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A. Pilot error hypothesis.Background:This is the most common problem with new people. It frequently happens a couple of weeks after someone is "trained" and when they start to work independently.Symptoms:- i) Other people in the lab have the same primers working on the same type of material, using the ...

A subset of SNPs that will represent the majority (90%) of the observed haplotypes but with minimal reduction in power to detect associations determined in earlier will be utilized for this aspect of the proposal. Multiplex and multiplex minisequencing will be utilized to genotype these SNPs ...

刚刚接触RT-PCR实验,现在遇到一些问题.特向各位高人请教.我做的是关于大鼠erg,mink,KvLQT的基因表达,引物是老板按照文献给的,源自于Circulation(2000;101:2007-2014),作者是日本人.非常困惑的是没有GENEBANK的NO,对于这些引物我非常想核对,但是无从谈起.硬着头皮做了,可是发现跑出的条带不对头,与Marker比较都大了许多,erg大约是900左右,这是不是就是所谓的基因 ...

老板给定了一课题，希望能通过定量PCR来检测一病原真菌对药剂的抗药性。该病原真菌的抗药性由其β-维管蛋白基因的881位的点突变引起。该菌抗药性β-维管蛋白基因序列为：ATGCGTGAGATTGTGAGTGTTTTCCTCTGACCTCTAACTTCAAGCTGTTGCATGCGTTGAGCTTGTGTTTTGTGCCCTTGATTGTACCCCGCCGGGCGGTGGCAGCTCAACAACAATGCA ...

因工作需要，想查一下最原始的有关PCR论文，在PubMed上，用（“Polymerase chain reaction”）搜索了1984-1987年的论文，结果有11篇，其中最早的在1986年发表，共3篇，具体如下：9: Saiki RK, Bugawan TL, Horn GT, Mullis KB, Erlich HA. Related Articles, LinksAnalysis of enzymatically amplified beta-globin and HLA-DQ alpha DNA with ...

Reverse Tranase-PCRThis method was submitted by Jim Hutchins from the University of Mississippi Medical Center.The following is a great RT-PCR protocol developed by Ignacio Rodriguez at the National Eye Institue, NIH.ReferencesRaineri, I., Moroni, C. and Senn, H.P. (1991).Improved e ...

我要克隆一全长CDNA，设计引物如下sense:TCTCGGACCATGTCTCCCGCCCCA（起于104）antisense:CTA TCA GAC CTT GTC CAG CAG GGA（1841－1861）cDNA全长为：1 agttcagtgc ctaccgaaga caaaggcgcc ccgagggagt ggcggtgcga ccccagggcg61 tgggcccggc cgcggagccc acactgcccg gctgacccgg tggtctcgga cc ...

　 有谁能帮我解决相对定量时内参和目标产物的扩增效率问题？我用的反应体系为50ul：１０＊PCR buffer 1 ＊(终浓度）　　　　　　　　　　２mmol/l　dNTP 0.2mmol/l每种TaQnase 5U/IU 1U/50ul25mmol/l Mgcl2 2.5mmol/lintel reference Primer 1F 1umol/l1R 1umol/lMGB probe 0.25umol/ltarget Primer 1F 1umol/l1R 1umol/lMGB probe 0.25umol/lTemplate 0 ...

我设计了一对引物，用几个软件评价不一，哪位高手能否帮我检测一下？PA:ATCAAGCTTCACAGTCAGCCGCATGGPB:GCTTCTAGACCTCTGGCTGGCTTCTCAC我的序列：gcccgtacac accgtgtgct gggacacccc acagtcagcc gcatggctcc cctgtgcccc61 agcccctggc tccctctgtt gatcccggcc cctgctccag gcctcactgt gcaac ...

我作RT-PCR, 这个引物实在是设计不好，是TOPO II ALPHA其mRNA如下：1 aggttcaagt ggagctctcc taaccgacgc gcgtctgtgg agaagcggct tggtcggggg61 tggtctcgtg gggtcctgcc tgtttagtcg ctttcagggt tcttgagccc cttcacgacc121 gtcaccatgg aagtgtcacc attgcagcct gtaaatgaaa atatgcaagt caacaa ...

http://fileho.com/download/a42426471683/PCR-TECHNOLOGY-Current-Innovations--SECOND-EDITION.rar.htmlPCR Technology: Current Innovations, Second Edition is a fundamental reference for scientists new to PCR technology and a source of up-to-date applicati ...

Protocol for competitive RT-PCRFor quantifying mRNA, we use a competitive RT-PCR protocol with internal standard RNAs. These are added in a defined quantity to the RNA sample prior to the RT reaction. The resulting standard cDNA is coamplified with the same primers as the endogenous target seq ...

的2009年1-3月全文，持续更新（3月11日更新一期）《科学》09年3月06日出版pdf全文http://www.rayfile.com/files/babebccc-0dd3-11de-9021-0019d11a795f/重新整理一下，方便大家下载3月08日最新更新三期《自然》09年3月05日出版pdf全文http://www.rayfile.com/files/40b4522e-0b25-11de-b280-0014221 ...

我做heparanaser的RT-PCR,请各位帮助验证引物cDNA序列为:1 atgctgctgc gctcgaagcc tgcgctgccg ccgccgctgc tgatgctgct gctcctgggg61 ccgctgggtc ccctctcccc tggcgccctg ccccgacctg cgcaagcaca gcaggacgtc121 gtggacctgg acttcttcac ccaggagccg ctgcacctgg tgagcccctc gttcc ...

我要检测一个受体蛋白，提取的脑组织，Trizol提取组织RNA，加异丙醇离心后能见到明显的沉淀，按照TakaRa 的RNA LA PCR KIT(AMV) VER.1.1说明书操作，在逆转录后PCR不再加dNTP。逆转录后PCR用actin引物能模糊扩出一些东西，但有两条以上的带(第二次都快扩成100bpMARKER了！）。目的片段干干净净什么都没有！目的片断的引物一个是外国文献上的，一个 是自己设计的，都没有扩出来。小弟还菜，想大家给点建 ...

丁香园是一个非营利的学术科技网站，其今后发展定位是公益性学术科技类型网站，我们在“独立，非营利，纯学术”的思想指导下来建立和发展丁香园，主要目的是希望继传统知识交流平台（报纸，杂志，期刊等）之后，利用现在成熟和发达的互联网，使之成为一个承载和传播先进科技思想的新平台。这个平台与传统知识交流平台相比，具有如下特点：获取信息速度快，范围广，信息量大，互动性强，成本低。这几个特性是传统知识交流平台所不具备的。目前由于对互联网 ...

深圳市生科源技术有限公司PCR项目客户问题手册（载录）1．何谓PCR？PCR是多聚酶链式反应(Polymerase ChainReaction) 缩写，是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。是一种选择性体外扩增DNA或Rundefined*段的方法，能使极少量的基因组DNA或RNA样品中的特定基因片段，在短短几小时内扩增上百万倍。2．实时荧光PCR和普通PCR的区别？普通PCR技术：对反应的终产物进行半定量分析或定性分析。实时荧光 ...

realtime 做snp，对一些新手来说，也许在众多影响因素中，手法问题是一个比较常见的问题，本人属于初级菜鸟，在实验室才呆 不到3月，实验做了才不到半月，realtime做snp已经做了10板左右（96孔板），仅仅从图像上看，结果不满意者十有六七，主要的问题在于1:）荧光曲线起步没在起点，也就是说起点不整齐，线比较乱事业个问题。2）就是荧光曲线太平直，也就是说一些实验做的也许根本就没产物生成，虽说分型有，但是再重复做，有时 ...

综合性医药卫生1.中华医学杂志 2.第四军医大学学报 3.北京大学学报.医学版 4.第二军医大学学报 5.第三军医大学学报 6.解放军医学杂志 7.中国医学科学院学报 8.复旦学报.医学版 9.同济医科大学学报（改名为：华中科技大学学报.医学版） 10.白求恩医科大学学报（改名为：吉林大学学报.医学版） 11.湖南医科大学学报（改名为：中南大学学报.医学版） 12.华西医科大学学报（改名为：四川大学学报.医学版） 13.第一军医大学学报 14.苏州医学院学报（改名为：苏州大学学报. ...

平端连接　　通常情况下，PCR产物可直接与平端载体DNA进行连接，但其连接效率效低。因为TaqDNA聚合酶具有非模板依赖性末端转移酶活性，能在两6条DNA链的3'末端加上一个多余的碱基，使合成的PCR产物成为3'突出一个碱基的DNA分子。这种DNA分子的连接效率很低。由于PCR产物的效率通过较高，。在采用大量T4DNA连接酶并配以5-10u T4 RNA连接酶时，可显著提高其连接效率。对于较短PCR产物，用PUS19的Hinc ...