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什么是高通量测序？高通量测序技术（High-throughput sequencing，HTS）是对传统Sanger测序（称为一代测序技术）*性的改变, 一次对几十万到几百万条核酸分子进行序列测定, 因此在有些文献中称其为下一代测序技术(next generation sequencing，NGS )足见其划时代的改变, 同时高通量测序使得对一个物种的转录组和基因组进行细致全貌的分析成为可能, 所以又被称为深度测序(Deep sequencing) ...

摘要：荧光条形码标记的单分子检测技术是一种全新的高通量检测基因表达谱、miRNA等分子的技术，其定量结果可与real-time PCR相媲美。由于它的高通量和高精确性填补了基因芯片和real-time PCR之间的技术空白，一经问世大受欢迎，其检测结果频频登载在nature、science、cell等顶级杂志上。NanoString公司研发的荧光条形码标记的单分子检测技术最早诞生于Leroy Hood博士创立的系统生物 ...

Q1: 抽提DNA 去除蛋白质时，怎样使用酚与氯仿较好?A1: 酚与氯仿是非极性分子，水是极性分子，当蛋白水溶液与酚或氯仿混合时，蛋白质分子之间的水分子就被酚或氯仿挤去，使蛋白失去水合状态而变性。经过离心，变 性蛋白质的密度比水的密度为大，因而与水相分离，沉淀在水相下面，从而与溶解在水相中的DNA分开。而酚与氯仿有机溶剂比重更大，保留在最下层。作为表面变性剂的酚与氯仿，在去除蛋白质的作用中，各有利弊，酚的变性作用大，但酚与水相有一定 ...

上海莱枫生物科技有限公司 网址：www.lifefeng.com订货电话：021- 64810180,25966877 传真：021-54252754技术解答：shanghai@lifefeng.com 技术支持：400-600-1087,13817902990(上海)各位战友如有需要我们可提供4次免费试用装个人认为彻底去除细胞DNA是实验可重复性的关键，后续PCR添加BSA或Carrier DNA或增强剂是非常有必要的。我们旨在提供 ...

酶切反应建议一、 建立一个标准的酶切反应目前大多数研究者遵循一条规则，即10个单位的内切酶可以切割1μg不同来源和纯度的DNA。通常，一个50μl的反应体系中，1μl的酶在1X NEBuffer终浓度及相应温度条件下反应1小时即可降解1μg已纯化好的DNA。如果加入更多的酶，则可相应缩短反应时间；如果减少酶的用量，对许多酶来说，相应延长反应时间（不超过16小时）也可完全反应。二、 选择正确的酶不言而喻，选择的酶在底物DNA ...

基因组编辑三大工具ZFN、TALEN、CRISPR/Cas9筛选基因敲除细胞系阳性克隆Protocol 上海南方模式生物研究中心 技术顾问 周效华从2011年科学家实现TALEN技术，2013年科学家实现CRISPR/Cas9技术，这些技术的迅速成熟都给基础生物学研究、临床医学研究提供了更为方便和快捷的分子生物学工具。技术进步必将在未来给科学研究及基因治疗研究带来更为广泛的发力！这在2014年以来的频频出现的Cas9 ...

本期明星技术：核糖体展示 (ribosome display)ribosome display技术的核心是利用体外核糖体表达载体构建 sc Fv抗体库 ,并于体外转录为 m RNA,体外翻译表达 ,随后以固相化的抗原分子亲和筛选出核糖体 -m RNA-sc Fv复合物中的高亲和力 sc Fv。这种技术在实验中不用任何细胞 ,是第一个完全在体外筛选有功能蛋白的方法。该技术克服了其他一些蛋白质筛选技术 (如噬菌体展示 )需转化细菌或真核细胞 ,因效率不高而降低库容 ,减少抗体多样性 ...

本人经常用以下方法提取DNA,做PCR,效果不错,很简单.大家可以尝试下!整个过程不需要离心.1. Lysis: the lysis buffer (usually 0.5ml) is added to the tissue or cell ( for a 75cm2 flask, add 5ml directly to the cell). Digestion is complete within several hours at 37C (cell, 2-3h) or 55C (tissue) with agitation.Lysis buffer100mM Tris Hcl pH ...

脂质体转染目前仍然是基因重组中主要的应用方法，虽然并不复杂，但问题也有不少，这里将DXY的有关资源总结如下：脂质体转染方法脂质体转染常见问题与解决http://www.dxy.cn/bbs/thread/1709497http://www.dxy.cn/bbs/thread/1710130http://www.dxy.cn/bbs/thread/1710363http://www.dxy.cn/bbs/thread/1710381h ...

MicroRNA ProtocolsEdited by Shao-Yao YingDepartment of Cell and Neurobiology, Keck School of Medicine,University of Southern California, Los Angeles, CAContentsPreface ............................................vContributors .......................................xi1. The MicroRNA: Overvi ...

浏览核酸研究2006年数据库专刊的时候，发现了两个miRNA的序列数据库。miRNAmap:http://nar.oxfordjournals.org/content/vol34/suppl_1/index.dtlwhat is miRNmapWe establish genomic maps for microRNA precursors and their mapping to targets in vertebrate genomes, namely miRNAMap. In this s ...

文章题目：Primase-based whole genome amplification文章出处：Nucleic Acids Research 2008 36(13):e79; doi:10.1093/nar/gkn377推荐理由：该文提出了一种不用加引物就能将基因组大量复制，你相信吗？请欣赏一下这篇精美的文章吧！设计的非常巧妙！摘要：In vitro DNA amplification methods, such as polymerase chain reaction (PCR), r ...

与大家分享一种高分辨率聚丙烯酰胺凝胶的制备方法——Enhanced 聚丙烯酰胺凝胶（EP凝胶）EP凝胶使用短胶板制备，一般10cm即可，制备后分辨率能达到1bp，并且核酸电泳条带比老方法制备的聚丙烯酰胺凝胶电泳条带更分散，更清晰。9%-12%的聚丙烯酰胺凝胶能达到1bp分辨率，6%-8%的凝胶能达到4bp的分辨率。Gel Conc.DNA Range bpAcrylamide-Bis, 40%, (29 : 1)Deionized WaterTAE Buff ...

【2005年3月】2005-03-14: Oxford BioMedica用RNAi慢病毒治疗家族ALS动物模型http://www.oxfordbiomedica.co.uk/news/2005-ob-09.htmhttp://www.nature.com/nm/journal/vaop/ncurrent/abs/nm1205.htmlOxford BioMedica (LSE:OXB.L), the leading gene therapy company, an ...

版主:最近小弟买了两套最新的《细胞培养技术》以及《分子生物学实验技术》的光碟，大约有1.1G，有需要的兄弟没有，如果有的话怎么样才能与大家共享？今天，我先把《分子生物学实验技术》光碟所包含的书名列在下面，请大家过目！1、《Molecular Cloning :A laboratory manual 》2、《PCR Cloning Protocols》Second Edition ,433页3、《PCR Mutation Detection Protocols》223 ...

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忙了半天，整理完了，整理的不大好，多见谅1。基因测序的发展历史http://www.newlife.org.cn/xueshu/yantaohui/39-di3daijiyincexujishu.htm2。基因测序的几种技术非同位素银染测序系统操作技术（内容详细）http://www.biox.cn/content/labtec/20040824465.htmT7 DNA聚合酶测序技术（内容详细）http://www.biox.cn/ ...

标题：【请下载】Lehninger Principles of Biochemistry (35 Mb, 4th edition, 2005)内容：Lehninger Principles of Biochemistry格式：PDF大小：35 MB语种：英文简介：http://bcs.whfreeman.com/lehninger/default.asp---------------------------------------------------------------------------------------------------------Con ...

按一下步骤操作，连续两次均抽不出任何东西，请高手指点！抽提用作转染的重组质粒DNA(用5ml菌液)所用试剂盒为Promega公司的Wizard○R Purefection Plasmid DNA Purification System，能够去除对细胞有害的细菌内毒素。具体操作步骤如下：（1） 将5ml 培养过夜的阳性菌在室温(24℃)下10000×g离心10 min。弃上清，将离心管倒置至吸水纸上去除剩余水分。（2）加入250µl 重悬液，振荡至完全重悬 ...

1)1 M Tris-HCl (pH7.4, 7.6, 8.0)组份浓度：1 M Tris-HCl配制量：1 L配制方法：1. 称量121.1 g Tris置于1 L烧杯中。2. 加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。PH值浓HCl7.4约70ml7.6约60ml8.0约42ml4. 将溶液定容至1 L。5. 高温高压灭菌后，室温保存。注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大 ...