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折翼的老鼠 达人，你好，我是一个新手，想问下，我在NCBI上查的基因序列包不包括该基因的启动子？？阿呆硕士 没有。。一般都只有ORF序列即ATG开始TAA(..)结束。。。启动子序列要根据你的基因上下游序列去分析或是自己去验证某基因的上游序列是否具有启动功能。。。但一般对与目的基因的克隆表达研究，用的外源的高效启动子比较多。。。折翼的老鼠 那该怎样查一个基因的外源启动子序列呢？？michaelmichael 折翼的老鼠 wrote:那该怎样 ...

myskite u6序列很多，用哪个都可以吗？detector350 在做microRNA相对定量检测时候，一般选用U6或者5s。myskite 我想自己设计u6的反转引物，嗯，有设计好的吗？detector350 他们那边有的，你可以发邮件询问下kiss9499 没有，直接买的试剂盒yutoubaobao 不少文献都使用U6，我推荐你也用这个。jeff_lee 不要打广告，如果有需要请直接PM楼主！coldage U6，sense：5'-CTC ...

清风重重吹 想合成LNA探针，地高辛标记，哪家公司比较好？zhujoker 这类求助你可以上丁香通，这样会得到更多的信息，每个公司会将他产品的优势告诉你的，然后根据你的要求选择。willion1985 Exiqonbolycc1988 LNA设计合成可以咨询××××本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

学习勤快 基因的象形文字。IT CTA=1 ist IT ;G=01T10T 00 11C1TTC10T1TC1CCTT0T110TC-+- 0+00 - -C-++C- 0+-+C-CC++0+- -0+C+-，太阳与月亮，这是基因的象形文字。0也可做基因断句断读符号。注：太阳与月亮指G或0，与C，或读圆圈，半圈。+，-指T与A-----第1个英文字母，1T或it化为-+表示。+对-太阳对月亮/读起来更象形（文字。）CT扫描：C是月亮T是+C，T都是嘧啶。G，与C划——代替。本文为《NATURE》1 ...

mnidr Shocked cells were added to 1-ml SOC, incubated 1 h at 37°C, and then one-half was spread onto agar to select CmR or KmR transformants. If none grew within 24 h, the remainder was spread after standing overnight at room temperature. After primary selection, mutants were maintained on medium without ...

xiongye2006 因为只知道我们所做的营养因子可以激活胞内的Akt，另营养因子的跨膜受体已知，我需要寻找一个模块，此模块能启动Akt。我的问题是，哪些位点的何种修饰可启动Akt呢?在此模块中，因为我的跨膜受体胞内段不具备酶活性，是不是还需要寻找一种酶蛋白？xiongye2006 请推荐给我一些 关于 酶作用机理 的资料或电子书ylhuang0502 先查查你的跨膜受体有没有PH domain, 因为AKT要想被激活，必须要靠该dom ...

lsc000211 最近本人的实验课题中，需要用氧自由基诱导细胞凋亡，目前，氧自由基和凋亡均为研究的重要内容，然而通过产生氧自由基达到凋亡的实验文献却很少，我把收索到的内容上传，大家共勉：(1) 巨噬细胞的吞噬作用　　当细菌、病毒等异物侵入人体时，若身体不作出任何反应，这些异物会在体内迅速繁殖，导致身体患病；庆幸的是，人体遭到异物袭击时会动员其防御系统(主要是白细胞和巨噬细胞，以下称之为“食细胞“)将异物吞噬掉。这些细胞在不断吞噬 ...

yukituki 最近做Akt的WB遇到了问题：我用的是CST的Akt抗体以及pAkt抗体，染小鼠组织（肝，肾，脾，肺，脑等）。5%BSA（TBST稀释）4度封闭过夜之后一抗是5%脱脂牛奶稀释，1：500，过夜，二抗1：2000稀释，2-3h染出来的片子很脏，而且Akt勉强可以见到，但是pAkt没染出来条带提组织用的是RIPA（每100mg用500ul），加了PMSF以及NaF，冰上操作，裂解1h，4度离心30min，取上清。各位 ...

shuxian1 目前有哪些方法或手段可以提高外源基因在植物中的表达水平？熟鱼片 植物重组蛋白表达现状的一篇综述文章shuxian1 谢谢了本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

carl97 本人最近想本人最近想研究某药物对凋亡调控的机理，如何筛查出该药物相关的作用通路？？？凋亡有很多的信号转导通路，每一通路中涉及很多的分子。如果要筛查，是不是每条同路的关键分子在药物作用后都要分析其表达的情况？？工作量是不是太大？？有无其它好的分析方法？谢谢！！ylhuang0502 估计你用的这个药物不是全新结构的，是否先查查它的类似物的作用靶点？如能查到，这样有的放矢，工作量就会大大降低。另外如果有钱的话，还可 ...

包小子 请问高手基因芯片有哪几种？他们每孔或者每张芯片的最低样品用量是多少？谢谢!zjubell 这个是个论述题，回答起来太累。建议楼主先google搜索一下，扫扫盲先。xiaoyuan 芯片的样品量要求较高，通常在10微克以上熟鱼片 先给楼主扫扫盲。多年前的一个生物芯片培训教材熟鱼片 楼主分好高啊，借我点吧，55555漠夜长风 谢谢了。。。zhoujueyu 建议上各个公司网站看看。我们以前做的Agilent基因表达谱芯片所需的起始总R ...

laiy115 各位战友，一直在查关于环腺苷酸热稳定性的文章，可是好像都没有找到。请教大家谈谈cAMP热稳定性的问题，除了在酶作用下会形成AMP，加热情况会怎么样呢？dianaofyezi 一般cAMP都是在体内或者细胞内发挥作用的，所以对于热的研究应该不会很多。fightingwanghong 我也做通路的 是个新手不知您用什么方法测定cAMP的浓度啊？上海中医药的那个试剂盒好用不 先谢谢了wangleisdnu PepTag® N ...

52848454 请问 Akt STAT JAK2 ERK1 这几种信号蛋白属于 胞浆蛋白 还是 胞膜蛋白 ??在线等回复 谢谢ylhuang0502 AKT（包括AKT1、AKT2、AKT3)属于胞浆蛋白，plasma membrane上也有少量（属于磷酸化的激活的AKT），其实有一个（至少）专门的查蛋白定位名为LOCATE的数据库，你可以在下面的网站查查其余的蛋白的定位。http://locate.imb.uq.edu.au/52848454 多谢楼上的朋友fangw ...

三叶虫 请各位园友，怎么可以检测我买回来一抗和二抗的质量，我之前买了Santa Cruz抗体开始几次还可以做出条带，现在连β-actin都做不出来，现在准备买另外一个公司的，请问有没有什么预实验可以检测我的抗体质量？谢谢各位帮忙。。ylhuang0502 比较快速的方法就是用dot-blot，几个小时就可以看到结果，你可以google一下，网上关于dot-blot的protocol非常之多。good luck!三叶虫 dot-blo ...

pianpianqiwu812 求助各位老师，近期我做了6张miRNA芯片，实验组3张，对照组3张，公司给我的数据只有相对值，没有P值。原因是芯片数量少，不需要做统计学分析。这种说法是否对？还有就是在计算差异倍数时是用实验组相对值分别除以对照组的相对值，倍数在2倍以上的入选。这样计算是否对，还是倍数计算也是要有相关软件的？我在这方面真是只菜鸟，不懂的很多，公司说的我感到有些可疑。:(zhujoker 这个你在做的时候就应该 ...

lyc_urology 请问前辈，我想调节miRNA后，做MTT，请问怎么保证inhibitor在MTT孵育液中的浓度，购买的inhibitor都是多少多少nmol的量，直接拿培养基配制吗？因为我转染需要的inhibitor的浓度是50nmol。zhujoker 转染后直接检测，不需要在培养基中配制。要不的话你合成的那点足够用吗？heychristy 转染后直接检测，不需要在培养基中配制willion1985 通常 miRNA mi ...

栽好梧桐等凤凰 本人最近用病毒刺激细胞后用荧光定量检测到几个基因下调表达，我的预期效果是要他上调表达的。很多文献报道的是某个基因上调表达后如何做，很少报道下调表达该怎没做，请各位前辈指教下调表达该怎么做。谢谢，提供相关文献更好，谢谢。freecell 你的问题很不清楚。是问下调基本表达的方法还是问怎样检测基因表达是否下调？LoftyMan 一样做，上去了会引起什么改变，下来了又会引起什么改变。比如你发现semaphorin ...

fangxiang2008 有高手能指点一下图片6个外显子的序列码？或指点一下在什么地方能查到？图来源的文献在附件。fangxiang2008 文献来源，刚才没有贴上去zhujoker 你直接将基因说出来不就搞定了吗？NCBI你查相应的东西都有的。bigbang_0_0 ucscfangxiang2008 基因是二氢叶酸还原酶，缩写DHFR；NCBI查不到外显子。另外请教楼上，ucsc怎么查，不太清楚fangxiang2008 NC ...

cctj06 请问VEGF-2578C/A多态性中2578代表什么意思？另外，其中的符号“-”代表什么意思？谢谢！zjubell 找到启动子,然后往前数2578位.就是这个位点了.zhujoker 就是在2578位存在碱基的变化，具体形式不太统一。大家在文献中一般用的都是习惯或者说惯用名称。具体表现在以下几种形式：一、突变信息之间加上位置信息主要有三种方式：比如说突变信息之间加上cDNA的位置，如C188T；突变信息之间加上DN ...

栽好梧桐等凤凰 本人最近用病毒刺激细胞后用荧光定量检测到几个基因下调表达，我的预期效果是要他上调表达的。很多文献报道的是某个基因上调表达后如何做，很少报道下调表达该怎没做，请各位前辈指教下调表达该怎么做。谢谢，提供相关文献更好，谢谢。ylhuang0502 这个要相对麻烦一点，一种办法就是用一种或几种下调表达的基因的质粒转染细胞，进行过表达，然后再进一步研究，你可以先查今年的文献，相作者索要质粒，大部人都会给的。祝好运！ ...