影响实验结果的可靠

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问不同曲线如何比较差异性

Dr_劉医生

直接做A、B因素曲线的ROC分析，对比灵敏度和特异度，

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问置信区间如何获得

Dr_劉医生

置信区间和p值是同时给出的，用统计软件算出

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问军事护理（解放军护理杂志）

Dr_劉医生

是的，只要送了外审就会给意见的

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问危险因素的meta分析

Dr_劉医生

可以呀，危险因素就是病例对照研究，也属于横断面研究

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问河北医药投稿

Dr_劉医生

正常，初审包括送外审起步3个月左右，耐心等着

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问细胞内胆固醇含量，比如总的胆固醇，游离胆固醇，甘油三酯怎么测定？除了高效液相色外

Dr_劉医生

用生化分析仪或者脂质试剂盒都可以测，不需要质谱

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问TargetMiner在线网站的入口怎么进去

Dr_劉医生

targetminer数据很早就停止维护了，网址就是这个，进不去了

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问如何测定4°储存的注射液的PH值？

Dr_劉医生

取溶液后用Sartorius的ph酸度计测量就行，用盐酸和氢氧化钠来配平

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问各位大佬，我在做Ni柱纯化发现我的目的蛋白被洗脱下来有很多杂蛋白，这是什么原因呢，有什么方法解决吗？箭头的地方是我的目的蛋白

土井挞克树

杂蛋白太多了，建议先纯化蛋白质。

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问想要研究不同比例的DNA和蛋白质分别包裹在纳米颗粒上同时处理DC引起的免疫反应差异该如何设计实验？

龙大人驾到

如果想研究不同比例的DNA和蛋白质分别包裹在纳米颗粒上同时处理DC引起的免疫反应差异，可考虑以下实验设计：1.生产纳米颗粒：按照比例合成不同比例的DNA和蛋白质纳米颗粒。2.动物模型：使用动物模型（例如小鼠），比较不同比例的DNA和蛋白质纳米颗粒对DC引起的免疫反应的影响。3.免疫反应评估：评估不同比例的DNA和蛋白质纳米颗粒对动物免疫系统产生的影响，包括测量细胞因子和抗原呈递分子的表达。4.数据

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问近亲结婚的遗传病风险

Dr_劉医生

应该不太会有了，近亲超过3代就可以忽略风险了

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问各位大神，请问合成的30多bp带有fam的双链DNA，进行核酸变性电泳时跑出来条带不单一，形状像吐司是什么原因呢？如下图

土井挞克树

dna纯度不够，先纯化dna再跑

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问请问哪里能买到牛病毒性腹泻病毒和阿卡斑病毒的标准毒株？

土井挞克树

可以问一下兽医相关实验室，牛病毒性腹泻病毒一般都有。

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问请问洁净室沉降菌监测，国标上万级的结果是≤3/cfu，采用静态监测和动态监测结果会不同吗？

龙大人驾到

洁净室的沉降菌检测主要目的是评估洁净室内的细菌数量。根据国标，万级洁净室的结果应不大于3个CFU/m3。静态检测和动态监测结果可能会有所不同，因为它们使用的方法不同。静态检测通常是在洁净室内放置一些培养基，然后在特定时间后收集样本，以检测细菌数量。动态监测则是不断监测洁净室内的空气，以评估细菌数量。由于静态检测和动态监测使用的方法不同，因此结果可能会有所不同。静态检测可能更容易受到环境因素的影响，

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