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大鼠胰岛细胞原代培养

一周龄Wistar大鼠,断颈处死,于75%乙醇浸泡15分钟,无菌取出胰脏,于冰冷无菌D-Hanks液中漂洗,用眼科剪仔细清除脂肪、包膜、血管等胰外组织,转入青霉素小瓶中,加入少量无菌D-Hanks液,用眼科剪剪成0.1-1.0mm3大小的碎片,用滴管轻轻吸出上层细小脂肪碎块和油滴,再用无菌D-Hanks液反复清洗8~10次,加入10倍体积无菌消化酶液,38℃±1℃消化,消化过程中不断 ...

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毛细管电泳原理、分离模式、相关技术及发展趋势

一、毛细管电泳的兴起与发展 毛细管电泳(capillaryelectrophoresisCE),又称高效毛细管电泳(HPCE)是近年来发展最快的分析化学研究领域之一。1981年Jorgenson等在75μm内径的毛细管内用高电压进行分离,创立了现代毛细管电泳。1984年Terabe等发展了毛细管胶束电动色谱(MECC)。1987年比Hjerten建立了毛细管等电聚焦(CIEF),Cohen ...

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放射免疫分析法原理及操作注意事项

放射免疫分析的原理:就是利用放射性核素标记抗原或抗体,然后与被测的抗体或抗原结合,形成抗原抗体复合物的原理来进行分析的。它又分为两种方法。 一、竞争性RIA,又称传统RIA 主要特点:标记的是抗原。其原理:未知抗原Ag+标记抗原Ag +已知定量抗体Ab标记抗原与抗体复合物AgAb+未知抗原与抗体复合物Ag Ab+游离标记抗原Ag (去除)(未知抗原多,标记抗原与定量抗体结合的复合物就少,表现为负相 ...

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第五代放射免疫分析方法及有关问题探讨

磁性微粒子固相RIA是最近发展起来的一类新型RIA,它克服了目前市售常规试剂检测程序多,流程长的缺点,已列为第五代RIA技术。本文就试剂制备,免疫反应模式、技术特征和对比分析及应用前景等方面作简要 评述。

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HP4890D气相色谱仪操作说明

HP4890D气相色谱仪系统通过了各种严格的测试和检验,以保证其符合各项安全和电磁性能方面的工业标准。另外,它还通过了一项测试,即确保在电压波动、温度、湿度和震动等超出规定范围时,系统可保持正常的运行。HP4890D GC是由在现代气相色谱发展史上曾享誉全球的HP5890 GC发展创新而推出的。HP4890D GC继承并发展了HP5890 GC杰出的色谱性能和可靠耐用的特点,是实验室日常分析的理想 ...

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气相色谱仪使用注意事项

一、进样应注意问题 手不要拿注射器的针头和有样品部位、不要有气泡、吸样时要慢、快速排出再慢吸,反复几次,10ul注射器金属针头部分体积0.6ul,有气泡也看不到,多吸1~2ul把注射器针尖朝上气泡上走到顶部再推动针杆排除气泡,(指10ul注射器,带芯子注射器凭感觉)进样速度要快(但不易特快),每次进样保持相同速度,针尖到汽化室中部开始注射样品。 二、安装色谱柱 1.安装拆卸色谱柱必须在常温下。 2 ...

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高效毛细管电泳的临床应用及进展

高效毛细管电泳(high performance capillary electriphoresis,HPCE)上在传统电泳基础上继现代高效液相色谱技术之后发展起来的一种新型高效分离技术,由于它具有无法比拟的高效和快速性,因而受到越来越多科学家们的青睐。 一、毛细管电泳的发展史 1967年在高电场作用下,以3mm直径的毛细管内进行自由溶液的区带电泳,1974年报道了以200~500um ...

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HPLC故障及排除方法

《HPLC故障及排除方法》下载 点击这里下载 ...

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HPLC基础知识

鉴于HPLC应用在药品分析中越来越多,因此每一个药品分析人员应该掌握并应用HPLC。 I.概论一、液相色谱理论发展简况色谱法的分离原理是:溶于流动相(mobile phase)中的各组分经过固定相时,由于与固定相(stationary phase)发生作用(吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和)的大小、强弱不同,在固定相中滞留时间不同,从而先后从固定相中流出。 ...

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Chromatography

What Is It? Hello everyone and welcome to the wonderful world of chromatography! What is chromatography you ask?? Well quite simply it is a broad range of physical methods used to separate and or to a ...

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气相色谱质谱联用仪的使用方法

仪器名称:气相色谱质谱联用仪 仪器型号:Agilent GC6890-5975I MS 生产厂家:美国Agilent公司 使用方法:气相配有顶空进样器、FID检测器; 质谱为最新四极杆质量分析器。 具体使用方法: 一、开、关机顺序: 开机:通氮气→开电源→设置温度(柱箱、汽化)→加热→通空气、氢气→点火→调准基线→进样 关机: ...

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怎样选择色谱柱

现代高效液相色谱中,分离效果好坏很大程度上取决于色谱填料的选择。但是色谱填料的选择范围很宽,要做合适的选择,必须对此有一定的认识和了解。 1、正相色谱 正相色谱用的固定相通常为硅胶(Silica),以及其他具有极性官能团,如胺基团(NH2,APS)和氰基团(CN,CPS)的键合相填料。由于硅胶表面的硅羟基(SiOH)或其他团的极性较强,因此,分离的次序是依据样品中的各组份的极性大小,即极性强弱的组 ...

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如何选择紫外分光光度计

紫外分光光度计大量用于实验室研究。如何选择和购买紫外分光光度计对于研究人员来说是很重要的。紫外分光光度计该如何选择呢?紫外分光光度计的选择主要考虑光学构造、光谱范围、样品类型和分析工具。 研究者们有众多的新紫外光分光光度计可选。自从60年前紫外分光光度计出现在实验室的工作台之后,这种能解决广泛难题的仪器可以从单一波长的测量到高性能多光谱进行测量分析。科学家们选择时需要根据自己实验室的需要和目的用途 ...

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RNA-biotin based pulldown assays for the detection of siRNA targeted genomic regions and siRNA directed histone modifications (PROT32)

Introduction The recent discovery of RNA interference and in particular the observation that siRNAs can modulate gene expression at the level of transcription i.e. small-interfering RNA (siRNA) direc ...

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分光光度计的应用常识

分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。常用于核酸,蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。 分光光度计的简单原理 分光光度计采用一可以产生多个波长的光源,通过系列分光装置,从而产生特定波长的光源,光源透过测试的样品后,部分光源被吸收,计算样品的吸光值,从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。 核酸的定量 核酸的定量是分光光度计使用频率最高的功能。可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸,单链、双 ...

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TSA Treatment of Mammalian Cells (PROT09)

Introduction Prolonged treatment of proliferating mammalian cells with low doses of a histone deacetylase inhibitor trichostatin A specifically affects pericentric heterochromatin. Relocation of these ...

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紫外可见分光光度计的使用注意

(一)使用的吸收池必须洁净,并注意配对使用。量瓶、移液管均应校正、洗净后使用。 (二)取吸收池时,手指应拿毛玻璃面的两侧,装盛样品以池体的4/5为度,使用挥发性溶液时应加盖,透光面要用擦镜纸由上而下擦拭干净,检视应无溶剂残留。吸收池放入样品室时应注意方向相同。用后用溶剂或水冲洗干净,晾干防尘保存。 (三)供试品溶液浓度除各该品种已有注明外,其吸收度以在0.3~0.7之间为宜。 (四)测定时除另有规 ...

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S53/54紫外分光光度计使用说明

开机自检与自校: 本仪器具备计算机自检与波长自校正功能,开机后显示窗两侧8灯会亮,指示进入自检与自校状态,约5分钟。 预热: 仪器开机自检与自校成功后,应30分钟预热后才能进行测定工作。如紧急应用时请注意随时调0%T,调100%T。 重调100%基线: 目的是精校100%基线。调整时机:要对某波段范围作精密波长扫描曲线前;扣除参考样品背景时或示差分析;开机一定时间后;操作程序如下:  (1)在样品 ...

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Gene Knockout Techniques Standard Screening PCR

10 ul reactions amounts per reaction Make MM for 1 extra reaction every 6 ...

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Gene Knockout Techniques Poison Primer Technique

Introduction PCR protocols to detect rare deletions in DNA from complex populations of mutagenized worms typically depend on a large size differential between the wild-type product and the deletion p ...

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