问:我准备做病毒空斑实验,不知到怎样配置甲基纤维素覆盖培养液,敬请各位指教 答:1、我是这么做的: 24孔板VERO,HSV1 1)24孔板预板 2)24h后,弃培养液,用hanks液洗1次 3)接种病毒液0.1ml/ ...
PCR的问题,无疑是绝大多数学生物的人都关心的问题。今天我们把相关内容整理出来,与大家共同讨论,希望对大家能有所帮助。 引物设计 所谓“工欲善其事,必先利其器”,这年头手工设计引物的人似乎不多,还是用软件方便些,防止你一不小心看走眼,丢一个碱基,同时计算起来也方便。设计软件有很多,既可以在线设计(如Primer3 http://frodo.wi.mit.edu/cgi-bi ...
一、实验动物(LaboratoryAnimal)基本概念及分类方法 (一)实验动物的定义:遗传背景明确、来源清楚、对其携带的微生物、寄生虫实行控制,经科学方法人工培育用于科学实验的动物。 (二)实验动物的分类方法 1、按遗传学控制分类 近交系(1nbredStrain) (1)定义:杂种动物经过相当于20代全同胞兄弟单纯连续繁殖,各条染色体上的基因趋于纯合,品系内个体差异趋于零。 (2)近交动物 ...
问:现在我在做HSV-2的培养。接种的细胞是Hep-2细胞,对HSV-2是敏感的。曾经复制过一次,3天后出现典型的CPE,效果很好。但是这次不知道怎么回事,4天了还是没有出现CPE,而且培养基都快变黄了。pH值对病毒的吸附、复制影响大吗?我该怎么办呢?盲传是怎么回事? 答:是不是两批接毒量不一样呀?如果毒量小的话,可能出现的晚,但也会出现的,同时与细胞的培养情况与有关的。盲传就是在不知是否有病毒 ...
自从1985 年Karny Mullis 发明了聚合酶链式反应以来,PCR 技术已成为分子生物学研究中使用最多、最广泛的手段之一,而引物设计是PCR 技术中至关重要的一环。使用不合适的PCR 引物容易导致实验失败:表现为扩增出目的带之外的多条带(如形成引物二聚体带),不出带或出带很弱,等等。 现在PCR 引物设计大都通过计算机软件进行。可以直接提交模板序列到特定网页,得到设计好的引物,也可以在本 ...
PCR产物的电泳检测时间一般为48h以内,有些最好于当日电泳检测,大于48h后带型不规则甚致消失。 假阴性,不出现扩增条带 PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备,②引物的质量与特异性,③酶的质量及活性 ④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。 一、模板 1、模板中含有杂蛋白质 2、模板中含有Taq酶抑制剂 3、模板中蛋白质没有消化除净,特别是染色体中的组蛋白 4、在提取制备模板时 ...
一、用途 ZF-501 型多功能紫外透射仪可广泛适用于PCR 工程、遗传工程、分子遗传学、微生物学、分子生物学、生物制品,医学卫生、药品药物的研究和检定。该仪器还可适用于卫生防疫部门,食品行业,纺织行业,石油橡胶化工行业,探矿行业,考古部门对文物的鉴定,公安部门的痕检及对假币假票的检定,适用于凡是需要进行荧光分析和检定的部门,是从事现代科学研究部门,检验监督部门的常用必备仪器。 ZF ...
紫外仪(型号:WD-9403A) 用途及适用范围 该仪器是提供白光和紫外光照射的装置。主要用于蛋白质电泳观察、照相。带箱内照明及相机升降装置。结构及特点WD-9403A型荧光紫外仪带有暗箱,无需暗室,可在明室中全天候使用。该仪器下部为白光透射灯箱,白光照度大。箱体上部配备有两种波长的紫外光源,波长分别为254nm、365nm,您可根据自己的需要,单独使用其中某个 ...
用途:能在紫外、可见光谱区域对样品物质作定性和定量的分析。 波长范围:200nm-800nm。 操作要点: 3、插上电源,打开开关,打开试样室盖,按“A/T/C/F”键,选择“T%”状态,选择测量所需波长,预热30分钟。 4、开始测量时要先调节仪器的零点,方法为: 保持在“T%”状态,当关上试样室盖时,屏幕应显示“ ...
分光光度计广泛用于室内空气质量检测,正确使用和保养非常重要,主要有以下几点: 1.坚持标准溶液现用现配,不使用过期标准液。 2.比色皿应该保持清洁,干燥。如有污物,可用稀盐酸清洗后,再用1:1的酒精与乙醚清洗凉干。禁止用硬物碰或擦透明表面。 3.防止仪器振动,影响光学系统。 4.在开机状态,不测量时,应该打开样品池门,否则,影响光电传感器寿命。 5.样品集中测量,避免开机次数,可延长光源寿命。 6 ...
1、基本原理 由光源D(或W)发出的复合光,经分光器G色散为单色光,此单色光经旋转扇形镜调制为1500转/分钟的交变信号,并分成S和R两束。此两束光分别通过样品池和参比池而到达接受器B。扇形镜构造如图2-2所示,R为反射光束,S为透射光束,D为不透也不反的背景,因此,由接受器(光电倍增管)输出电信号。与扇形镜同步旋转的编码器分别控制三路信号的通断,使之依次通过放大、转换及运算处理系统,并将扣除背 ...
1、第一步:本超滤机使用380v交流电,接通电源后必须看电机是否为箭头所指的方向转动,电机空转时间不易过长。 2、第二步:将超滤管两头共三个密封圈取开,以保持管道和超滤管接口处畅通(本机己取开密封圈试机)。如超滤黑色环氧电泳漆,因粘度大常常会堵塞过滤芯,建议超滤前使用180目或200目金属过滤网替代过滤芯,以防堵塞。如超滤透明电泳漆可使用本机配置的滤芯。 3、第三步:超滤时请先关闭底部反冲洗阀门, ...
1、将凝胶密封条框放在平玻璃上,然后将凹型玻璃与平玻璃重叠。 2、将两块玻璃立起来使其底端接触桌面,用手将两块玻璃板夹住放入电泳槽内,然后插入斜楔板(直面对玻璃,斜面对槽)到适中程度,即可灌胶。3、凝胶聚集后,轻轻取下梳子。 4、用手夹住两块玻璃板,上提斜楔板,使其松开,然后取下玻璃胶室去掉凝胶密封框,注意在上述过程中手始终给玻璃胶室一个压紧力,再将玻璃胶室凹面朝里置入电泳槽。插入斜楔板,将缓冲液 ...
DYCP-I琼脂糖水平槽是用来对少量核酸样品进行快速琼脂糖电泳的装置。制胶可在倒胶槽中完成。配备的多用途倒胶槽可以倒制6×6cm的小胶,也可以倒制12×6cm的宽胶,或6×12cm的长胶,还可以倒制12×12cm的大胶。本电泳槽还配有8种不同齿数和厚度的梳子供选择,包括大数量样品梳(25齿)、标准梳和各种制备梳。倒制好的各种大小的琼脂糖凝胶均可以放入 ...
一、组成部件 (一)装有铂金丝的贮液槽一对,配有冷却装置及电泳缓冲液流出口。 (二)凹型橡胶框,配有玻璃板,可分别制作厚度为lmm、1.5mm的凝胶板,操作时根据需要选择适当厚度的玻璃板及梳子配套使用。 (三)样品孔模具(梳子)用于电泳加样。 (四)固定贮液槽的螺丝杆及螺母4对,28D、30型为5对。 (五)橡胶管五根。两根长的用于连接冷 ...
脉冲场凝胶电泳(PFGE)的原理大致为: 细菌包埋于琼脂块中,用适当的内切酶在原位对整个细菌染色体进行酶切,酶切片段在特定的电泳系统中通过电场方向不断交替变换及合适的脉冲时间等条件下而得到良好的分离。 PFGE中内切酶的选用至关重要,所采用的内切酶常为寡切点酶(low frequency cleavagerestric-tionendoucleases),这种酶切后的片段少而大,适合于作PFGE电 ...
生物化学与分子生物学的研究工作经常需要对电泳分离后的DNA进行分子杂交,但琼脂糖不适合于进行杂交操作,1975年,Southren创造了将DNA区带原位转移到硝酸基纤维素膜(NC膜)上,再进行杂交的方法,被称为Southren印迹法。随后,Alwine等将类似方法用于RNA印迹,被戏称为Northern印迹,1979年Towbin等设计了将蛋白质从凝胶转移到硝酸纤维素膜的装置,将蛋白质转移到膜上, ...
一般琼脂糖凝胶电泳只能分离小于20kb的DNA。这是因为在琼脂糖凝胶中,DNA分子的有效直径超过凝胶孔径时,在电场作用下,迫使DNA变形挤过筛孔,而沿着泳动方向伸直,因而分子大小对迁移率影响不大。如此时改变电场方向,则DNA分子必须改变其构象,沿新的泳动方面伸直,而转向时间与DNA分子大小关系极为密切。 1983年Schwartz等人根据DNA分子弹性弛豫时间(外推为0的滞留时间)与DNA分子大小 ...
肿瘤细胞在组织培养中占有核心的位置,首先癌细胞是比较容易培养的细胞。当前建立的细胞系中癌细胞系是最多的。另外肿瘤对人类是威胁最大的疾病。肿瘤细胞培养是研究癌变机理、抗癌药检测、癌分子生物学极其重要的手段。肿瘤细胞培养对阐明和解决癌症将起着不可估量的作用。
培养细胞的完全培养基由基础培养基(如MEM)和添加剂(如血清或无血清培养用的某些确定的激素及生长因子)组成,下面介绍培养基及培养基中添加的成分的特性和用途。