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全文下载：http://www.ebioe.com/down/html/down_211.htm陈秀英 彭孝军~A大连理工大学精细化工国家重点实验室 大连 116012)摘 要 介绍了各种DNA 荧光探针的结构特征、荧光性质和与DNA 的作用方式，概述了DNA 探针在生物分子分析方面的应用，并展望了DNA 荧光探针的发展趋势和应用前景。关键词 荧光探针 DNA 花菁染料 光稳定性 量子点DNA F ...

DNA重组是将外源DNA与载体分子连接，这样重新组合的DNA叫做重组体或重组子。DNA重组的方法主要有粘端连接法和平端连接法。 重组的DNA分子是在DNA连接酶的作用下，有Mg2+、ATP存在的连接缓冲系统中，将分别经酶切的载体分子与外源DNA分子进行连接。常用的DNA连接酶是T4噬菌体DNA连接酶，它不但能使粘性末端的DNA分子连在一起，而且能使平末端的双链DNA分子连接起来，但这种连接 ...

1、植物基因组DNA的分离纯化一、实验原理核酸包括DNA、RNA两种分子，在细胞中都是以与蛋白质结合的状态存在。真核生物的染色体DNA是双链线性分子，原核生物的“染色体”、质粒及真核细胞器DNA为双链环状分子，有些噬菌体DNA有时为单链环状分子。95%的真核生物DNA主要存在于细胞核内，其它5%为细胞器DNA，如线粒体、叶绿体等。从细胞中分离得到的DNA是与蛋白质结合的DNA，其中还含有大量RNA ...

一、 目的掌握质粒的小量快速提取法；了解质粒酶切鉴定原理。二、 原理质粒（plasmid）是一种染色体外的稳定遗传因子。大小在1~200kb 之间，具有双链闭合环状结构的DNA 分子。主要发现于细菌、放线菌和真菌细胞中。质粒具有自主复制和转录能力，能使子代细胞保持它们恒定的拷贝数，可表达它携带的遗传信息。他可独立游离在细胞质内，也可整合到细菌染色体中，它离开宿主的细胞就不能存活，而它控制的许多生物 ...

张宁，王凤山(山东大学药学院生化与生物技术药物研究所，山东济南250012《中国海洋药物》试验方案 51protocol.com杂志2004年第2期(总第98期)摘要:DNA的提取是分子生物学研究的基础技术，提取的DNA的纯度及结构完整性是进行基因工程各项研究所必需的条件。近年来一些新的或改进的DNA提取纯化方法不断出现，本文对从陆生动物、植物、微生物以及海洋生物提取DNA的方法进行综述。关键词: ...

实验目的 1、掌握最常用的提取质粒DNA的方法和检测方法；2、了解制备原理及各种试剂的作用。实验原理 碱裂解法是基于DNA的变性与复性差异而达到分离目的的。碱性使质粒DNA变性，再将pH值调至中性使其复性，复性的为质粒DNA，而染色体DNA不会复性，缠结成网状物质，通过离心除去。 细菌质粒是一类双链、闭环的DNA，大小范围从1kb至200kb以上不等。各种质粒都是存在于细胞质中、独立于细胞染 ...

实验目的：　　1．熟悉分子生物学实验的操作特点。　　2．掌握人类基因组DNA提取的基本原理。　　3．熟悉人类基因组DNA提取的基本方法。　　4．熟悉琼脂糖凝胶电泳的原理和操作。实验原理：　　用细胞裂解液裂解细胞膜，收集细胞核，加入SDS破裂核膜，用蛋白酶K使核蛋白降解成小片段并从DNA上解离下来，经苯酚�氯仿抽提去除蛋白质，无水乙醇沉淀DNA，75%乙醇洗涤DNA沉淀，真空干燥后，溶解于TE中即得 ...

目的意义DNA是遗传信息的载体和基本遗传物质，它在遗传变异、代谢调控等方面起着重要作用，是分子生物学和基因工程研究的对象，但无论是研究植物DNA的结构和功能，还是开展外源DNA的转化、转导的研究，首先要做的就是从植物组织中提取天然状态的高分子量的纯化DNA。因此，本实验的目的是学习植物基因组DNA提取方法、原理和DNA的鉴定技术。Ⅰ 植物基因组DNA 的提取（CTAB法）一、原理植物组织中绝大部分 ...

碱裂解法提取质粒利用的是共价闭合环状质粒DNA与线状的染色体DNA片段在拓扑学上的差异来分离它们。在pH值介于12.0-12.5这个狭窄的范围内，线状的DNA双螺旋结构解开变性，在这样的条件下，共价闭环质粒DNA的氢键虽然断裂，但两条互补链彼此依然相互盘绕而紧密地结合在一起。当加入pH4.8的醋酸钾高盐缓冲液使pH降低后，共价闭合环状的质粒DNA的两条互补链迅速而准确地复性，而线状的染色体 ...

【实验目的】　　1．掌握碱裂解法小量提取质粒DNA的原理和方法。　　2．掌握琼脂糖凝胶电泳检测质粒DNA方法。　　3．熟悉质粒DNA提取与真核细胞核DNA提取的异同点。【实验原理】　　在pH值为12.0～12.6的碱性环境中，在去垢剂SDS的作用下，细菌的细胞壁与细胞膜均破裂，释放出大量的染色体DNA、RNA及质粒DNA。此时，所有双链DNA解聚成单链，但质粒DNA仍保持环状。当pH值恢复到中性时 ...

一、原理：在浓氯化钠（1―2mol/L）溶液中，脱氧核糖核蛋白的溶解度很大，核糖核蛋白的溶解度很小，在稀氯化钠（0.14 mol/L）溶液中，脱氧核糖核蛋白的溶解度很小，核糖核蛋白的溶解度很大。因此，可利用不同浓度的氯化钠溶液，将脱氧核糖核蛋白和核糖核蛋白从样品中分别抽提出来。将抽提得的核蛋白用SDS（十二烷基硫酸钠）处理，DNA或（RNA）即与蛋白质分开，可用氯仿―异戊醇将蛋白质沉淀除去，而DN ...

李文强 张改生 汪奎 牛娜 潘栋梁西北农林科技大学 陕西省作物杂种优势研究与利用重点实验室 杨凌 7121 00摘要: 以小麦黄化苗为材料 通过简单差速离心、DNaseⅠ处理得到无核DNA 杂质的线粒体 用SDS 和蛋白酶K 裂解线粒体 经酚/氯仿抽提除去蛋白 并用RNase A 消化而得到单纯线粒体DNA(mtDNA)。对所提取的mtDNA 进行紫外吸收光度分析 A260/A280 平均为1.9 ...

复旦大学某教授写的有关质粒的好文，贴在这里与大家共享 碱裂解法从大肠杆菌制备质粒，是从事分子生物学研究的实验室每天都要用的常规技术。可以我收研究生十几年了，几乎毫无例外的是我那些给人感觉什么都知道的优秀学生却对碱法质粒抽提的原理知之甚少。追其原因，我想大概是因为《分子克隆》试验方案 51protocol.com里面只讲实验操作步骤，而没有对原理进行详细的论述。这是导致我的学生误入歧途的主要原因。后 ...

背景知识:核酸的存在形式：脱氧核糖核酸(DNA)、核糖核酸(RNA) 与蛋白质结合在一起以核蛋白（DNP）的形式存在。在制备核酸时通常破坏细胞壁及细胞膜来使核蛋白释放出来。植物总DNA包括细胞核DNA和细胞核外DNA前者存在于细胞核内，后者存在于细胞质中有半自主性复制活性的细胞器内，例如线粒体DNA(mtDNA)和叶绿体DNA(ctDNA)。核酸的理化性质：DNA为白色类似石棉样的纤维状物， RN ...

真核细胞基因组提取 一. 实验目的及背景 高等动物，高等植物的基因组相当宠大， 如人类细胞基因组由30亿个碱基对组成，果蝇基因组有１．４×１０８个碱基对，水稻基因组有１．４×１０９个碱基对。真核细胞基因组中，约１万－１．５万个可表达的结构基因，其它大量存在的是调控序列和内含子序列。可以说某特定物种的基因组，包含了该物种生长，发育，繁殖等各项生理活动的几乎全部信息量，因而对真核细胞基因组的结构，组成 ...

(adapted from Bruce A. Roe Department of Chemistry and Biochemistry The University of Oklahoma Norman Oklahoma 73019 broe@ou.edu)Typically 2.5 - 3 volumes of an ethanol/acetate solution is added to th ...

This protocol yields plasmid DNA that is suitable for restriction digests and cloning purposes. This preparation method works well on all E. coli strains and also exponentially growing Rhizobium melil ...

(adapted from Bruce A. Roe Department of Chemistry and Biochemistry The University of Oklahoma Norman Oklahoma 73019 broe@ou.edu)Phenol extraction is a common technique used to purify a DNA sample (1) ...

【实验目的】 1．掌握核酸提取的基本原理和基本方法 2．掌握检测核酸浓度及纯度的原理及方法 【实验原理】 DNA是遗传信息的载体是最重要的生物信息分子是分子生物学研究的主要对象因此DNA的提取也应是分子生物学实验技术中最重要、最基本的操作。如不能有效的完成DNA提取方面的工作，那就根本谈不上进行分子生物学方面的实验。在DNA提取过程中应做到：1、根据不同研究需要，保证结构的相应完整性；2、尽量 ...

质粒DNA的提取是从事基因工程工作中的一项基本实验技术，但提取方法有很多种，以下介绍一种最常用的方法： 碱裂解法：此方法适用于小量质粒DNA的提取，提取的质粒DNA可直接用于酶切、PCR扩增、银染序列分析。方法如下： 1、接1%含质粒的大肠杆菌细胞于2ml LB培养基。 2、37℃振荡培养过夜。 3、取1.5ml菌体于Ep管，以4000rpm离心3min，弃上清液。 4、加0.lml溶液I(1％葡 ...