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        RIA和IRMA的异同点

        互联网

        10213

        1、标记物在RIA中核素标记抗原,在IRMA中核素标记抗体。抗原有不同种类,根据其化学结构,标记时需用不同的核素和不同的方法。抗体为蛋白质,有利于碘化标记,不同抗体标记方法基本相同。标记抗体的比活度高,提高了分析的灵敏度。

        2、反应速率反应速度与反应物的浓度呈正比,在IRMA中标记抗体是过量的,而且不存在竞争性结合复杂的反应,所以反应速度较RIA快。在RIA中抗体量是微量的,所以一定要用高亲和力的多克隆抗体,而在IRMA中应用亲和力较低的单克隆体也能得到满意的结果。

        3、反应模式RIA为竞争抑制,测得放射性的量与受检抗原呈反比。IRMA为非竞争结合,剂量反应曲线为正相关的直线关系。

        4、特异性在比位点IRMA中,一般均应用针对不同位点的单克隆抗体,其交叉反应率低于应用多克隆抗体的RIA。

        5、标准曲线的工作浓度通常RIA的工作范围为2~3个数量级,而RIMA可达3个数量级以上。

        6、分析误差RIA中加入的抗体和标记抗原都是定量的,加样误差可严重影响测定结果。IRMA中标记和固相抗体在反应中都是过量的,只有受检标本的加样误差才会影响分析结果。因此,IRMA的批内和批间变异均比较小。

        7、其他RIA可以测定大分子量与小分子量的物质,双位点IRMA只能测定在分子上具有2个以上抗原表位的物质。

        在RIA中应用的多为克隆抗体,亲和力和特异性要求较高,但用量很少。IRMA中标记抗体和固相抗体用量较多,一般均用来源丰富、特异性较高的单克隆抗体。

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