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Purpose The protocol describes how to prepare human tonsil lysate for use in purification of ICAM-1LFA-1and PNAd. Materials Safety Equipments Lab Coat Latex Gloves Face Mask Bench Paper Fresh human to ...

选择材料及预处理 以蛋白质和结构与功能为基础，从分子水平上认识生命现象，已经成为现代生物学发展的主要方向，研究蛋白质，首先要得到高度纯化并具有生物活性的目的物质。蛋白质的制备工作涉及物理、化学和生物等各方面知识，但基本原理不外乎两方面。一是得用混合物中几个组分分配率的差别，把它们分配到可用机械方法分离的两个或几个物相中，如盐析，有机溶剂提取，层析和结晶等；二是将混合物置于单一物相中，通过物理力场的 ...

一个经典的《细胞生物学》教程 细胞生物学》教程ＰＰＴ下载连接 网址： 第一章 历史与展望 http://www.cella.cn/jxck/01.pdf 第二章 实验技术 http://www.cella.cn/jxck/02.pdf 第三章 细胞基本结构 http://www.cella.cn/jxck/03.pdf 第四章 质膜及其表面结构 http://www.cella.cn/jxck/0 ...

1983年Warren和Marshall从人胃粘膜成功地分离出幽门螺杆菌（Hp）之后，Hp与胃炎、消化性溃疡的相关性引起人们极大的兴趣。人们推测其可能成为这类疾病的致病因素之一。许多研究者正进一步探索其致病机理，并从不同角度寻找快速、可靠的检测方法。迄今为止，检测Hp的方法包括组织标本培养，切片染色，细菌直接涂片染色，快速尿素酶测定及13C尿素呼吸试验和14C尿素呼吸试验等。除尿素呼吸试验外其余方 ...

Bacterial Protein Extraction (mini-scale)Using B-Per B-Per (PierceCat number: 78248)Extraction of 1.5ml bact.culture OD600nm 1.5-3.5 A useful procedure for initial screening of expression conditions i ...

Hattoti's protocol adapted to cell culture: Hattori MTugores AVeloz LKarin MBrenner D (1990)A simplified method for the preparation of transcrip-tionally active liver nuclear extracts.DNA Cell Biol.Vo ...

Publisher: Blackwell Publishing Limited Number Of Pages: 488 Publication Date: 2006-06-01 Sales Rank: 62710 ISBN / ASIN: 1405142650 EAN: 9781405142656 Binding: Hardcover Manufacturer: Blackwell Publi ...

Yeast Nuclear Extract (Small Scale) Hahn Lab (adapted from J.LeatherwoodPtashne lab) last modified MonAug 272001 Cell Growth 3 liters of cells are grown in YPD (3% glucose)to A600 of 3-5.Antifoam A (t ...

酶联免疫吸附试验是用酶标记的抗体（或SPA）检测未知抗原或抗体的方法。此法敏感性高，特异性强。常用的是ELISA方法，间接法，双抗体法和抗原法。本次试验介绍，酶联葡萄球菌蛋白A免疫分析法。ELISA法原理如下，见图9 1.加抗原使之吸附于固相载体（如塑料反应板） 2.洗涤加待测血清 3.洗涤加酶标记SpA& ...

These protocols should yield enough cytosol and organelles for 1-200 MT/Organelle motility assays. Solutions and Reagents • Freshly removed or flash frozen rat liver • PBS •Homogeniz ...

Preparation of cell lysates from E.coli by enzymatic lysis Materials Chemicals lysosyme Lysis buffer 50 mM Tris-HCl pH 7.5 50-200 mM NaCundefined 5% glycerol (v/v) 1 mM DTT 1 mM PMSF~undefinedThe NaCl concentration ...

1.Wash adherent cells twice in the dish or flask with ice-cold PBS and drain off PBS.Wash non-adherent cells in PBS and centrifuge at 800 to 1000 rpm in a table-top centrifuge for 5 minutes to pellet ...

一些真核蛋白在原核宿主细胞中的表达不但行之有效而且成本低廉，然而许多在细菌中合成的真核蛋白或因折叠方式不正确，或因折叠效率低下，结果使得蛋白活性低或无活性。不仅如此，真核生物蛋白的活性往往需要翻译后加工，例如二硫键的精确形成、糖基化、磷酸化、寡聚体的形成或者由特异性蛋白酶进行的裂解等等，而这些加工原核细胞则无能为力。需要表达具有生物学功能的膜蛋白或分泌性蛋白，例如位于细胞膜表面的受体或细胞外的激素 ...

以已知抗体(抗HBs)包被载体，然后将含有抗原的待检标本加入，共同孵育后，抗原结合于包被抗体上，再加入酶标记特异抗体(酶标抗HBs)，酶标抗体连接到抗原上，最后加入底物溶液，根据颜色反应来判定抗原含量。 一、材料 HBsAg试剂盒，本试剂盒含: 1、包被抗-HBs反应条 ...

将克隆化基因插入合适载体后导入大肠杆菌用于表达大量蛋白质的方法一般称为原核表达。这种方法在蛋白纯化、定位及功能分析等方面都有应用。大肠杆菌用于表达重组蛋白有以下特点：易于生长和控制；用于细菌培养的材料不及哺乳动物细胞系统的材料昂贵；有各种各样的大肠杆菌菌株及与之匹配的具各种特性的质粒可供选择。但是，在大肠杆菌中表达的蛋白由于缺少修饰和糖基化、磷酸化等翻译后加工，常形成包涵体而影响表达蛋白的生物学活 ...

一、MTT比色法检测细胞活性 （一）原理 活细胞内线粒体琥珀酸脱氢酶能催化无色的MTT形成蓝色的甲肷，其形成的量与活细胞数和功能状态呈正相关。对细胞活力有影响的表达蛋白活性检测可以通过MTT比色法进行。 （二）试剂准备 1、青链霉素溶液（100X）：青霉素100万U，链霉素100万U，溶于100mlddH2O中抽滤除菌。 2、L15基础培养基：1000mlL15培养基，加2g碳酸氢钠，10ml 1 ...

一、原理 细菌体中含有大量蛋白质，具有不同的电荷和分子量。强阴离子去污剂SDS与某一还原剂并用，通过加热使蛋白质解离，大量的SDS结合蛋白质，使其带相同密度的负电荷，在聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）上，不同蛋白质的迁移率仅取决于分子量。采用考马斯亮兰快速染色，可及时观察电泳分离效果。因而根据预计表达蛋白的分子量，可筛选阳性表达的重组体。 二、试剂准备 1、30%储备胶溶液：丙烯酰胺（Acr）29. ...

YEAST TWO-HYBRID SCREEN WITH LIBRARY AND BAIT (The following protocol is for use with the LIBRARY transformation only) Day 1: Grow an overnight culture of a single colony of yeast transformed with bai ...

可溶性白细胞介素2受体SIL-2R存在于人的血清、尿液及脑脊液中，其浓度的高低与许多疾病的发生、发展、治疗效果及预后有密切联系，如成人T淋巴细胞白血病(ATL)艾滋病、B细胞慢淋、毛细胞白血病，以及肾移植后发生急性排斥反应时或异基因骨髓移植发生移植物抗宿主时，患者血清中SIL-2R水平明显升高。SIL-2R的检测多采用酶联免疫吸附技术，其中夹心法ELISA是一种较简单的检测方法，国外已广泛应用于临 ...

Il-8是一种分子量为8～10kD的多肽，对嗜中性粒细胞，T淋巴细胞、嗜硷性粒细胞具有趋化作用，并可激活嗜中性粒细胞，是一种重要的炎症介质。在严重感染病人的血清中、炎症局部渗出液中都可检测到高水平的IL-8.此外，近年来的研究表明，IL-8可能与各种组织缺血后再灌注损伤的发生有关。我们采用两株自制的单克隆抗体建立了夹心法ELISA用于检测IL-8，敏感性可达156Pg/ml，操作简单，重复性良好， ...