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结核杆菌可以导致全身性疾病，特别是在发展中国家，其发病率较高，危害性极大.近几年结核杆菌的变异性较大，对抗痨药物的耐药性增加，从而使结核病的发病大幅度增高.虽然传统的涂片抗酸染色、细菌培养以及胸片检查对大部分结核能作出正确的诊断，但对某些病人亦可造成误诊或漏诊;动物接种虽特异性较高，但因时间较长，不能满足临床快速诊断的需要.近几年也出现了几种快速诊断方法，但也存在较大的缺陷，如短期培养后抗原免疫原性分析，即用放免 ...

PCR条件对反应的影响变性温度与时间模板变性温度是决定PCR反应中双链DNA解链的温度，达不到变性温度就不会产生单链DNA模板，PCR也就不会启动。变性温度低则变性不完全，DNA双链会很快复性，因而减少产量。变性温度太高，又会影响酶的活性。一般情况下可设为94℃20-30秒，高温时间应尽量缩短，以保持耐热DNA聚合酶的活性，最高变性温度不宜超过95℃。退火温度与时间退火温度决定PCR特异性与产量。温度高特异性强， ...

一个PCR相关的专业网站，内容很全http://www.pcrlinks.com/实验方法与步骤详解http://swjsx.ntmc.edu.cn/Protocol/home.htm美国AXYgen公司http://www.axygen.com/NewFiles/pcr.htmlhttp://www.alkami.com/This 158 page PCR manual covers the following topicsPCR Primer designPCR M ...

一、PCR技术及步骤 聚合酶链式反应（PCR） PCR扩增产物的克隆 上述两个实验包含基本原理、步骤、问题等。二、PCR常见问题汇总1. 没有得到扩增产物 （1）酶失活或在反应体系中未加入酶。Taq DNA聚合酶因保存或运输不当而失活，往往通过更换新酶或用另一来源的酶以获得满意的结果。 （2）模板含有杂质。特别是对甲醛固定及石蜡包埋的组织常含甲酸，造成DNA脱嘌呤而影响PCR的结果。 （3）变性温度是否准确：PCR仪指示温度与实际温度是否相符，过 ...

第一个：LOCUS AY651315 1275 bp mRNA linear INV 22-AUG-2004DEFINITION Plasmodium falciparum isolate 2300 putative chloroquine resistancetransporter (crt) mRNA, complete cds.ACCESSION AY651315VERSION AY651315.1 GI:51317937KEYWORDS .SOURCE Plasmodium falcipar ...

本内容需要回复后才能下载！ 本书版权归作者所有，请于下载后24小时内删除荧光光谱学原理(高清版)--Principles of Fluorescence Spectroscopy 3rd Edition (J.R. Lakowicz)The third edition of this established classic text reference builds upon the strengths of its very popular predecessors. Organized as a broadly usef ...

上游5-TCCGTAAAGACCTCTATGCC,下游引物5-GCTCAGTAACAGTCCGCCTA,大鼠b-actin内对照.原始基因如下:1: NM_012580. Reports Rattus norvegicus... LinksLOCUS NM_012580 1600 bp mRNA linear ROD 07-JUN-2005DEFINITION Rattus norvegicus heme oxygenase (decycling) 1 (Hmox1), mRNA.ACCESSI ...

Stormstar Real Time PCR Master Mix SYBR GREENStormstar SybrGreen PCR Master Mix产品名称Stormstar SybrGreen qPCR Master Mix价 格说明书DBI-2143200 Reaction2400元DBI-21441000 Reaction11800元DBI-217340 Reaction500元●产品内容 名 称数 量Stormstar SybrGreen qPCR Master Mix1ml×5支●产品 ...

简并引物设计实际操作步骤 启因生物一、利用ncbi搜索不同物种中同一目的基因的蛋白或cDNA编码的氨基酸序列 因为密码子的关系，不同的核酸序列可能表达的氨基酸序列是相同的，所以氨基酸序列才是真正保守的。首先利用NCBI的Entrez检索系统，查找到一条相关序列即可。随后利用这一序列使用BLASTp(通过蛋白查蛋白)，在整个Nr数据库中中查找与之相似的氨基酸序列。二、对所找到的序列进行多序列比对 将搜索到的同一基因的不同 ...

LAMP引物设计的在线网站(http://primerexplorer.jp/e/)，只要导入靶基因就能自动生成成组引物。以某一微生物的鞭毛基因为例讲解一下LAMP相物设计的过程：首先单击浏览钮择靶基因序列文件，靶序列默认的是小于2 2 kbp。支持三个类型的文件，普通文本格式（仅含序列）, FASTA格式和GenBank 格式文件。第二，从下面个项中择定参数设定（引物设计条件条件。基于GC含量的自动判断, 起始的参数是特定的：如果GC含 ...

分子克隆技术步骤在分子水平上提供一种纯化和扩增特定DNA片段的方法。常含有目的基因，用体外重组方法将它们插入克隆载体，形成重组克隆载体，通过转化与转导的方式，引入适合的寄主体内得到复制与扩增，然后再从筛选的寄主细胞内分离提纯所需的克隆载体，可以得到插入DNA的许多拷贝，从而获得目的基因的扩增。克隆在生物学中其名词含义系指一个细胞或个体以无性繁殖的方式产生一群细胞或一群个体，在不发生突变的情况下，具有完全相同 ...

实验中，通常蓝白筛选是与抗性筛选一同使用的。含X-gal的平板培养基中同时含有一种或多种载体所携带抗性相对应的抗生素，这样，一次筛选可以判断出：未转化的菌不具有抗性，不生长；转化了空载体，即未重组质粒的菌，长成蓝色菌落；转化了重组质粒的菌，即目的重组菌，长成白色菌落。目前很多实验室省去蓝白斑筛选的步骤，造成IPTG和X-Gal滞销主要是蓝白斑筛选存在假阳性的情况，IPTG和X-Gal的购买、配制、涂布也增加了实验的步 ...

1 DNA条带不见或很淡，可能的原因及解决的方法：a DNA marker 上样量不够按照说明书加样，或者根据自己的实验样品调整加样。b DNA电泳跑出凝胶电泳时，将溴酚蓝跑到胶长的2/3处即可停止电泳。更小的DNA片段可能需要电泳的时间更短。比如1/2c DNA条带被示踪染料所遮盖选用不同的电泳loading dye，使待检测的DNA样品避开示踪染料的干扰，或者适当降低loading dye用量。d 凝胶中未加核酸染料，或者后染时核酸染色不均匀 ...

杭州公立的男科医院有哪些【浙江省军区医院咨询QQ2641143845 电话0571-87923139】性爱的目标是让双方都获得快感和愉悦，时间不是那么重要，只要合理分配性爱时间，哪怕仅有十多分钟，都能让双方达到高潮。专家介绍说，完整的性爱包括三部分，前戏、实质性交和后戏。总的来说，性爱时间因人、因时而异，一般在二三十分钟左右即可。从时间分配上看，可以遵循2∶3∶2的原则。以20分钟为例，前戏应占6分钟左右，实质性爱为八九分 ...

在蛋白质组学研究中,如果使用高通量方法会得到大量蛋白质数据, 这就需要采用生物信息学的方法进行处理. 这里介绍一篇文章,希望能起到抛砖引玉的作用, 让大家讨论一下还可以用那些方法进行生物信息学处理.在这篇论文中， 应用了合并2种检索， 非标记定量， 相对量比较（normalized and non normalized），GO term 比较， 3种算法的蛋白定位预测比较， 通路分析，蛋白修饰(包括氨基酸修饰，和蛋白降解修饰)。另外在结果表格中还列出信号肽， 跨膜区，以及 ...

【资源】蛋白质技术讨论版资源共享—常用蛋白技术电子图书 1分共享主要资源：1.蛋白质纯化与鉴定实验指南2.蛋白质电泳实验技术3.蛋白质技术手册4.抗体技术实验指南5.2D electrophoresis & 2D workshop troubleshooting6.Protein Purification Protocols 2nd ed7.Pichia Protocols8.Proteome Analysis--uploaded by hosea5分共享主要资源： ...

I. 2D电泳操作手册BIORAD英文版BIORAD中文版Amersham英文版Amersham中文版Amersham的DIGE工作手册Dr. Gorg英文版双向电泳手册中文版（感谢国家生物医学分析中心于景华老师提供）Trouble shooting部分Dr.Gorg's trouble shootingAmersham Biosciences公司的关于“2D workshop troubleshooting”的Powerpoint材料 ...

感谢pinghw，本帖已经锁定，如果有战友继续上传，请到http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=2457613&sty=1&tpg=1&age=0跟帖！谢谢大家的积极参与！ 蛋白版的公共邮箱为：dxyprotein@163.com ，大小2G,最大附件30Ｍ。点击此处去邮箱为方便大家上传及下载资料，此邮箱已经开放使用，公共邮箱的设想及初步使用方法的相关内容请参看下帖，欢迎大家多提宝贵意见，谢谢 ...

本帖后续更新临时转移至【公告】蛋白版导读--发帖前必读==暨精华帖分类汇总特此公告友情提示：1．为规范起见，特将专人分类改为专题分类，分导读和专业讨论2种。2．部分专题帖因涉及多个领域被重复归类。3．如有分类建议、分类错误或侵犯 个 人 权 利 请直接pm本人，定将致谢/致歉并即刻修改。【蛋白提取】导读首帖：2005-12-06 菌体/细胞裂解法汇总 专业首帖：2004-05-12 提蛋白酶时，缓冲液中为什么要加入精氨和亚精氨以及苯甲脒【凝胶电泳】导读首帖： ...

根据自己的实验体会，总结做好WB的一些心得，与大家分享，不当之处欢迎批评指正。叙述的思路就是围绕着实验的每个步骤展开，这样可能更具体些。1．配胶: 该部分较为重要的是配制凝胶时要充分混匀，此外应保证试剂的新鲜。常出现的问题有：A.凝胶出现花纹：此时应检查原料中过硫酸铵（AP）粉末是否受潮B.凝胶聚合时间较长：聚合时间由AP以及TEMED决定，通常在30min左右，AP不新鲜会导致聚合变慢：此外还需注意环境的温度也很重要， ...