This method is derived from a procedure developed by Toby Bradshaw and the Poplar Molecular Genetics Cooperative. We have tested the procedure with a variety of Populus species as well as tobacco and ...
Procedure Preheat Extraction Buffer at 60°C. Weigh 100 mg of fresh leaf tissue and grind it to powder in Liquid Nitrogen in a chilled mortar and pestle. Add 0.5 ml of TE buffer to the tube. Ce ...
Solutions: Extraction buffer: 200 mM Tris-HCl pH 7.5 250 mM NaCl 25 mM EDTA 0.5% SDS Arial He ...
A protocol / method / schedule /procedure for extraction / isolation of both DNA and RNA from the same material typically plant leaf / leaves (See also DNA Isolation protocol) 1) Take one medium siz ...
CTAB TECHNIQUE / Method / Schedule / Protocol FOR DNA ISOLATION / DNA EXTRACTION FROM PLANT LEAF / LEAVES SAMPLES (see also DNA RNA double isolation procedure if both DNA and RNA are needed) Reagent ...
1.collect piece of tissue (e.g. pieces of a leaf or flower) in Eppendorf tube containing 40 ml 0.25 N NaOH 2.put in boiling H2O for 30 sec (optimum may need to be determined for each type of tissue f ...
Arial Helvetica sans-serif" size="2"Component Arial Helvetica sans-serif" size="2"mg/l in MS Arial Helvetica sans ...
1.weed out the plant pot leave only about 3 to 8 tall and vigorous plants (in a regular 5 cm pot) 2.on an individual inflorescence cut off all the opened flowers (older than stage 13) the youngest de ...
We use Dimilin G (4% diflubenzuron) from Maag AG to fight the small dipteran black flies (Trauermücken). It is a granular substance and sprinkled onto the soil when the plants show the first few ...
sterilisation of seeds: rinse with 70% EtOH for 30 sec put in 1% bleach (sodium hypochlorite supplemented by a few drops of Tween-20) for 5 min wash 2-4x with sterile H2O for 1 min plating and gro ...
双向电泳IEF (sigma) IEF(not IPG)/SDS-PAGE最简单的装备推荐如下,适合于没多少money做IPG又想做“热”的所谓蛋白质组的. IEF用Biorad的圆盘电泳槽(不行用国产的吧,不推荐),SDS-PAGE用六一厂的就可以了(推荐六一的,买进口电泳槽的钱留出来测搞出的差异蛋白质的序列吧) BIO-RAD 的圆盘电泳槽,国产的不推荐,因为上槽Bi ...
目的:比较TRFIA与ELISA两种方法对HBVM检测的结果,并对其进行分析,了解TRFIA法测定HBVM的准确性及可行性。方法:对102例就诊患者的血清标本同时采用TRFIA和ELISA两种方法检测乙肝标志物。结果:两种检测方法对HBVM的结果比较差异无显著性(P>0.05)。但就乙肝患者检测的医学模式来讲,以TRFIA法的结果为标准,与ELISA法比较有所差别,其中HBsAgHBcAb阳性模式者有显著差异(P<0.05),其他医学模式均无差异。结论:TRFIA对HBVM的检出率高于ELISA,能够弥补ELISA法因灵敏度相对较低所引起的假阴性,TRFIA作为一种高灵敏度的方法,可为临床诊断、疗效观察、及乙肝疫苗的接种提供依据。
【实验原理】 免疫电泳又称为γ球蛋白电泳或免疫球蛋白电泳技术,这是一种能够判断血液中三种免疫球蛋白IgM IgG IgA含量水平的实验方法。在这项实验技术中,首先利用蛋白质的分子量和所带电荷的比值运用水平琼脂糖凝胶电泳技术将蛋白质进行分离,然后将特异性的抗体引入到与电泳方向平行的凹槽中,在抗原和抗体的扩散过程中,抗原和抗体适当比例的结合会导致沉淀的产生(如图)。0.85%盐不仅可以终 ...
【实验目的】 通过实验掌握琼脂糖凝胶电泳鉴定DNA的原理与方法。 【实验原理】 琼脂糖是从海藻中提取出来的一种杂聚多糖,是由D型和L型半乳糖以α-1,3和β-1,4糖苷键相连形成的线状高聚物(如下图所示)。琼脂糖遇冷水膨胀,溶于热水成溶胶,冷却后成为孔径范围从50nm到大于200nm的凝胶。 琼脂糖凝胶电泳是分离、鉴定和纯化DNA片段最为常用的方法之一,这种方法简便易行 ...
【实验目的】 1.掌握聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦的基本原理 2.学习用等电聚焦电泳测定蛋白质等电点的操作和方法 【实验原理】 等电聚焦法是一种特殊的聚丙烯酰胺凝胶电泳法。它的特点是在凝胶柱中加入两性电解质载体-Ampholine,从而使凝胶柱上产生pH梯度。当向两性载体凝胶施加电场时,即可形成pH梯度,pH梯度的顺序是从阳极到阴极pH值逐渐增大。 蛋白质为两性电解质,其所带电荷的性质和数量随 ...
问:HPLC灵敏度不够的主要原因及解决办法 答: 1. 样品量不足,解决办法为增加样品量; 2. 样品未从柱子中流出。可根据样品的化学性质改变流动相或柱子; 3. 样品与检测器不匹配。根据样品化学性质调整波长或改换检测器; 4. 检测器衰减太多。调整衰减即可; 5. 检测器时间常数太大。解决办法为降低时间参数; 6. 检测器池窗污染。解决办法为清洗池窗; 7. 检测池中有气泡。解决办法 ...
【实验目的】 1.掌握盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳的基本原理。 2.学习盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳的操作技术,用于分离蛋白质。 【实验原理】 聚丙烯酰胺凝胶电泳是以聚丙烯酰胺作为支持物的一种电泳形式。单体-丙烯酰胺和交联剂-甲叉双丙烯酰胺相互作用可形成聚丙烯酰胺,该聚合反应以TEMED作为催化剂,以APS 作为引发剂。 丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺的比例可决定凝胶网孔的大小,交联剂所占比重越大,凝胶的网 ...
(一)原理 免疫电泳是琼脂平板电泳和双相免疫扩散两种方法的结合。将抗原样品在琼脂平板上先进行电泳,使其中的各种成分因电泳迁移率的不同而彼此分开,然后加入抗体做双相免疫扩散,把已分离的各抗原成分与抗体在琼脂中扩散而相遇,在二者比例适当的地方,形成肉眼可见的沉淀弧。 该方法可以用来研究:①抗原和抗体的相对应性;②测定样品的各成分以及它们的电泳迁移率;③根据蛋白质的电泳迁移率,免疫特性及其它特性,可以 ...
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【实验目的】 1.掌握SDS—聚丙烯酰胺电泳法的原理。 2.学会用此种方法测定蛋白质的分子量。 【实验原理】 SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)是对蛋白质进行量化,比较及特性鉴定的一种经济、快速、而且可重复的方法。该法主要依据蛋白质的分子量对其进行分离。SDS与蛋白质的疏水部分相结合,破坏其折叠结构,并使其稳定地存在于一个广泛均一的溶液中。SDS&mda ...

