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噬菌体展示技术

噬菌体展示技术是将外源蛋白或多肽的DNA序列插入到噬菌体外壳蛋白结构基因的适当位置,使外源基因随外壳蛋白的表达而表达,同时外源蛋白随噬菌体的重新组装而展示到噬菌体表面的生物技术。到目前为止,人们已开发出了单链丝状噬菌体展示系统、λ噬菌体展示系统、T4噬菌体展示系统等数种噬菌体展示系统。本文主要概述了噬菌体展示技术的基本原理、噬菌体展示系统研究以及技术特点等,并跟踪了目前该领域的最新研 ...

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影响双向电泳分离效果的若干实验条件比较研究

影响双向电泳分离效果的若干实验条件比较研究.pdf ...

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高效毛细管电泳(HPCE)的基本原理

高效毛细管电泳(high performance capillaryelectrophoresis,HPCE)是近年来发展起来的一种分离、分析技术,它是凝胶电泳技术的发展,是高效液相色谱分析的补充。该技术可分析的成分小至有机离子、大至生物大分子如蛋白质、核酸等。可用于分析多种体液样本如血清或血浆、尿、脑脊液及唾液等,HPLC分析高效、快速、微量。 电泳迁移 不同分子所带电荷性质、多少不同,形状、大 ...

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用PCR进行基因分型

与许多一次做数百块Southern blots的研究人员一样,我第一次用PCR做基因分型(genotyping)时觉得见效很快,不再需要等几天才能看到结果,不再需 要DNA显微图像或者操作紫外线了。随着技术的不断进步,RCR使基因组学和转录组学发生了翻天覆地的变化,甚至随着免疫PCR的普及开始进军蛋白组学。 目前有许多以RNA为基础的基因分型技术,有些只是名称不同,简单到只是跑块胶,有些很复杂,需 ...

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人类血小板抗原1~4系统基因分型

摘要 目的:建立人类血小板抗原1~4系统序列特异性引物(PCR-SSP)分型方法。方法:合成14条引物,采用PCR-SSP方法对25名健康献血者的HPA-1~4系统进行基因分型;分型结果与采用等位基因特异性寡核苷酸点杂交(PCR-ASO)获得的结果进行比较。结果:以PCR-SSP方法对HPA 4个系统进行分型均取得了明确、满意的结果,且与PCR-ASO方法获得的结果完全一致。结论:人类血小板抗原P ...

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READIT®单核苷酸多态性基因分型系统

单核苷酸多态性基因分型系统.pdf ...

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Immunoprecipitation of Proteins

1.Wash adherent cells twice in the dish or flask with ice-cold PBS and drain off PBS.Wash non-adherent cells in PBS and centrifuge at 800 to 1000 rpm in a table-top centrifuge for 5 minutes to pellet ...

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6xHis-tagged protein purification using Qiagen Ni-NTA Column

Buffers: Lysis Buffer (1 liter) 50 mM NaH2PO4 6.90g NaH2PO4.H2O (MW 137.99g/mol ) 300 mM NaCl(up to 2M)17.54gNaCl(MW 58.44)or 60ml 5M 10 ...

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PREPARATION OF PROTEIN A SEPHAROSE CL 4B BEADS

Swelling and Storage 1.Resuspend .2 gm of beads (= 1.0 ml swelled bead volume)in 40 ml of distilled water.Let swell for at least 2 hours. 2.Wash beads twice in (10 ml each wash).Spin in clinical or ta ...

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GST融合蛋白纯化

GST Protein Prep. Ver.2 1) Grow 50ml of culture in LB or TB +antibiotic o/n at 37_C shaker. 2) Dilute culture in LB or TB +antibiotic 1:10 3 ...

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Modified Lowry Protein Assay

Hancock Laboratory ,Department of Microbiology and ImmunologyUniversity of British ColumbiaBritish ColumbiaCanada http://www.cmdr.ubc.ca/bobh/methods/PROTEINASSAY.htm (Sandermann and Stromiger.1972.J. ...

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蛋白的生物活性测定方法

结晶紫法活性测定 1、取对数生长期的人胰腺癌SW1990细胞,用0.25%胰酶(以无钙镁离子PBS溶液配制,pH7.4)消化后,加入RPMI-1640培养基(10%新生牛血清,100U/ml青霉素,100U/ml链霉素,pH7.2)吹打细胞,使形成细胞悬液。进行细胞计数,使细胞数为2~2.5×105个/ml。接种于96孔细胞培养板,100µl/孔。接种细胞时须不断摇动细胞悬 ...

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Western Blot 实验试剂选购指南

(一)蛋白质电泳 1.请参照常规电泳操作. 2.分子量标准: 可选择普通分子量标准或预染的分子量标准.在选择预染的分子量标准时要注意其优点和缺点: 优点: 在电泳过程中可监控蛋白质分离状态; 可指示转印中蛋白质的转印效率. 缺点: 染料影响蛋白质移动速度;分子量测定略欠精确;影响蛋白质与膜的结合力. 购买信息: 中范 ...

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原核表达--宿主菌株选择指南

在原核蛋白表达过程中,选择构建一个合适原核表达体系需要综合考虑3大因素:表达载体、宿主菌株、表达诱导条件以获得最满意的表达效果。事实上,在平时的实验中,最容易被忽视的就是宿主菌的选择――多数人会直接选择自己实验室曾经用过的表达菌株,或者是载体配套的菌株,而不去追究原因――即使表达结果不佳,大多在表达条件和载体上找原因,也不会考究菌株的选择是否适合。 作为原核表达的宿主,对外源基因的表达会产生一定的 ...

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T7Select 噬菌体展示系统

T7Select™ 噬菌体展示系统是Novagen开发的基于T7噬菌体(而非传统的M13)创新的基因发现研究产品。目的序列(C-端)与T7基因10 衣壳蛋白而表达得到的多肽和蛋白即可暴露(展示)与病毒(T7噬菌体)的表面。复制周期短,细胞质蛋白组装,操作和储存方便,超高克隆效率,以及T7噬菌体强大的天然特性使Novagen的T7Select成为替代传统M13系统的更好选择,用于高效文库 ...

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染色质免疫沉淀法-Chromatin immunoprecitation(ChIP)

染色质免疫沉淀法(Chromatin immunoprecitation,ChIP)是研究体内DNA与蛋白质相互作用的重要工具。它可以灵敏地检测目标蛋白与特异DNA片段的结合情况,还可以用来研究组蛋白与基因表达的关系。核小体组蛋白可以发生多种翻译后的共价修饰,如乙酰化、甲基化、磷酸化、泛素化等,这些共价修饰与真核基因的表达密切相关。根据“组蛋白密码”假说,组蛋白的各种共价修 ...

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简化SSH法寻找差异表达基因

无论是从一个胚胎细胞分化为不同的组织器官,或者是从正常的组织突变为肿瘤组织,都可能涉及在同一基因组背景下不同基因的差异性表达。寻找差异表达的基因就有可能揭示细胞分化的机制或者肿瘤的成因,因而也就成为一项热门的技术。 寻找差异表达的基因有不少方法,抑制消减杂交(SSH)是比较有效的一种方法。以Clontech的PCR-Select cDNA Subtraction Kit为例:将样品(tester) ...

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General Principles of Immunoprecipitation

General Principles of Immunoprecipitation Lysis buffer. The choice of lysis buffer depends on what kind of IP you are doing. RIPA buffer gives the lowest backgroundbut can denature some kinases.It als ...

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Immunoprecipitation and Immune Complex kinase assay--according to Tamara Hurley

1)In the cold roomwash cells with cold "Tris" (the same stuff used for TC). Spin down the cells if you are working with suspension cells in a low speed swinging bucket centrifugeresuspend in ...

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Lowry Protein Assay

Lowry Protein Assay Laboratory of P.J.HansenDept.of Animal SciencesUniversity of Florida http://www.animal.ufl.edu/hansen/Protocols/LOWRY.htm The Lowry procedure is one of the most venerable and wide ...

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