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        【资源】蛋白组学----ITRAQ技术简述

        蛋白组学----ITRAQ技术简述1994年,Marc Wilkins在Siena双向凝胶电泳(two-dimensional electrophoresis,2-DE)会议上最早提出了蛋白质组(proteome)概念,并于1995年7月的Electrophoresis杂志上发表。随着高通量、高灵敏度、高分辨率生物质谱技术的出现,蛋白质组学技术取得飞速发展,人们不再满足于对一个细胞或组织的蛋白质进行定性研究,而是着眼于蛋白 ...

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        【专题讨论】关于蒽酮硫酸法多糖检测葡萄糖和多糖里的转换因子问题

        新手向各位大虾请教我采用蒽酮硫酸法检测多糖,看文献上是直接采用葡萄糖的结果当成多糖含量。但后来又采用不同的方法将多糖水解后测单糖,所测的单糖含量远远高于用葡萄糖所测的多糖含量。后来又看了一下苯酚硫酸法测多糖,有个葡萄糖和多糖的转换因子,所以请教各位蒽酮硫酸法的转换因子怎么计算。 这是苯酚硫酸法中的葡萄糖标准曲线 精确量取葡萄糖标准溶液0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7ml置干燥试管中,分别加水使成1.0ml ...

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        蛋白质转导

        PTD介导的蛋白质转导技术及其在神经系统疾病治疗中的应用生理状态下,真核生物细胞膜仅对少量小分子具有通透性,大大限制了生物大分子药物对疾病的治疗。由于转基因技术可操作性差、转运效率低、具有潜在的生物毒性作用、并且并非所有细胞均能被转染等缺点,限制了其实际应用。PTD介导的蛋白质转导技术则使大分子蛋白质或多肽自由通透细胞膜成为可能,随之产生疾病蛋白质治疗技术。本文就这一技术及其在神经系统疾病治疗中的意义作一综 ...

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        请教RIPA的配制

        我的实验:将400ul的matrigel胶注入小鼠皮下形成的那么一个黄豆大的像凝胶一样的东西,会有血管长入。然后活体动物注射荧光素标记的Isolectin,可与新生血管内皮细胞结合,然后取出组织,溶解在RIPA裂解液中,匀浆后离心取上清再测定荧光强度。该操作原文献只说用RIPA裂解液,没有给出成分。我用“RIPA”这个词检索,从一篇无关的英语文献中找到了配方。国内再查RPIA,共查到3-4种,大体成分均与英文文献 ...

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        【分享】生物学网站汇总

        一般性网站生物谷 http://www.bioon.com中国生物论坛 www.biooo.com丁香园论坛 http://www.dxy.cn/bbs/西陆生物探索者 http://www.bioprober.xilubbs.com(西陆)全文数据库检索论坛 http://ttpp.xilubbs.com/21世纪生物论坛 http://www.bio21st.com/中国生物论坛 http://www.biooo.com/Bio-Engine论坛 www.bio-e ...

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        【资源】蛋白版2006年05月无人应助帖,请广大战友积极应助,加分从优!

        整理蛋白版2006年05月无人应助帖如下, 请广大战友积极应助,加分从优!!!请广大战友应助后到加分申诉及积分返还区跟贴申诉,谢谢。蛋白质组学讨论区 【求助】如何主动聚焦 请教http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=6133724&sty=1&tpg=4&age=0【求助】求助http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=6206917&sty=1&tpg=3&age=0【 ...

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        【兴趣小组】包涵体的纯化和复性总结

        包涵体的纯化和复性总结信息来源:本站原创 更新时间:2004-10-19 3:49:00关于包涵体的纯化是一个令人头疼的问题,包涵体的复性已经成为生物制药的瓶颈,关于包涵体的处理一般包括这么几步:菌体的破碎、包涵体的洗涤、溶解、复性以及纯化,内容比较庞杂一、菌体的裂解1、怎样裂解细菌?细胞的破碎方法1.高速组织捣碎:将材料配成稀糊状液,放置于筒内约1/3体积,盖紧筒盖,将调速器先拨至最慢处,开动开关后,逐步加速至所需速度。此法适 ...

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        翻译调控

        翻译调控——连接基因组学和蛋白质组学的有效手段摘要:在细胞内,蛋白质水平和mRNA水平是不一致吻合的。对蛋白质合成的 调控不仅局限于转录过程,翻译阶段也有一部分调节作用,mRNA的水平不能完全代表蛋白质水平。应用蛋白质双向电泳等方法分离蛋白质存在许多缺点,因此,利用蔗糖密度梯度离心的方法研究在翻译过程中的蛋白质调控是有意义的。只有核糖体结合的mRNA才可以翻译成蛋白质,而游离的mRNA在翻译中不起作用。关键词 翻译调控 ...

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        【转帖】蛋白质组与蛋白质芯片

        摘要:蛋白质组研究目的在于从蛋白水平阐明基因的功能,这对于探索生命的奥秘具有重要的意义。蛋白质芯片是近年来兴起的一种强有力的高通量研究方法,能够一次平行分析成千上万的蛋白样品, 具有很高的敏感度与准确性。它将成为蛋白质组学研究中的强有力的研究方法,并最终架起基因组学与蛋白质组学的桥梁。1  研究现状蛋白质组(proteome)是指一个基因,一个细胞或组织所表达的全部蛋白质成分。蛋白质组学研究的是在不同时间和空间发挥功能 ...

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        【整理】蛋白版06年9月份无人应助帖,请广大战友积极应助,加分从优!

        整理蛋白版2006年09月无人应助帖如下, 请广大战友积极应助,加分从优!!!请广大战友应助后到加分申诉及积分返还区跟贴申诉,谢谢。蛋白质组学讨论区:【求助】我在用邻苯三酚法测定SOD活性时 加入酶液以后OD值变化速率反而大于邻苯三酚自氧化速率 这是怎么回事呀?http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=6963434&sty=1&tpg=4&age=0【求助】核酸酶使用温度http://www.dxy. ...

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        【建议】实验室常用有毒药品

        实验室常用有毒药品请大家使用时注意安全,取用有毒药品时戴手套,并注意再触碰其他无毒的物品时摘掉手套,以免污染。污染的手套如若立即再用,请有毒面向上并妥善放置。0.溴化乙锭(EB):大家都比较熟悉了。具有强诱变致癌性,使用时一定要戴一次性手套,注意操作规范,不要随便触摸别的物品。。1.DEPC(焦碳酸二乙酯):闻起来香香甜甜的,可是害人不眨眼!一种强有力的蛋白质变性剂,而且怀疑是致癌剂.开瓶时将瓶子远离你,内压可导致溅泼.操 ...

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        【转帖】一篇国家级优秀博士论文竟然是大多做假(转至新语丝)

        一篇国家级优秀博士论文竟然是大多做假:0 :0 ◇◇新语丝(www.xys.org)(xys.dxiong.com)(xys.3322.org)(xys.xlogit.com)◇◇一篇国家级优秀博士论文竟然是大多做假  拿起笔做刀枪  偶然知道西南农业大学陈宗道教授指导,赵国华教授的博士论文在陈教授参加的一次全国性博士点抽查中以最高分被评为优秀博士论文,查阅后发现问题太多,继续查阅几位博导发表关于植物多糖方面的论文,发现都是一些假论文,其中 ...

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        Western-Blot的试验要点

        由于本人刚刚进入实验室,没有任何经验,不知道各位大哥能否给于指导,告知具体的实验注意点。谢谢各位大侠Cx43、Cx40蛋白表达的测定2.6.1血管组织的匀浆取血管标本100mg置玻璃匀浆器中,按100mg/ml的比例加入裂解缓冲液,4℃下手工碾磨10-15分钟至肉眼看不到组织碎片,置离心管中于4℃低温离心机以14000ram离心15分钟,取上清液分装保存在-70℃深低温冰箱备用。2.6.2 蛋白浓度的测定用Bradford ...

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        【资源】白质、多肽提取分离

        1 分离方法  采取何种分离纯化方法要由所提取的组织材料、所要提取物质的性质决定。对蛋白质、多肽提取分离常用的方法包括:盐析法、超滤法、凝胶过滤法、等电点沉淀法、离子交换层析、亲和层析、吸附层析、逆流分溶、酶解法等。这些方法常常组合到一起对特定的物质进行分离纯化,同时上述这些方法也是蛋白、多肽类物质分析中常用的手段,如层析、叫泳等。  1.1 高效液相色谱(HPLC)  HPLC的出现为肽类物质的分离提供了有利的方法手段,因为蛋白质、多肽的HP ...

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        [资源]【整理】蛋白版06年1月无人应助贴

        整理了一下2006年1月份蛋白版的无人应助贴,以支持版主的工作.这个月可能很多高手回家了,感觉无人应助贴比较多啊!希望大家积极应助啊!已被锁、被扣分、标题为空以及不符合发贴格式的无人应助贴不在此列应助战友请到积分申诉区给出链接,谢谢尿蛋白电泳 SDS-PAGE技术http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=5252925&sty=1&tpg=46&age=0如何研究作用在某启动子的反式作 ...

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        【公告】丁香园网站捐款计划书

        目前网站运行资金缺口较大请各位战友鼎力支持用你和我的爱心,为我们的美好家园撑起一片晴朗的天空非常感谢!【公告】丁香园网站捐款计划书转自:http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=21&id=193347&sty=1&tpg=1&age=0一、丁香园网站现况简介及远景规划丁香园网站始建于2000年7月,现在使用的域名为http://www.dxy.cn,目前主要致力于医学、药学、生命科学等专业信息服务, ...

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        【专题讨论】原核表达秘笈之宿主菌株的选择!(接原原核表达研究者关心的10个问题贴)

        在原核蛋白表达过程中,选择构建一个合适原核表达体系需要综合考虑3大因素:表达载体、宿主菌株、表达诱导条件,以获得最满意的表达效果。事实上,在平时的实验中,最容易被忽视的就是宿主菌的选择——多数人会直接选择自己实验室曾经用过的表达菌株,或者是载体配套的菌株,而不去追究原因——即使表达结果不佳,大多在表达条件和载体上找原因,也不会考究菌株的选择是否适合。作为原核表达的宿主,对外源基因的表达会产生一定的影响,是勿庸置疑的。 ...

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        【原创】Westernblot基本流程与经验交流

        Westernblot基本流程1.蛋白处理:此步骤是关键,蛋白处理的好否决定结果好坏。取细胞,3000rpm 3min离心,加入含蛋白酶抑制剂(现做现加)的细胞裂解液(本实验室选择RIPA,1×106/L细胞对应100ul),枪尖反复吹吸裂解细胞(此步非常重要,容易出现鼻涕样的液体,此为裂解不充分的缘故,所以应反复吹打或者置于振荡器上,直至鼻涕状液体消失)。冰上放置至少半小时。2.煮蛋白:12000rpm,15min离心,吸取 ...

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        【讨论】发现蛋白质Apak的意义?

        大家讨论一下。这篇文章到底有多大意义?未名空间甚至猜想它有可能拿诺奖。《自然—细胞生物学》:贺福初小组发现重要新型蛋白质 可选择性地干扰抑癌基因,可能成为肿瘤防治新型靶向分子http://www.sciencenet.cn/htmlnews/2009/4/218492.html[科学网 郝成涛 王学健报道]日前,由军事医学科学院副院长、中国科学院院士贺福初领导的军事医学科学院放射与辐射医学研究所蛋白质组学国家重点实验室,在肿瘤研究 ...

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        蛋白受体与配体的一些资料

        今天,看到一些关于蛋白受体与配体的一些资料,捎整理了一下,放到这里,分享一下(刚刚学习到这,呵呵)。希望大家共同谈谈这方面的东东。受体与配体应该是信号传导中的概念吧!我不是很清楚。单细胞生物可通过反馈调节,适应环境的变化。而多细胞生物则是由各种细胞组成的细胞社会,除了反馈调节外,更有赖于细胞间的通讯与信号传导,以协调不同细胞的行为,如:①调节代谢,通过对代谢相关酶活性的调节,控制细胞的物质和能量代谢;②实现细胞功能,如肌 ...

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