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SPF级实验动物房的建设及其管理

【摘要】: 目的 探讨SPF(specific pathogen free,无特定病原体)级实验动物房在健康相关产品检测实验室中的建设和管理办法。方法 依照《中华人民共和国实验动物管理条例》和《广东省实验动物管理办法》的要求,对SPF级动物房进行设计和建设,并制定了一系列的管理措施。结果 通过科学的设计建设和严格的管理,该SPF级动物房的环境条件均符合国家有关标准,经广东省实验动物监测所验收合格, ...

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透射免疫比浊法和速率散射免疫比浊法测定C反应蛋白的比较

【摘 要】目的:评估透射免疫比浊法和速率散射比浊法检测C反应蛋白(CRP)的灵敏度和特异性。方法:用免疫透射比浊法和速率散射比浊法同时检测了80例各种患者血清中CRP浓度。结果:两种方法在8—20mg/L、20~40mg/L、40~80mg/L、80~160mg/L、160~300mg/L范围内测定C反应蛋白的相关系数是0.990、0.996、0.995、0.992、0.997.说明两 ...

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速率散射比浊法测定IgG、IgM、IgA

【检测方法】 速率散射比浊法 【方法学原理】 抗原(免疫球蛋白)与抗体(抗免疫球蛋白)在液相中可快速反应,形成的免疫复合物颗粒具有特殊的光学特性,使反应液出现浊度。速率是指单位时间内抗原、抗体形成免疫复合物(CIC)的速度。随着时间的延长免疫复合物总量是逐渐增加的,而速率变化则由慢一快+慢,其反应速率最快的某一时间称为速率峰。当反应体系中的抗体(抗免疫球蛋白)量保持过剩时, ...

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20°C下配制的缓冲液,在较高或较低的温度下PH值会改变吗?

对于普通使用的缓冲液,PH值随温度变化而变化。 下表列出温度改变10℃时,PH值的变化情况: 例如 20℃下配制PH7.4 Tris缓冲液40℃时PH值为 7.4-(2x0.310)=6.78 缓冲系统 pKa/20℃ pKa/10℃ Mes 6.15 -0.110 Ada 6.60 -0.110 Pipes 6.80 -0.085 Aces 6.90 -0.200 Bes 7.15 -0 ...

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原代细胞培养和传代培养的方法及其注

初代培养 原理 将动物机体的各种组织从机体中取出,经各种酶(常用胰蛋白酶)、螯合剂(常用EDTA)或机械方法处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖,这一过程称原代培养。 仪器、材料及试剂 仪器:培养箱(调整至37℃),培养瓶、青霉素瓶、小玻璃漏斗、平皿、吸管、移液管、纱布、手术器械、血球计数板、离心机、水浴箱(37℃) 材料:动物组织块 试剂:1640培养基(含20% ...

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实验动物设施建筑技术规范(征求意见稿)

前言 本规范是根据建设部建标函[2005]84号文 “关于印发《二○○五年工程建设标准规范制订、修订计划(第一批)》的通知”的要求,由中国建筑科学研究院作为主编单位,会同有关科研、设计、施工和管理单位共同编制的。 在编制过程中,规范编制组进行了广泛、深入的调查研究,认真总结多年来实验动物设施建设的实践经验,积极采纳科研成果,参照有关国际和国内的技术标准,并在广泛征求意见的基 ...

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快速免疫比浊法测定尿微量白蛋白/肌酐的临床价值

【摘要】目的:评价快速免疫比浊法测定尿微量白蛋白/肌酐在诊断糖尿病早期肾损害的临床应用价值。方法:以放射免疫法作对照,用快速免疫比浊法测定30例糖尿病患者的尿微量白蛋白/肌酐。结果:以放射免疫法为金标准,快速免疫比浊法的敏感性为92.3%,特异性为82.4%,准确度为93.3%,两者测定结果差异无显著性(P>0.05)。结论:快速免疫比浊法作为一种方便、快速、定量的测定尿微量白蛋白/肌酐的方 ...

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细胞培养常用器材与试剂

器材与试剂 干粉型培养基、胰蛋白酶,青霉素、链霉素. 纯净水系统、电子天平、PH计、磁力搅拌器等 具体步骤 1. 水: 细胞培养用水必须非常纯净,不含有离子和其他的杂质。需要用新鲜的双蒸水、三蒸水或纯净水. 2. PBS (也可用于其它BSS,如:Hanks,D-Hanks液的配制): 主要用于免疫组化染色时组织或细胞的漂洗 溶解定容:将药品(NaCl 8.0g,KCl 0.2g,Na2HP ...

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速率散射比浊法检测补体C3、C4

补体(complement,C)是由近20种不同血清蛋白组成的多分子系统,约占血清球蛋白总量的10%。补体在血清中的含量相对稳定,不因免疫应答而增加,仅在某些病理情况下才会发生波动。补体系统的基本组成包括9种血清蛋白成分,按发现的先后顺序而分别命名为C1-9。补体是一个复杂的反应系统,除了溶解细胞和协助杀菌作用外,还可促进炎症反应,与其他生物活性系统有相互促进、相互制约的关系,这些关系的紊乱是导致 ...

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细胞培养基的基本要求

体外培养的细胞直接生活在培养基中,因此培养基应能满足细胞对营养成分、促生长因子、激素、渗透压、pH等诸多方面的要求。 营养成分 1. 氨基酸:所有细胞都需要12种必须氨基酸:缬、亮、异亮、苏、赖、色、苯丙、蛋、组、酪、精、胱氨酸。 2. 单糖:六碳糖是主要能源,也是合成某些氨基酸、脂肪、核酸的原料。细胞对葡萄糖的吸收能力最高,半乳糖最低。 体外培养动物细胞时,几乎所有的培养基或培养液中都以葡萄糖 ...

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如何用台盼兰计数活细胞

用无血清培养基把细胞悬液稀释到200-2000个/毫升,在0.1毫升的细胞中加入0.1毫升的0.4%的台盼兰溶液。 轻轻混匀,数分钟后,用血球计数板计数细胞。活细胞排斥台盼兰,因而染成蓝色的细胞是死细胞。 ...

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如何选用培养基

培养某一类型细胞没有固定的培养条件。在MEM中培养的细胞,很可能在DMEM或M199中同样很容易生长。总之,首选MEM做粘附细胞培养、RPMI-1640做悬浮细胞培养,各种目的无血清培养的首选是AIM V培养基(SFM)。在开始进行新的细胞培养时,可以参考下表所列的条件: 细胞系 细胞类型 种 组织 推荐使用的培养基 293 成纤维细胞 人 胚胎肾 MEM 10% 热灭活马血清 3T6 成纤维细 ...

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实验动物房的设计

根据实验动物微生物控制标准,可将实验动物分为四级: 一级 普通动物(CV),系指微生物不受特殊控制的一般动物。要求排除人兽共患病的病原体和积少数的实验动物烈性传染病的病原体。为防止传染病,在实验动物饲养和繁殖时,要采取一定的措施,应保证其用于测试的结果具有反应的重现性(即无论不同的操作人员,在不同的时间,用同一品系的动物按规定的实验规程所做的实验,都能获得几乎相同的结果)。 二级 清洁动物(CL) ...

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细胞培养常见问题与分析

1. 冷冻管应如何解冻? 取出冷冻管后, 须立即放入37 ℃水槽中快速解冻, 轻摇冷冻管使其在1 分钟内全部融化, 并注意水面不可超过冷冻管盖沿, 否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时, 必须注意安全, 预防冷冻管之爆裂。 2. 细胞冷冻管解冻培养时, 是否应马上去除DMSO? 除少数特别注明对DMSO 敏感之细胞外, 绝大部分细胞株(包括悬浮性细胞), 在解冻之后, 应直接放入含 ...

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IVC操作规程

IVC指独立通气笼盒。 动物实验设施设备是实验动物科学的技术条件保障,而独立通气笼盒(英文缩写IVC)又是一种节能、环保和安全可靠的动物实验设备。 1、目的: 保持动物有舒适的生活环境,避免动物受病源微生物的影响。 2、依据: 《实验动物管理条例》(中华人民共和国国家科学技术委员会令第2号,1988),《动物饲养设施条件要求》(中华人民共和国国家标准,2001),Guide for the Car ...

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特种蛋白分析仪原理

特种蛋白分析仪是近年来国内常购的临床检验设备。其实特定蛋白的分析无论从思路还是技术上都不能算是新东东。由于观念和临床运用的滞后,使其在国内成了新生事物。 使用单一专门化的仪器在国外比较普遍,对于一些非专门化的仪器也常用作单一的测定,如色谱仪,众所周知只要更换分离柱,可以测定多种的成分,但在国外实验室里常用有数十台的色谱仪以避免和减少柱的更换。这样做的好处很明显:首先,能提高效率。由于国外人工成本很 ...

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时间分辨荧光光谱中信噪比与测量精度的提高

建立了随机噪音的经验模型,并通过计算机模拟超短寿命的荧光衰减过程,研究了利用取样法测量时间分辨荧光光谱实验中实验参数的选取对实验结果的影响。结果表明,增大“门宽”可以提高信噪比,从而实现微弱荧光信号的测量;减小“延时”可以提高时间分辨率,即提高测量精度;选取不同的“门宽”时,测量结果中各个衰减组分初始荧光强度 的比例关系会发生改变,并推导出测量值与实际值的对应关系,可以从测量结果反推出实际的比例。另外,测量了GaP样品的时间分辨荧光光谱,实验结果验证了所提出的随机噪音经验模型以及提高信噪比与测量精度的方法。并且利用该结论测量了LN Er样品微弱荧光的时间分辨荧光光谱。

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透射免疫比浊法定量测定血清中D -二聚体的实验评价

【摘要】 目的 对透射免疫比浊法定量测定血清D —二聚体的方法进行临床实验评价。方法 实验评价包括精密度、线性测定、回收实验以及干扰实验。结果 该D-二聚体定量测定试剂在精密度测定CV%小于5%,回收率在95~99%。线性测定良好,可达16ug/ml,回归方程为Y=1.0133X-0.0076,相关系数r=0.9997。对胆红素、血红蛋白 ...

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进口代谢笼(图)

1、【仪器名称】:进口代谢笼。 2、【仪器型号】:2602动物器具。 3、【生产厂家】:意大利TECNIPLAST公司。 4、【检测适用范围】:完全地分离粪便和尿液,尿液不会被污染。 5、【仪器使用优点、缺点】:独特的漏斗和锥形体设计保证了粪便和尿液的分离收集,尿液不会被污染,也不会进入粪便收集管,所以分离是直接和完全的,结果将得到无误和值得信任的样品。 进食室位于笼外,有五种不同尺寸防止动物夹嵌 ...

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免疫比浊法检测大肠癌和胃癌患者血清β2微球蛋白的临床意义

【摘要】 目的 探讨大肠癌和胃癌患者血清β2微球蛋白(β2microglobulin,β2 MG)含量变化及其临床意义。方法 用免疫比浊法检测30例大肠癌和30例胃癌以及30例正常健康人血清β2 MG含量;动态检测大肠癌和胃癌手术前后β2 MG含量变化。结果 大肠癌组和胃癌组血清中β2 MG含量均明显高于健康对照组(P&l ...

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