• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购
        点赞
        收藏
        wx-share
        分享

        B16细胞的传代

        互联网

        9652

        细胞增殖快非常好养,但是要及时换液,否则也很容易死亡、或变形。我养的最好的时候,天天都在换液,两三天就要消化传代。我用的消化液一般是 消化用含EDTA的胰酶0.25%,个人感觉效果比较好一点。

        消化步骤:吸出培养液,加入PBS洗涤(视培养瓶大小加入相应的量,25CM加入1-2ML)而后加一次胰酶(25CM培养瓶加0.6ML)作用2-3分钟,轻轻摇晃使均匀作用在细胞层面上。

        要一直在显微镜下观察,以防消化过头,等细胞从梭形变成椭圆形(或是棱角变钝),本来连成片的细胞之间开始有小小的空间,细胞与细胞好象是一粒粒的,界限清楚,这时是消化的最佳时机。(细胞的活力最好,又非常容易吹打)加入培养液进行吹打十几次即可。

        如果消化到细胞全部飘起来,就消化的稍微有点过了。如果细胞的形态还是老样子,就消化的有点不足,吹打起来十分费力,有大片的细胞就会贴在壁上,起不来,而且很不均匀。只好重新加胰酶消化。

        还有就是细胞长的比较密时,胰酶可以比平时多加一点,消化时间适当延长。

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序