萌新求教流式细胞术检测CD4,CD8计数

楼上回答问题的老哥，我想问一下我要检测小鼠外周血里 hcd45+细胞数量占比，流式怎么操作啊。（纯纯没有操作过流式，望详解，🙏）

你这几个问题，我做一个统一回复。

需要肝素抗凝静脉血1ml，不同荧光素标记的抗CD3、CD4、CD8单克隆抗体，同型阴性对照荧光物，溶血剂，固定剂，流式细胞仪。

具体操作1、100μ1抗凝血加20μl荧光单克隆抗体，同时做阴性对照。2、避光室温作用20min，溶去红细胞后，固定剂固定。3、上流式细胞仪测定，以阴性对照测出本底参数，调节荧光补偿，设定阳性参数值，软件将计算出阳性表达细胞比例。

需要注意1、为保证所得结果的可靠性，每次试验前应以标准荧光微球检测仪器的变异系数。2、每次应做阴性对照、阳性对照、正常对照、质控对照，以确保将各种试剂及操作过程对结果的影响降至最低。