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        关于HEK293细胞转染的问题

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        293细胞 总有一种转染方法适合你

        问:本人刚接触细胞转染,使用的是HEK293和Invitrogen 的lipo 2000及质粒和opti-mem,看其protocol,有几点疑问:1、种板24h后,是否需要把无抗的DMEM换成opti-mem,再进行转染?如果不换,对转染效率是否有影响?2、HEK293贴壁不是很好,中间换液过程有比较多,不知有什么好的办法吗?谢谢各位兄弟

        答:首先要说一下,293细胞系是最容易转染的一类细胞,根本不需要使用LF2000, 建议你使用PEI,PEI可以直接购买粉末,然后按照一微升一个一微克的量自行配置,使用非常廉价。对于293和293T细胞转染效率可以轻易达到70%以上,并且一次转染之后不需要换液,避免了换液过程中293因为贴壁不牢而脱落。而所有基于脂质体的转染试剂 ,包括LF2000的特点就是毒性太大,中途必须换液,而且造成的死亡细胞也很多。

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