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在真核细胞中表达蛋白的步骤比大肠杆菌复杂得多。首先要考虑选用什么载体。一般人们趋向于使用分泌表达载体，以便于蛋白的纯化。但有的蛋白并不适合于分泌表达，如一些胞质蛋白，非糖基化蛋白等。此外分泌表达的蛋白信号肽存在一个效率问题。有的蛋白即使存在信号肽，也不能分泌。并且有的分泌蛋白较易受到蛋白酶的降解。所有这些因素都需综合考虑。 1、克隆 选用合适 的内切酶把外源基因克隆于表达载体的多克隆位点。如果 ...

CHO细胞表达系统与毕赤酵母表达系统是当前发展前景看好的两个表达系统，为了能够更加直观地对两个表达系统有一定的认识，特意在此篇中对两个表达系统作一定的比较，从而能够更进一步的对两个表达系统有更深的了解 一、CHO细胞表达系统 1、优点 CHO细胞属于成纤维细胞，既可以贴壁生长。也可以悬浮生长。目前常用的CHO细胞包括原始CHO和二氢叶酸还原酶双倍体基因缺失型(DHFR-)突变株CHO。近年来，为降 ...

体外基因表达系统包括原核细胞系统和真核细胞系统。原核细胞系统主要是大肠杆菌细胞，它操作简便、周期短收益大及表达产物稳定，但是表达基因的相对分子质量有限，不宜过大，且不能对表达产物进行一些翻译后加工 、修饰。真核细胞系统包括 CHO等哺乳动物细胞、酵母细胞和昆虫细胞等。昆虫细胞表达系统(即杆状病毒表达系统)具有独特的生物学特性，日益受到人们的重视。 1、杆状病毒的生物学特性 杆状病毒只来源于无脊 ...

按照宿主细胞的类型，可将基因表达系统大致分为原核、酵母、植物、昆虫和哺乳动物细胞表达系统。与其它系统相比，哺乳动物细胞表达系统的优势在于能够指导蛋白质的正确折叠，提供复杂的N型糖基化和准确的O型糖基化等多种翻译后加工功能，因而表达产物在分子结构、理化特性和生物学功能方面最接近于天然的高等生物蛋白质分子。从最开始以裸露DNA直接转染哺乳动物细胞至今的30余年间，哺乳动物细胞表达系统不仅已成为多种基因 ...

自上世纪70年代基因工程技术诞生以来，基因表达技术已渗透到生命科学研究的各个领域。并随着人类基因组计划实施的进行，在技术方法上得到了很大发展，时至今日已取得令人瞩目的成就 。随着人类基因组计划的完成，越来越多的基因被发现，其中多数基因功能不明。利用表达系统在哺乳动物细胞内表达目的基因是研究基因功能及其相互作用的重要手段。 在各种表达系统中，最早被采用进行研究的是原核表达系统，这也是目前掌握最为成熟 ...

Humana Press | ISBN: 1588293955 | 2 Edition - March 15 2006 | PDF | 496 pages | 6.7 MB This collection of readily reproducible Arabidopsis protocols has been updated to reflect recent advances in plan ...

The Handbook of Plant Nutrition provides a readily accessible source of current information on the nutritional requirements of significant crops. The editors provide an overview of plant nutrients and ...

基本信息 ·作者：江纪武 ·出版社：天津科学技术出版社 ·页码：1244 页码 ·出版日：2005年 ·格式：PDF ·大小：50.34M ·版次：1 ·装帧：精装 ·开本：16开 内容简介 本辞典共收载国内药用植物22450种，其中我国药用植物12000多种，国外药用植物 ...

代谢综合征以胰岛素抵抗为核心，高血压、高胰岛素血症、脂代谢紊乱为其主要表现，要想将这些病理因素加至动物体内制作经典的X综合征模型确实有难度。关于代谢综合征的动物模型的报道少之又少，更不要谈重复性和可操作性了。 1）模型建立方法：清洁级雄性ＳＤ大鼠20只，普通饲料喂养1周后，于清醒状态下(上午10～12ｈ)用尾套法(尾动脉血压计与心电图机相连)测大鼠的收缩压(ＳＢＰ)。术前禁食过夜，自由饮水用4%戊 ...

领取SD雄性大鼠，体重200-220g为宜 试验前测试痛阈（我们用的是意大利Ugobasile的heat-flux meter测痛仪， 国 产的功能也不差），痛阈极端大/小的最好挑除不用 试验前至少3天每日早晨9点－9点半，将大鼠放入观察笼中适应环境 试验时用微量注射器抽取100-200ul甲醛（浓度自己定）于大鼠下肢脚掌皮内注射，注射后留置针头约30－60sec 放大鼠入笼，摄像，人员全部离开（ ...

目前现代肿瘤基础生命科学研究与现代肿瘤治疗医学科学研究，应用的最广最有实用价值的可移植实验动物肿瘤模型、与人类肿瘤的可移植实验动物（裸鼠）肿瘤模型，普遍存在着肿瘤生长速度快、增殖比高、体积倍增时间短、肿瘤生命性质简单，与人类肿瘤具有明显不同；特别是与人类的致死性实体恶性肿瘤生命性质、与生长发生机制差异更大。那些肿瘤生命性质简单的可移植实验动物肿瘤模型、与人类肿瘤的可移植实验动物（裸鼠）肿瘤模型，仅 ...

抗肿瘤药物是现在研究的一个热点问题但是由于该模型的建立具有一定的技巧性有不少刚刚开始做这方面实验的战友一般实验总会碰到这样那样的问题本人硕士期间有幸参加过一类抗癌新药的研发工作对小鼠肿瘤模型有一定的了解应silverman版主的邀请把我在肿瘤造模实验中的一点心得写出来想起个抛砖引玉的作用 希望大家一起讨论. 动物选择: KM小鼠裸鼠C57 等均可作为但是个人认为KM能做出来最好毕竟比较有普遍性还是 ...

实验注意问题： 1、最好是选用SD雌性大鼠，体重250g左右，雄性的导尿操作困难，尿道损伤大，就不要考虑了。（小心抓大鼠时不要被咬到！） 2、导尿管可选用硬膜外导管，上面的接头很好用，可以让你方便准确地灌药。可用1ml针筒与接头相连，一般导尿管进入3－4cm即可。大鼠膀胱很薄，太深了膀胱会穿孔的。 3、导尿时动作轻柔，尿道口最好消毒一下，雌性大鼠导尿也不是很容易，需要一点的技巧，进入膀胱后应回抽有 ...

目的　建立荷人胰腺癌裸小鼠模型研究其生物学特性观察8988 胰腺癌细胞株在移植前后的形态学变化。方法　将人胰腺癌细胞株8988 接种于裸鼠腋窝处皮下每周测量肿瘤大小第42d 处死小鼠。肿瘤组织及相关脏器送病理及电镜检查放射免疫法检测相关抗原。皮下肿瘤组织细胞及细胞株培养HE 染色。结果　肿瘤生长较快成功率高病理及电镜检查符合人胰腺癌细胞特征。肿瘤组织细胞及培养细胞形态学未见显著差异。结论　荷人胰腺 ...

肿瘤模型我们一般常用的就是小鼠模型和人肿瘤裸小鼠移植瘤模型。其中用得最多的是皮下模型，另外还有腹水（或者尾静脉注射）以及原位模型，其他的模型很少用，就不提他们了。 小鼠模型分三大类：第一类是以S180、EAC、H22等为代表的，他们的宿主小鼠多选用KM，可产生腹水，也可在皮下成瘤。多以腹水传代，实验时抽取腹水，经过一定稀释后皮下接种构建模型，接踵后第二天开始给药，给药7到10天，接种10天后结束试 ...

目前中医药治疗NIDDM 的实验研究 大多借用链脲佐菌素(St repozotocin 简称STZ)或四氧嘧啶所致的糖尿病大鼠模型其特点是胰岛素分泌缺乏所致的高血糖和“三多一少症”(多饮、多食、多尿、消瘦) 与人类胰岛素依赖型糖尿病( IDDM) 相似而与NIDDM的病理特征和临床特点相差甚远。 实验性性NIDDM 大鼠模型具有Ⅱ型糖尿病的临床特点和病理特征 尤其是存在受 ...

【制作方法】 1、野百合碱(Sigma)溶液配制：先配制2：8乙醇生理盐水然后充分溶解野百合碱，配制成 1 ％浓度。 注意：野百合碱溶解比较困难，溶解不了的部分可以静置过夜，第二天会全部溶解，注意密封及做好防护措施（野百合碱可以致癌） 2、腹腔注射：按60mg/kg的量腹腔注射。 【模型动态观察】 1、第一周：肉眼下大体标本空白组与模型组无明显差异；模型组鼠肺病理切片：与空白组对照只出现淤血征象， ...

1.离体大鼠Langendroff全心缺血/再灌注动物模型的建立 （大鼠为例） 麻醉与抗凝：腹腔注射戊巴比妥钠（30mg•kg-1）、肝素（250 u•kg-1）。 手术：麻醉后迅速剑突下沿着肋缘下剪开腹壁，打开膈肌，沿着两侧腋前线剪开胸壁并上翻头侧，于心脏根部保留主动脉3-4mm剪下心脏，立即放入预冷的K-H液（4℃），轻轻积压心脏洗清残留血液。 心脏灌注：液面下主动脉插管， ...

本人现在正在做线栓法大鼠大脑中动脉阻断实验（MCAO模型），这方面的资料我查了一些，这个实验我也作了一段时间，不敢说很专业了，不过现在基本上我能在15min左右完成手术，而且手术过程中不出一滴血，造模后缺血程度基本一致。虽然前面有很多前辈发了很多MCAO的很专业的贴子，不过我觉得比较凌乱，现在我把我的心得体会和以前的贴子的精华部分奉献给大家，希望这会对将要做这个实验的朋友有一丝的帮助。虽然做实验总 ...

健康成年wistar大鼠，体重250－300g，禁食12h，禁水6h，水合氯醛麻醉后，将大鼠固定在立体定位仪上，行头皮正中切口，剥离骨膜，于前囟后1mm，中线偏左3mm钻直径1mm的小孔，用固定在立体定位仪上的微量注射器沿孔垂直缓慢进针，进针深度6mm（左侧尾状核的位置），缓慢注入胶原酶VII0.5U（用生理盐水配成1U/uL），注药后留针10分钟。推针，骨腊封闭骨窗，缝合皮肤，回笼饲养，给予正常 ...