SK-BR-3（乳腺腺癌细胞系）的传代方法

刚开始养SK-BR-3时，细胞状态不是很好，贴壁也不均匀，于是开始想办法，考虑是不是吹打的不够，或是传得过多，或是其它的什么，后来发现的确如此，细胞的生长状态与传代的方法有很密切的联系。

我的传代方法是：

以50平方厘米培养瓶为例，待细胞长满瓶底70％－80％

1 、吸除或倒掉瓶内旧培养基。

2 、PBS 5ml加入培养瓶，轻轻晃动培养瓶，让PBS流遍细胞表面，倒掉。

3 、PBS 5ml加入培养瓶重复洗一次，倒掉。

4 、加入1ml胰蛋白酶消化液，轻轻摇动培养瓶，使消化液流遍所有细胞表面，然后置37度5％的二氧化碳培养箱放置5分钟，在显微镜下观察，发现细胞脱壁、变圆即可。

5、 加入含血清的培养基5ml中止消化，吸取瓶内培养液，反复轻轻吹打瓶壁细胞，确保所有的瓶底都要吹打到。

6、 吸1/3至1/4的细胞悬液接种至新的培养瓶，然后加8ml的新的细胞培养基，置37度5％的二氧化碳培养箱完成传代。