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        CD4细胞及CD8细胞的分离

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        CD4细胞及CD8细胞的分离:

        (1)CD4细胞的分离:将一定量的T细胞悬液通过一根SephDdexC—10柱,然后用少量的RPMll640培养洗涤,收获的细胞悬液约含85%的CD4细胞。医学|教育|网搜集整理

        (2)CD8细胞分离:用Tris缓冲液稀释羊抗鼠IgG(浓度为10μg/m1)包被一平皿表面,然后放置4℃过夜,没有包被上的抗体用PBS洗净。然后将已标记有抗CD8单克隆抗体的T细胞(细胞浓度为1×l07/m1)3m1加入上述的平皿内,4℃放置2小时,用PBS轻轻洗净末粘附的细胞,然后用毛细管加入10m1PBS吹打。收集的脱落细胞经洗涤后悬浮在RPMIl640培基中备用。CD4细胞亦可用此法分离。

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