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        如何使用AvestinEmulsiflexC3型匀浆机破碎细胞

        互联网

        2876
        一、设备

        1. AvestinEmulsiflexC3匀浆机(Avestin)

        如何使用AvestinEmulsiflexC3型匀浆机破碎细胞

        二、步骤

        1. 打开均质机开关(在机器后面)。

        2. 打开氮气开关,压力调到读数为80 psi。

        3. 扭松漏斗盖。检查漏斗帽是否工作,以确保不乙醇蒸发。

        4. 转动关闭红色制动旋钮,推动绿色旋钮启动。

        5. 抽出管中的残留乙醇。

        6. 漏斗中倒入去离子水将乙醇洗出来。偶尔保持氮气气流,以确保没有上一组样品的细胞碎片残留。

        7. 上样前,关闭漏斗置冰里遇冷。之后安装漏斗,将钢圈热交换器放置冰内保持样品冷却。

        8. 将样品放入漏斗,打开匀浆仪。气压打开之前,保持样品可以通过管道回到漏斗。

        9. 打开空气压力,将压力调节为40 psi,表压在20 000到25 000磅。最大压力为30 000磅。将管接入在冰上预冷的样品采集管。

        10. S.Pombe酵母样品需要反复匀浆5~6次,可达到80~90%的破碎效率。酿酒酵母样品需要通过8~9次达到80~90%破碎效率。之后在显微镜下检查样本。

        11. 如果均质机被样品堵塞,盖上漏斗,可用氮气气流排除。

        12. 样品匀浆完成后,取下漏斗,用去离子水冲洗。

        13. 用更多的水冲洗掉细胞碎片。偶尔保持氮气压力。

        14.用乙醇冲洗,在漏斗中保留1/3体积乙醇。

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