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【求助】请问如何检测RAS、MAPK、p38、p21 ？ 参与者：liqunfeng 请问如何检测RAS、MAPK、p38、p21？？谁帮帮我啊 参与者：xiaolx 你在网上搜搜别人的实验中怎么检测的，不就知道了。 p38，我师姐做过免疫组化。 参与者：zhangyuelin1999 检测信号通路现在用的比较多的方法应该是Western blot，它是测细胞中的蛋白含量（半定量）的最好方法了，免 ...

【求助】免疫组化 参与者：andywfa 我想请教一下，液氮冻存的组织，能否用来做免疫组化? 叩谢了！ 参与者：organer 当然可以，只要你冻存方法正确，冻存可以保护细胞，当然也可保护细胞表面抗原和组织抗原 参与者：zgxsea 液氮冻存组织一般用来提取蛋白、DNA或RNA，做相关指标的检测。如用其做免疫组化，存在一个技术性难题，即冻存的过程中，细胞内易形成冰晶，并破坏细胞结构，做了切片染色后 ...

【求助】哪位大哥给指点一下电穿孔阿，xiexie 参与者：vensentgwx 哪位大哥给指点一下电穿孔阿，xiexie 告诉我哪里有介绍也行，我自己在网上没找到。万分感谢！！！ 参与者：saurea 细胞膜是主要由脂质双分子层和膜蛋白构成，是一种选择透过性膜，在正常的生理机能状况下，能较好地阻碍外界离子和亲水分子的进入。但是当于其施加强度为KV/cm、持续时间为μs～ms级的电脉冲时，细胞 ...

【求助】测定NF－κB 活性 参与者：sandy99 实验中设计测定NF－κB 活性，我查的资料有以下几种选择： 1、EMSA。请教所设计的标记探针的序列？以及该实验的注意事项。（没做过） 2、抽提核蛋白，用P65抗体做Western Blot. 请问性价比较高的，好做的是哪个公司的抗体？还有啊，如果这个抗体用FITC标记过，是不是就可以用来做激光共聚焦实验？也可做WB？ ...

一．开机前准备 1．根据需要选择合适色谱柱。 2．在容器中放入已过滤脱气好的流动相，把吸滤过滤头放入容器中。二．开机 1．打开所需仪器的电源开关，打开氦气阀门。 2．等各仪器自检通过后，开微机进入Windows NT，双击millog.exe，进入millennium 32 工作站。 三．编辑仪器方法 1． 选择所需Project，run sample上击右键，选择所需仪器，联机。 2．点击 in ...

【求助】如何处理钙离子浓度变化数据 参与者：zufu 请教各位战友，我用荧光显微镜测血管平滑肌钙离子浓度变化，用药物刺激后可以得到钙离子时间浓度曲线，但各组之间差异较大。大家是如何处理这些数据的，因为要比较不同浓度药物刺激后钙离子的变化。 用药前钙离子稳定在一定水平，基本是一条直线，但用药后就是一个先升高后降低的曲线了，变化快，如何比较用药前后的变化，大家如何取数值并分析，是一段时间内的平均值还是 ...

【求助】fluo-3 的激发，发射波长疑问 参与者：wjg200022 最近我在测细胞内的钙浓度，用的是fluo-3 探针，但选多大的激发，发射波长很为难，有文献用的是488/515nm，有的用的506/526nm，我打算用流式细胞仪测，有做过这方面的给点指点，谢谢。 此外我找到一段原话：“Fluo-3 AM是一种可以穿透细胞膜的荧光染料。Fluo-3 AM的荧光非常弱，其荧光不会随钙 ...

目的　利用时间分辨荧光免疫分析（TRFIA）技术建立人血清促卵泡激素（hFSH）的检测试剂。方法　采用双抗体技术建立hFSH- TRFIA的检测试剂，对试剂的各项指标进行评价。结果 hFSH- TRFIA检测试剂的测量范围为1～256U/L，灵敏度为0.08U/L，分析内和分析间的精密度分别为26%～42%，6.1%～8.6%，与人黄体生成素（hLH）、人促甲状腺素（hTSH） 和人绒毛膜促性腺激素（hCG）的交叉率分别为0.14%，0.08%和0.01%。30份异常血样用该试剂同类试剂同时检测，其相关系数为0.993。结论　试剂各项指标均达到临床检测要求，可替代国外同类产品。

DGGE，CGGE及TGGE三种方法是基于相同的原理而设计的突变检测方法，它仍均是根据DNA的解链特性而设计.对于同一定序列组成或的DNA片段来说，它具有恒定的解链温度(Tm)，但若其序列发生改变时，Tm值亦发生改变，在含有变性因素(变性剂， 高温)的凝胶半进行电泳，当其比链解开形成分叉时，电泳迁移的速度就会改变.Tm值 全要取决于DNA的碱基组成，序列中出现单碱基替换时，Tm亦发生改变，电泳迁移 ...

1.目的 建立一个大连依利特P230高效液相色谱仪的使用、维护保养标准操作程序，使操作过程标准化。 2.职责 质量部QC负责本文件的起草，质量部及QC检验人员负责本标准的实施。 3.范围 本标准适用于大连依利特P230高效液相色谱仪的使用、维护和保养。 4.内容 4.1 仪器组件、型号 4.1.1 仪器组成：P230高压输液泵、UV230紫外-可见检测器、EC2000色谱工作站。 4.1.2 电源 ...

【求助】两个载体做共转染（瞬时转染）时是否需要有相同的复制起点\启动子吗?? 参与者：sunshine046000 各位大侠，我最近准备做共转染，用于分析目的基因的蛋白功能改变，查阅文献发现可以用含目的基因的载体和含有报道基因（b-gal）的载体做共转染以控制转染率。..请问师兄师姐们，如果我的研究目的在于分析目的基因（野生型和突变型）的表达情况以及后续的活性变化。是否最好用含相同启动子，增强子， ...

测定DNA的核苷酸序列是分析基因结构与功能关系的前提。从小片段重叠法到加减法、双脱氧链终止法、化学降解法、自动测序，DNA测序技术发展很快。目前在实验室手工测序常用Sanger双脱氧链终止法。Sanger法就是使用DNA聚合酶和双脱氧链终止物测定DNA核苷酸序列的方法。它要求使用一种单链的DNA模板或经变性的双链DNA模板和一种恰当的DNA合成引物。其基本原理是DNA聚合酶利用单链的DNA模板，合 ...

目的： 本操作规程是关于屏障动物房中饲养小鼠的具体操作规程。 主体内容： 1.提前15分钟用70%酒精喷雾动物笼具交换工作站内表面，同时放入经表面消毒的各种灭菌饲养和实验用品，并打开紫外灯，开启超净工作台风机。 2.关闭紫外灯，打开照明灯。 3.用70%酒精喷雾工作车。 4.用双手轻轻抬起IVC笼盒外端，沿笼架搁挡向外移出笼盒，放在工作车上。 5.将工作车推至动物笼具交换工作站旁。 6.用70%酒 ...

目的 利用时间分辨荧光免疫分析(time-resolved fluoroimmunoassay, TRFIA)技术建立人生长激素（human growth hormone, hGH）的快速检测方法并研制其诊断试剂。方法 采用双抗体夹心法（一株抗GH的单抗用于包被微孔板，另一株抗GH的单抗用于Eu3+标记）建立hCG-TRFIA。结果hCG-TRFIA的线性测量范围为0.1×10 ～100×10 U/L 0.036×10 U/L 5.3%～8.6% 和7.6%～12.8%，与促甲状腺激（TSH）、卵泡生成素（FSH）、人胎盘催乳素（LH）和黄体生成素（HPL）均无交叉反应，将43份血清标本用本法与Wallac试剂盒同时检测相关系数（r）为0.957。 结论hGH-TRFIA可作为一种具有灵敏度高、特异性强和测量范围宽的新方法 用于临床GH水平的测定。

【目的与要求】 了解IVC系统和超净工作台的原理结构、维护、操作程序和注意事项。 【仪器与材料】 IVC、超净工作台、一次性手套、口罩。 【步骤】 一、师讲述IVC系统和超净工作台的原理结构、维护、操作程序和注意事项。　　二、学生在教师指导下进行各项基本操作。 【内容】 一、原理和结构 IVC笼盒由耐高温（至少能耐150～160℃高温以上）的透明塑料材料制成，一套笼盒由上盖、底盒、食槽、水槽、锁紧 ...

实验目的： Morris水迷宫试验（water maze test，Richard Morris，1981）及其它行为学实验（跳台试验、避暗试验等）是近二十几年建立起来的判断动物学习记忆的重要实验方法，近年来正成为神经药理学、神经生理学、神经心理学、老年病学等的常用研究手段。 原理： 通过动物的行为来判断动物的智力情况，达到研究的目的。 具体步骤： 设计特制的水迷宫主要由一圆柱型水池和一可移动位置 ...

一、高效液相色谱仪的结构： HPLC的出现不过三十多年的时间，但这种分离分析技术的发展十分迅猛，目前应用也十分广泛。其仪器结构和流程也多种多样。典型的高效液相色谱仪结构和流程可用下列方框图表示（图3－2）。高效液相色谱仪一般都具备贮液器、高压泵、梯度洗提装置（用双泵）、进样器、色谱柱、检测器、恒温器、记录仪等主要部件。 1 ．高压泵 HPLC使用的色谱柱是很细的（1~6 mm），所用固定相的粒度也 ...

实验动物（特别是大型实验动物）的饲养对设备有许多特殊的要求，以确保实验动物的生存条件完全正常，为实验提供正确的结果，另外还要考虑到动物保护组织的意见。EHRET公司的大动物饲养设备正是根据欧美严格的要求，凝聚多年技术经验设计制造而成。 IVC兔笼系列　　●笼体可以经高温（121～165℃）高压灭菌。　　●耐酸碱。　　●易于操作。　　●圆滑的角部设计便于清洁。　　● 兔子生活舒适。　　●在一个笼中有 ...

【摘要】基于可溶性抗原和抗体在液相中特异性结合，形成一定大小的抗原抗体免疫复合物，使反应液出现浊度。采用流动注射光度分析法联用单片机，优化了实验条件；采用合并带技术节省试剂与试样，寻找到了抗原抗体反应的最佳浓度比与最佳反应时机，从而建立了流动注射免疫比浊测定人体血清免疫球蛋白Ａ（IgA）的新方法。整个测试系统联用单片机，使测试过程实现程序操作。本法简便、快速，节省试剂和试样，进样频率高，每小时进 ...

对自制时间分辨免疫荧光法定量检测癌胚抗原（CEA）试剂盒进行临床应用研究，为该试剂盒临床应用及临床疗效评价提供科学依据。方法　收集血清标本326份，用自制试剂盒按试剂盒操作说明书对血样进行测定，并以化学发光法（Roche）为对照方法，WALLAC公司的CEA时间分辨免疫测定药盒（AutoDELFATM hCEA）作为复核试验，获取相关目标实验数据，并计算得“真实性”和“可靠性”等统计学数据。结果　以化学发光法为对照试验，其阳性符合率为95.83%，阴性符合率为98.73%，检验无显著性差异；自制试剂盒的定量测定值与化学发光法的测定值较为一致，相关系数达0.93，相关性好。结论　试剂盒检测性能与现在临床广泛应用的方法相仿，能满足临床应用的需要。