单克隆抗体技术-脾细胞
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1．材料
(1) 免疫过的血清抗体滴度高的Balb/c鼠。
(2) 1640培养液
(3) 2.5％FCS－1640营养液
2．操作方法
(1) 拉颈或用CO2 处死小白鼠。
(2) 将小鼠放于70％酒精中浸泡消毒，取出固定于板上，在无菌条件下取脾。
(3) 把脾放入5ml含有2.5％FCS的1640液中，冰浴下轻轻洗去脾上的红血球。
(4) 用镊子轻轻挤压脾，做成脾细胞悬液，用毛细管将悬液移入小试管中。
(5) 直立小试管3min，使大块的结缔组织下沉，把细胞悬液移入离心管中。
(6) 以2.5％FCS—1640充满离心管，并以400g离心7min～10min（与此同时应开始制备骨髓细胞）。
(7) 把沉淀用约10ml的新鲜培养液再悬浮。
(8) 重复⑹、⑺步骤。
(9) 计算细胞，以台盼兰染色用相差显微镜检查，活细胞数应高于80％为合格。
