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        液相色谱问题及解决

        互联网

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        问:HPLC灵敏度不够的主要原因及解决办法

        答:

        1. 样品量不足,解决办法为增加样品量;
          2. 样品未从柱子中流出。可根据样品的化学性质改变流动相或柱子;
          3. 样品与检测器不匹配。根据样品化学性质调整波长或改换检测器;
          4. 检测器衰减太多。调整衰减即可;
          5. 检测器时间常数太大。解决办法为降低时间参数;
          6. 检测器池窗污染。解决办法为清洗池窗;
          7. 检测池中有气泡。解决办法为排气;
          8. 记录仪测压范围不当。调整电压范围即可;
          9. 流动相流量不合适。调整流速即可;
          10. 检测器与记录仪超出校正曲线。解决办法为检查记录仪与检测器,重作校正曲线。

        问:做HPLC分析时,柱压不稳定,原因何在?如何解决?

        答:原因可能有:

        1. 泵内有空气,解决的办法是清除泵内空气,对溶剂进行脱气处理;
          2. 比例阀失效,更换比例阀即可;
          3. 泵密封垫损坏,更换密封垫即可;
          4. 溶剂中的气泡,解决的办法是对溶剂脱气,必要时改变脱气方法;
          5. 系统检漏,找出漏点,密封即可;
          6. 梯度洗脱,这时压力波动是正常的。

        问:我购买的HPLC柱验收测试时柱压过高,请问为什么?

        答:柱压过高是HPLC柱用户最常碰到的问题。其原因有多方面,而且常常并不是柱子本身的问题,您可按下面步骤检查问题的起因。

        1. 拆去保护预柱,看柱压是否还高,否则是保护柱的问题,若柱压仍高,再检查;
          2. 把色谱柱从仪器上取下,看压力是否下降,否则是管路堵塞,需清洗,若压力下降,再检查;
          3. 将柱子的进出口反过来接在仪器上,用10倍柱体积的流动相冲洗柱子,(此时不要连接检测器,以防固体颗粒进入流动池)。这时,如果柱压仍不下降,再检查;
          4. 更换柱子入口筛板,若柱压下降,说明您的溶剂或样品含有颗粒杂质,正是这些杂质将筛板堵塞引起压力上升。若柱压还高,请与厂商联系。一般情况下,在进样器与保护柱之间接一个在线过滤器便可避免柱压过高的问题,SGE提供的Rheodyne 7315型过滤器就是解决这一问题的最佳选择。

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