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一、材料与试剂 1. 小鼠 2. 抗CD3与抗CD28抗体（Biolegend，100302，102102） 3. 白细胞介素-2（IL-2）（R&Dsystems402-ML-020） 4. 聚凝胺（Polybrene）（hexadimethrinebromide，SIGMAH9268） 5. RPMI-1640培养基 ...

花粉粒有可育和不育两种，通过一种可以指示膜的完整性的酶对花粉粒进行染色，由于只有可育的花粉在显微镜下可以观察到荧光，而不育的美誉，因此可以将两者区别。 一、材料和试剂 1. BKbufferS 15 M OPSpH7.5 2. 醋酸荧光素（FDA） 3. Source：拟南芥花粉 4. 取样：开花期 ...

FACS用于研究细胞组分DNA，碘化丙啶（PI）嵌入核酸双链中并可以发荧光。它不能进入活细胞，但是可以进入正在或者已经死亡的细胞。因此PI可以用于免疫荧光染色来鉴定死细胞。DNA染色可以用于研究细胞周期。相对的DNA含量可以坚持G1，G2和S期细胞的比例。在DNA染色中凋亡的细胞有特有的颜色。 一、材料和试剂 1. TritonX-100（SigmaCatalogNo. ...

四甲基偶氮唑盐分析是将四甲基偶氮唑盐还原成甲蜡的颜色，形成紫色，从而来测定活细胞中的酶活性，由于这些试剂能够抑制细胞的活力和生长特性，该方法常用来测量毒性蛋白以及有毒物质。 一、材料和试剂 1. MTT：四甲基偶氮噻唑蓝（Sigma） 2. DPBS缓冲液（Invitrogen） 3. 一般的化学品（Sigma） &n ...

一、材料和仪器 1. 海拉细胞（ATCC#CCL-2） 2. 96孔聚苯乙烯板（Fisher#07-200-91;Corning#3598） 3. MTT细胞增殖试剂盒（ATCC#30-1010K） 4. 胶原I（Sigma-Aldrich#C7661） 5. 密理博（D-MEM）高糖培养基DMEM（Invitrogen#103 ...

DNA电泳需要进行带型分析，在实验过程中常会发现所得的带型出现在这样那样的问题。在此，对DNA带型做了相应的分析。带型原因分析解决办法弱带或无带上样的DNA量不够增加DNA的上样量，聚丙烯酰胺凝胶电泳比琼脂糖电泳灵敏度稍高DNA降解避免DNA。 带型 原因分析 解决办法 弱带或无带 上样的D ...

一、样品准备区 这个区域专门用作样品的准备，在制备和操作用于核酸提取的试剂时应该采。 取预防措施： 1. PCR产物和带有要扩增序列的DNA克隆不能在这个房间操作。 2. 组织培养物、组织标本和血清样品都带进样品准备间处理，以根据应用的需要提取DNA或RNA。 3. 用于样品处理的工具不能被用作普通分子克隆的工具，也不能用作操作靶序 ...

一、设备 1. AvestinEmulsiflexC3匀浆机（Avestin） 二、步骤 1. 打开均质机开关（在机器后面）。 2. 打开氮气开关，压力调到读数为80 psi。 3. 扭松漏斗盖。检查漏斗帽是否工作，以确保不乙醇蒸发。 4. 转动关闭红色制动旋钮，推动绿色旋钮启 ...

一、材料与试剂 1. SOBor2xYT 2. MES 3. 足够80个管子的TFB（50 mL）/400转化DMSO 4. 5 M NaCl 二、仪器 1. 离心机 三、步骤 1. 室温下在5 ml SOB或2×YT中接种菌并且培养过夜。 2. 加过夜培养的菌到5 ...

内皮细胞分布于整个循环系统，从心脏到最小的毛细血管。在这个步骤中，气管的活力很非常重要。取出器官和开始消化之间的时间越短将提高细胞更有活力的产出及不在含氧量低的条件下太久。小鼠的数量需要：小鼠应该是5~6周大小。年龄大的小鼠内皮细胞的产出会少些。最少5个小鼠可以得到很好的产出。 一、材料和试剂 1. 内皮细胞生长添加剂（ECGS）（Sigma，catalognumber ...

一、材料和试剂 1. Hairpin-pLKO.1vector（OpenBiosystems） 2. Packagingvectors:第二代包装质粒包含gagpol和rev基因（pCMV-dR8.91或pCMV-dR8.74psPAX2）和包被质粒（pMD2.G）（Addgene） 3. 脂质体2000（Invitrogen） & ...

1. 什么是细胞凋亡？ 答：高等真核生物的大多数细胞，在丧失生理功能或严重受损时，激活固有的细胞自杀程序而自灭。这一过程称为细胞程序化死亡。细胞凋亡这个词指细胞程序化死亡所表现的生化和形态变化，其中包括细胞收缩、膜泡化、染色质浓缩和降解成小片段。细胞凋亡中的细胞经常降解成为膜包裹的凋亡体，被巨噬细胞或邻近的细胞吞噬或消化，但不产生炎症反应。McConkey和Orreniu ...

蛋白在蔗糖梯度中的沉降率可以用于与已经知道的S值与其在同梯度中蛋白相比来确定其S值。从而可用于计算蛋白的大约的分子量，也可用于鉴定两个蛋白的相互作用，如果他们在相同梯度出峰。 一、材料和试剂 1. 蔗糖（SigmaCatalog No.S0389） 2. 明胶（SigmaCatalog No.G9136） 二、仪器 1.离心机（B ...

一、材料与方法 1. EDTA（无蛋白酶抑制剂）（Roche） 2. 毛地黄皂苷（EMDChemicals） 3. 蛋白酶抑制剂（DMSO，leupeptin，pepstatin）（Sigma） 4. BECKMAN离心管（BECKMAN） 5. ANTI-FlagM2亲和树脂（S ...

一、材料与方法 1. EDTA（无蛋白酶抑制剂）（Roche） 2. 酸冲洗过的425-600玻璃珠（Sigma） 3. 洋地黄皂苷（digitonin）（EMDChemicals） 4. 蛋白酶抑制剂（DMSO亮肽素胃蛋白酶抑制剂）（Sigma） 5. BECKMAN1.5 ml ...

1. 紫外吸收光谱 UV 分析原理：吸收紫外光能量，引起分子中电子能级的跃迁 。 谱图的表示方法：相对吸收光能量随吸收光波长的变化 。 提供的信息：吸收峰的位置、强度和形状，提供分子中不同电子结构的信息 。 2. 荧光光谱法 FS 分析原理：被电磁辐射激发后，从最低单线激发态回到单线基态，发射荧光 。 谱图的表示方法：发射的荧光能量随光波长的变化 ...

一、选择与人类在解剖学、生理学、生物化学近似的实验动物 二、选择遗传背景明确，动物个体特性清楚的实验动物 三、选择生物学特性符合实验目的和要求的实验动物 四、选择对实验敏感的品种品系的实验动物 五、选择科研检验和生产传统的实验动物 六、选择人畜共患病的动物 七、其他应注意几点 1. 一定要选用健康的动物。 2. 一般均应选择成年动物来进行实验。 3. &n ...

一、近交系动物国际命名原则 1. 品系名 有1~4个大写英文字母表示 如A、BA、DBA、STAR 2. 非正规命名，已为国际所熟悉，则可保留，如129、615 3. 有些品系早被人们熟知，可在大写英文字母和一些阿拉伯数字来表示。如：C3H、C57BL等。 二、亚系的命名 亚系是由同一近交品系分离出来的，具有各不相同特性的品系。 1. &nb ...

一、环境因素 1. 温度 21~27℃ 2. 湿度 一般动物的相对湿度在40~70%之间，50%左右为最好。 3. 空气的其他指标 （1）氧浓度<20ppm。 （2）动物室气流速度0.13~0.18 m/秒，避免有吹风。 （3）有害气体H2S<10 ppm，CO2<0.02%。 （4）换气次数：8~15次/ ...

指与实验动物设施和动物实验有关的实验动物的保种、维持、生产、实验研究实验或制造等所需的建筑物和设备物的总称。 一、选址 二、设施设计和施工上应注意的问题 1. 设计前的论证、咨询。 三、实验动物设施的基本要求和管理原则 1. 应尽量避免对动物的一切潜在威胁。 2. 设施应考虑相对独立，防止交叉感染。 3. 经常清洁作用和污染作业的隔离。 4. ...