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整理蛋白版2006年09月无人应助帖如下， 请广大战友积极应助，加分从优！！！请广大战友应助后到加分申诉及积分返还区跟贴申诉，谢谢。蛋白质组学讨论区：【求助】我在用邻苯三酚法测定SOD活性时 加入酶液以后OD值变化速率反而大于邻苯三酚自氧化速率 这是怎么回事呀？http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=6963434&sty=1&tpg=4&age=0【求助】核酸酶使用温度http://www.dxy. ...

实验室常用有毒药品请大家使用时注意安全，取用有毒药品时戴手套，并注意再触碰其他无毒的物品时摘掉手套，以免污染。污染的手套如若立即再用，请有毒面向上并妥善放置。0.溴化乙锭（EB）：大家都比较熟悉了。具有强诱变致癌性，使用时一定要戴一次性手套，注意操作规范，不要随便触摸别的物品。。1.DEPC(焦碳酸二乙酯):闻起来香香甜甜的,可是害人不眨眼!一种强有力的蛋白质变性剂,而且怀疑是致癌剂.开瓶时将瓶子远离你,内压可导致溅泼.操 ...

一篇国家级优秀博士论文竟然是大多做假:0 :0 ◇◇新语丝(www.xys.org)(xys.dxiong.com)(xys.3322.org)(xys.xlogit.com)◇◇一篇国家级优秀博士论文竟然是大多做假　　拿起笔做刀枪　　偶然知道西南农业大学陈宗道教授指导，赵国华教授的博士论文在陈教授参加的一次全国性博士点抽查中以最高分被评为优秀博士论文，查阅后发现问题太多，继续查阅几位博导发表关于植物多糖方面的论文，发现都是一些假论文，其中 ...

由于本人刚刚进入实验室，没有任何经验，不知道各位大哥能否给于指导，告知具体的实验注意点。谢谢各位大侠Cx43、Cx40蛋白表达的测定2.6.1血管组织的匀浆取血管标本100mg置玻璃匀浆器中，按100mg/ml的比例加入裂解缓冲液，4℃下手工碾磨10-15分钟至肉眼看不到组织碎片，置离心管中于4℃低温离心机以14000ram离心15分钟，取上清液分装保存在-70℃深低温冰箱备用。2.6.2 蛋白浓度的测定用Bradford ...

1 分离方法　　采取何种分离纯化方法要由所提取的组织材料、所要提取物质的性质决定。对蛋白质、多肽提取分离常用的方法包括：盐析法、超滤法、凝胶过滤法、等电点沉淀法、离子交换层析、亲和层析、吸附层析、逆流分溶、酶解法等。这些方法常常组合到一起对特定的物质进行分离纯化，同时上述这些方法也是蛋白、多肽类物质分析中常用的手段，如层析、叫泳等。　　1.1 高效液相色谱（HPLC）　　HPLC的出现为肽类物质的分离提供了有利的方法手段，因为蛋白质、多肽的HP ...

整理了一下2006年1月份蛋白版的无人应助贴，以支持版主的工作.这个月可能很多高手回家了，感觉无人应助贴比较多啊！希望大家积极应助啊！已被锁、被扣分、标题为空以及不符合发贴格式的无人应助贴不在此列应助战友请到积分申诉区给出链接，谢谢尿蛋白电泳 SDS-PAGE技术http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=5252925&sty=1&tpg=46&age=0如何研究作用在某启动子的反式作 ...

目前网站运行资金缺口较大请各位战友鼎力支持用你和我的爱心，为我们的美好家园撑起一片晴朗的天空非常感谢！【公告】丁香园网站捐款计划书转自：http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=21&id=193347&sty=1&tpg=1&age=0一、丁香园网站现况简介及远景规划丁香园网站始建于2000年7月，现在使用的域名为http://www.dxy.cn，目前主要致力于医学、药学、生命科学等专业信息服务， ...

在原核蛋白表达过程中，选择构建一个合适原核表达体系需要综合考虑3大因素：表达载体、宿主菌株、表达诱导条件,以获得最满意的表达效果。事实上，在平时的实验中，最容易被忽视的就是宿主菌的选择——多数人会直接选择自己实验室曾经用过的表达菌株，或者是载体配套的菌株，而不去追究原因——即使表达结果不佳，大多在表达条件和载体上找原因，也不会考究菌株的选择是否适合。作为原核表达的宿主，对外源基因的表达会产生一定的影响，是勿庸置疑的。 ...

Westernblot基本流程1.蛋白处理：此步骤是关键，蛋白处理的好否决定结果好坏。取细胞，3000rpm 3min离心，加入含蛋白酶抑制剂（现做现加）的细胞裂解液(本实验室选择RIPA，1×106/L细胞对应100ul)，枪尖反复吹吸裂解细胞（此步非常重要，容易出现鼻涕样的液体，此为裂解不充分的缘故，所以应反复吹打或者置于振荡器上，直至鼻涕状液体消失）。冰上放置至少半小时。2.煮蛋白：12000rpm，15min离心，吸取 ...

大家讨论一下。这篇文章到底有多大意义？未名空间甚至猜想它有可能拿诺奖。《自然—细胞生物学》：贺福初小组发现重要新型蛋白质 可选择性地干扰抑癌基因，可能成为肿瘤防治新型靶向分子http://www.sciencenet.cn/htmlnews/2009/4/218492.html［科学网 郝成涛 王学健报道］日前，由军事医学科学院副院长、中国科学院院士贺福初领导的军事医学科学院放射与辐射医学研究所蛋白质组学国家重点实验室，在肿瘤研究 ...

今天，看到一些关于蛋白受体与配体的一些资料，捎整理了一下，放到这里，分享一下（刚刚学习到这，呵呵）。希望大家共同谈谈这方面的东东。受体与配体应该是信号传导中的概念吧！我不是很清楚。单细胞生物可通过反馈调节，适应环境的变化。而多细胞生物则是由各种细胞组成的细胞社会，除了反馈调节外，更有赖于细胞间的通讯与信号传导，以协调不同细胞的行为，如：①调节代谢，通过对代谢相关酶活性的调节，控制细胞的物质和能量代谢；②实现细胞功能，如肌 ...

以下是我收集的一些资料：蛋白质数据库SWISS-PROT或TrEMBLhttp://www.ebi.ac.uk/swissprot/http://www.expasy.ch/sprot/PIRhttp://www-nbrf.georgetown.edu/pir/PRFhttp://www.prf.or.jp/PDBSTRhttp://www.genome.ad.jp/dbget-bin/www bfind?pdbstr-todayProsit ...

在网上见到的一篇关于免疫沉淀的文献，较详细，现译之共享:免疫沉淀材料1，蛋白A 或蛋白G2，一抗3，免疫沉淀缓冲液：20 mM 磷酸钠, pH 7.5, 500 mM NaCl, 0.1% SDS, 1% NP40, 0.5% 脱氧胆酸钠 and 0.02% 叠氮化钠.（ NOTE: 50 mM 醋酸钠缓冲液, pH 5.0,. 500 mM NaCl, 0.1% SDS, 1% NP-40 and 0.02%叠氮化钠 也可作为免疫沉淀的缓冲液，能提高蛋白G的结合功效）4，洗脱液：0.1 M 甘氨酸-HCl buffer, pH 2.55，SDS-PAGE 上样缓冲液 (pH 6.8)： 2% SDS, 62.5 mM Tris 碱, ...

超声波是物质介质中的一种弹性机械波，它是一种波动形式，因此它可以用于探测人体的生理及病理信息，既诊断超声。同时，它又是一种能量形式，当达到一定剂量的超声在生物体内传播时，通过它们之间的相互作用.超声波是物质介质中的一种弹性机械波，它是一种波动形式，因此它可以用于探测人体的生理及病理信息，既诊断超声。同时，它又是一种能量形式，当达到一定剂量的超声在生物体内传播时，通过它们之间的相互作用，能引起生物体的功能和结构发生 ...

一、原理考马斯亮蓝G-250（Coomassie G-250）是一种甲基取代的三苯基甲烷，分子中磺酸基的蓝色染料，在465nm处有最大吸收值。考马斯亮蓝G-250能与蛋白质通过范得华相互作用形成蛋白质—考马斯亮蓝复合物蓝色溶液，引起该染料的最大吸收λmax的位置发生红移，在595nm处有最大吸收值。由于蛋白质—考马斯亮蓝复合物在595nm处的光吸收远高于考马斯亮蓝在465nm处的光吸收，因此，可大大地提高蛋白质的测定 ...

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳一、原理细菌体中含有大量蛋白质，具有不同的电荷和分子量。强阴离子去污剂SDS与某一还原剂并用，通过加热使蛋白质解离，大量的SDS结合蛋白质，使其带相同密度的负电荷，在聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）上，不同蛋白质的迁移率仅取决于分子量。采用考马斯亮兰快速染色，可及时观察电泳分离效果。因而根据预计表达蛋白的分子量，可筛选阳性表达的重组体。二、试剂准备1、30%储备胶溶液：丙烯酰胺（Acr）29.0g ...

由于要做酶活性实验，所以选择真核表达His标签蛋白进行非变形的纯化。（避免了原核表达可能得到没功能的蛋白。）先上图上真相：这个说明了：细胞超声裂解后，离心沉淀的碎片里含少量His标签的过表达目的蛋白（第一道），上清里含大量His蛋白（第二道）。之后用特殊的含有镍的树脂小球纯化His蛋白，由于裂解液体积太大了，就分了两次加到柱子里。第一次加进去之后4度孵育1h，然后弃流出液（第三道），第二次把剩下的裂解液加进去，同样4度 ...

蛋白定量是生物学实验不可缺少的一部分。为验证细胞裂解是否成功，或为了将多个样品进行平行实验比较或标准化保存，需对细胞裂解液进行蛋白定量；为了判定蛋白的产量，需对纯化好的蛋白进行定量；为了将纯化好的蛋白用生物素或者报告酶进行标记，同样需首先对蛋白样品进行定量，以保证标记反应在适当的化学浓度下进行。现今有很多商品化的蛋白定量试剂盒，如BCA定量试剂盒等，操作起来，简便快捷。当然也有不少实验室，还是采用传统的方法进行 ...

世界著名生物技术公司特色简介（转自基因库）一、分子生物学Promega:Promega 公司是分子生物学研究工具的经典品牌，已有接近30年的历史，是生命科学这个朝阳产业中的“老字号”。该公司所特有的萤光素酶生物发光技术，灵敏度高，信号/背景比率低，在基础研究和药物筛选领域内得到广泛的应用和认可。应用范围涉及报告基因检测；细胞学活力、细胞毒作用、细胞凋亡检测；蛋白酶、蛋白激酶、核受体检测，以及描述药物先导物的吸收、分布、代谢、 ...

前几天在网上查些水稻蛋白质组学的资料，在日本的一家研究机构（http://gene64.dna.affrc.go.jp/RPD/data/LBY/LBY_extra.html http://gene64.dna.affrc.go.jp/RPD/data/RL01/RL01_list.html?）公布的数据中发现：同一种蛋白质亚基居然可以出现在同一块凝胶的几个位置，pI和Mw相差甚远，但它们的数据库登陆号又一样！跑双向只是让蛋白质变性， ...