• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购
        点赞
        收藏
        wx-share
        分享

        我培养BHK-21的经验

        互联网

        2759

        吸出培养基,吸得越干净越好,直接加入1ml胰酶(T-25瓶),放到37度培养箱消化。

        是否需要用hanks 或 pbs之类得缓冲洗细胞并不绝对必要,我都没有洗,感觉应该洗一下更好,但也更麻烦并增加了污染得可能性。如果细胞长得太老,可以先加入1ml胰酶在细胞表面浸润一下就吸出来,然后再加入1ml胰酶消化。

        胰酶在使用前最好预热到37度。由于胰酶平时保存在4度,反复预热对胰酶的活性不好,我的经验是将胰酶进行分装,尽可能避免胰酶反复冷却加热。

        消化时间的选择要根据实际情况决定,BHK-21还是比较好消化的,5-15min应该足够了,消化时间太长对细胞不利。可以在显微镜下观察消化情况,必要时可以拍打培养瓶帮助细胞分散,消化结束后直接加入培养基即可,胰酶会被血亲灭活。

        基颜色(加入酚红作指示剂),如出现偏黄表明细胞代谢产酸较多,此时如细胞未长满应更换部分或全部培养基以确保细胞状态不受影响。

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序