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semiboat 请问用显性负性STAT3质粒转染阻断IL-6/gp130/STAT3通道和STAT3 mRNA干扰阻断此信号通道有什么差异，在阻断此通道时是否都可以使用，园内各位XDJM有谁知道，非常感谢！！bacchante miRNA干扰比较现代化一些。显性负作用似乎还要考虑内源蛋白的影响，如果你的启动元件活力不够高，那么你就抑制作用可能就不明显。另外，似乎不能rescue，也就是说，似乎显性负还无法排除非特异因素。以 ...

xueerzsc 我准备检测UV诱导后细胞的凋亡情况，我选用不同剂量的UV诱导细胞，然后24小时收集细胞，准备进行流失分析细胞的凋亡情况，可是我在收集细胞的时候把漂在培养液中的死细胞都扔掉了。请问漂在培养基里的死细胞要不要一起收集啊？？？lee800265 最好是一起收集，因为这部分细胞也算是UV后的反应，因此收集起来更能真实的反应细胞凋亡状态，而您也可能考虑到由于细胞培养而漂浮的死细胞，也可以通过收集正常组的漂浮细 ...

xungufeng820 各位大侠：小弟是新手，师兄们也没做过的，不知western-blot测NF-KB、FLT3是用总蛋白提取试剂盒吗？急盼回复！万分感谢！snowxyh 我用过总蛋白提取试剂盒提蛋白，之后western-blot检测NF-KB，但是感觉这样得到的蛋白浓度很稀，需要比较大的上样量才能检测出来，个人感觉，还是用传统的细胞匀浆裂解，离心提取上清，这样得到的蛋白浓度大，做试验结果好shiying0517 自己配置 ...

li2005wh 用蛋白激酶C-alpha抑制剂或蛋白激酶C-epsilon抑制剂来灌流组织块可行吗？蛋白激酶C-alpha抑制剂或蛋白激酶C-epsilon抑制剂能透过细胞膜吗？文竹竹 应该查阅相关试剂的说明书看看能否通过细胞膜wzc2004 li2005wh 您好！我也做信号转导，我有几种蛋白酶抑制剂和活化剂，可以和您交换您的蛋白激酶C-alpha抑制剂和蛋白激酶C-epsilon抑制剂吗？也可以买您的，我需要很少，只做几 ...

99shaoshuai 请问各位师兄，师姐，用Fura-2/AM标记，荧光双波长测细胞内钙离子浓度时，悬浮细胞时，悬浮液里含不含Ca2+,Mg2+离子？如果含Ca2+,Mg2+离子的话，会不会影响细胞内钙离子的测定？为什么？非常感谢！sdyutg 悬浮细胞时，悬浮液中应不含Ca2+和Mg2+，否则会影响到细胞内钙离子浓度的测定99shaoshuai 谢谢谢谢本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的 ...

prophe 小弟最近要做线粒体信号传导途径方面的研究，能否介绍这方面的全面的文献综述即介绍线粒体的全部信号传导途径的综述或信号传导图片，谢谢！hualinpiaoxue 文献综述自己在网上查找即可，而且还更贴近自己的要求我这里有几个线粒体的信号传导图片，希望对你有用！线粒体凋亡通路hualinpiaoxue 线粒体在细胞凋亡中的作用hualinpiaoxue 线粒体的电子传递链示意图fsq6666 这篇文章不错版主doc ...

huxiaopenga 急！！！谢谢fzybb2003 我也准备做这样的课题，问过生物公司说要5-6万，请做过的战友也来说一下，申请经费的时候心里比较有数。gzlabtong 我以前在的公司就是专门做RNA干扰的，从设计SIRNA到包出该片段的病毒大概要30000左右，你自己要买一抗和该基因的克隆，做功能学实验，如果你要做动物实验还要考虑动物的费用。大概跟楼上的兄弟差不多bioyoung 构建载体4~5k病毒包装1.5~2w这是 ...

dongminlyl 请教各位高手：CdSe/ZnS quantum dots (QDs)中的CdSe/ZnS 起什么作用？“The amount of Cd element inside the labeled cells was immediately measured by inductively coupled plasma mass spectrometry (ICP）”以及后面的“To avoid the variation from efficiency of deliverers, different treating ...

lqing2008 我在养角质形成细胞中，从皮肤上分下来细胞后，计数后，看来挺多的，可养一段时间后，为什么在测指标时细胞数量总是不够？中间有的细胞为什么贴壁不好？请问在养人角质形成细胞的各位园友，为什么角质形成细胞总是长不好，看来好像就是不长，一直就是那样子，是不是细胞密度太小了。如果要是测胞内钙离子，细胞膜上的ATP酶活性及膜流动性，可否直接从皮肤上分离下来细胞后，直接给药测指标。不要让细胞贴壁，这样测有无影响？有没 ...

sujing1027 各位高人，谁有关于Eph/ephrin信号转导通路的图片啊，帮帮忙！碧峤 我有几张图碧峤 还有一张转身遗忘 非常感谢，现在正在找呢zhuzhujuly 楼主,如何把这张图变大阿,谢谢!本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

chenjun98ji 谁有关于CDC25C在细胞周期调控的线路图lwjssry .........................lwjssry ..........................本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

经历是财富 各位站友：为什么在分析mRNA稳定性的时候，要加入放线菌素D和放线菌酮，实验该怎么设计才合理？做荧光定量PCR分析的时候，该以哪种处理为基线？得到的数据该怎么处理？经历是财富 自己顶经历是财富 自己再顶ikewei 你的标题和你问的不太一致，“放线菌素D和放线菌酮在细胞凋亡的研究起什么作用？”我来试试回答你这个问题吧，我觉得可是是看刺激是通过已有的蛋白促发凋亡 还是转录合成蛋白来参与凋亡，因为放线菌素D可以抑制蛋白质 ...

经历是财富 各位站友：请问，例如caspase-3酶原分子大小是32kDa，被激活裂解为17kDa和12kDa肽段，那么在做免疫印记分析的时候，需要买不同的一抗吗？如果买一种就可以，买哪种？我准备买Santa公司的一抗，但是同样是caspase-3鼠抗人的，有若干个，我不知道他们有什么不同，请大家指点一二。谢谢！matianzhong 抗体有很多分类啊，抗体特异性标记蛋白的那个部分，有的是C末端，有的是N末端，所以看你有检测 ...

autumner 有谁用过中杉分装的santa cruz 公司兔来源的多抗 NF-kB P65 抗体？效果如何啊？我想用来做细胞的免疫荧光或是Western Blotting。望用过的战友们给个中肯的评价，谢谢！erik 我用过分装的磷酸化的p65,做western blot ,感觉不错!lsj096 请问你用的怎么样啊？我也想买个！谢谢！zhangql930611 我也用过，感觉还可以的。本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实 ...

莲芯 请大家指点与细胞迁移运动有关的信号通路.万分感谢!linmeina RhoGTPase调节的通路，如Rho/rock PI3K/AKT 等都参加细胞迁移zjljb Rho 通路snowpeakpu Rho 通路 与EMT密切相关,请问园子内有人做相关的研究的吗?zhao22840718 看这个有用不zhao22840718 http://cmckb.cellmigration.org/figures/JCS02662_1.html这个网站很直观zha ...

lijinbaobao 哪位有JAK-STAT信号通路的图片或者在哪能找到这样的图片，请回复我，很着急，谢谢！shaoliming 建议您先搜索本版或者googlekaige88 shaoliming wrote:建议您先搜索本版或者google同意此论断!lijinbaobao 我只想要单独的JAK-STAT通路的图片，不想要那么多其他通路混合的。磷酸化抗体 这张图不错，应该能满足你的要求，实在不行就自己画吧！lijinbaobao ...

桂花树 已购买了Cell signaling 公司siRNA Kit，试剂盒含有已合成的目标基因siRNA序列，最近要将siRNA通过试剂盒提供的转染试剂转入人的肿瘤细胞，在实验中怎样防止siRNA降解。zgfwindman 全部的东西都用无酶的就好了zhongkui 关键是要有钱，有钱就可以买一次性的无污染试剂和用品。有钱就可以独占一个操作台或操作间，等等等等，嘿嘿：）桂花树 RNA干扰实验所用的培养板、枪头、EP管等是否要用DEPC ...

lizzy514 请问细胞中总的GSK-3β应该包括磷酸化的GSK-3β蛋白吧?做WB检测细胞中GSK-3β和9位点磷酸化的GSK-3β(活性受抑制的形式)蛋白表达的变化,提取的是细胞总蛋白,那用GSK-3β抗体检测的GSK-3β的表达不仅仅只是非磷酸化的蛋白(活性形式)吧?万分感谢!!!坏坏的真心爱 有人回答吗？我也想知道zhanglin1229 不是，GSK-3β测出来是总的，包括磷酸化跟非磷酸化，有p-GSK3β抗体的。。本文 ...

minminlhm 不知道哪位大侠有比较成熟的基因串联的方法，或者相关的比较牛的实验室的参考文献。希望不吝赐教。minminlhm dingbentz 我试过利用T载体的制造方法把基因串联起来...具体就是先把载体改造一下,插入一个EcoRV位点,切之然后加T制成T载体,然后把基因P出来(引物设计的时候加上一个EcoRV位点),按T克隆的做法把基因克隆进去(在载体上另设一对引物用于克隆筛选).因为引物上带了EcoRV位点,又 ...

sadows 看一篇文献摘要里多次提到PC12 N1,N1代表什么,是PC12细胞中的一型么?那一型呢?PC12不是只有分化的和没分化的么?望达人赐教.谢谢摘要如下:JNKs, also known as SAPKs, are activated in response to a wide variety of factors including growth factors, cytokines, UV radiation, and heatshock. In the rat pheochromocytoma PC12 ce ...