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        【求助】研究某个蛋白通过ER起作用的方法

        丁香园论坛

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        我看到一片paper是研究某个蛋白通过抑制ER信号通路,抑制乳腺癌细胞增殖。为了证明这一点,作者向不表达ER的293T细胞中转染ER,ER reporter vector和这个蛋白的表达载体。我想问的是,他为什么不向乳腺癌细胞中转染质粒呢?是因为乳腺癌细胞本身表达ER吗?这有什么影响呢?
        外源的大量转染只是为了确定一下现象在过表达中是否存在,乳腺癌细胞中ER 阴性或者阳性时ER的含量,不同细胞系中含量也是不一样的
        那在乳腺癌细胞中转染ER,ER reporter vector和这个蛋白的表达载体,是不是更能说明问题?因为文章是为了证明,某个蛋白通过抑制ER信号通路,抑制乳腺癌细胞增殖。毕竟293T细胞和乳腺癌细胞还是不一样的。
        由于细胞内的通路都是网络化的,因此一个因素影响细胞增殖,其具体的机制是有多种可能的。lz说的这个实验我觉得他做的非常出色,思路很清晰啊。为什么不在乳腺癌中做,他肯定也在乳腺癌细胞做了,但是你不能直接将结果就锁定在ER上,即使ER通路的活性和总量有改变,因为你的阴性对照组也是有ER的。而将该实验换到293T中,由于293是胚胎肾细胞,功能性与乳腺癌细胞是差很多的,拿它做同样的实验也就是为了将实验的背景环境条件尽可能的改变,就加入ER一个同样的条件,这时出了与乳腺癌相似的结果,不久使“某个蛋白通过抑制ER信号通路,抑制乳腺癌细胞增殖”的结论更有说服力了么?
        楼上这位兄弟说的有道理。但是他的文章里没有提到做乳腺癌细胞转染的试验,我觉得还是应该加上这个实验比较合理。因为在293T中转染,这说明这个蛋白能够抑制ER信号通路,并不能直接说明抑制ER信号通路和抑制乳腺癌细胞增殖的必然联系。

        本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴

        师兄微信号:shixiongcoming

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