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        fluo-3 激发的发射波长

        互联网

        3981

        求助者:wjg200022

        最近我在测细胞内的钙浓度,用的是fluo-3 探针,但选多大的激发,发射波长很为难,有文献用的是488/515nm,有的用的506/526nm,我打算用流式细胞仪测,有做过这方面的给点指点,谢谢。

        此外我找到一段原话:“Fluo-3 AM是一种可以穿透细胞膜的荧光染料。Fluo-3 AM的荧光非常弱,其荧光不会随钙离子浓度升高而增强。Fluo-3 AM进入细胞后可以被细胞内的酯酶剪切形成Fluo-3,从而被滞留在细胞内。

        Fluo-3可以和钙离子结合,结合钙离子后可以产生较强的荧光,最大激发波长为506nm,最大发射波长为526nm。实际检测时推荐使用的激发波长为488nm左右,发射波长为525-530nm“。

        丁香园网友otherwise认为:

        荧光染料的吸收和发射光谱都是一个范围,不是只有一个波长吸收光谱范围内任何波长的光都可以激发,只是效率不同而已,发射光谱是一样的。

        一般流式带的氩离子激光器有458,488,514 三个波长,488 514都可以用或者用汞灯做光源,加上506左右的带通滤光片发射范围在500nm-650nm,峰值在526nm,用该范围的带通滤光片即可。


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