• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购
        点赞
        收藏
        wx-share
        分享

        急切盼望高手指教pcr的奇怪现象

        丁香园论坛

        1145
        我最近跑pcr,用我的模板第一次跑出来,可后来始终不见条带。我的目的片断序列如下:
        ORIGIN
        1 accgcctccc gcaaagactt caccccaaag ctggggcgca ccccttgcac gccaccctcc
        61 ccccagcctg cttcttgagt cccccgcatc ccaggaccct ctctcctctg ggaggccgat
        121 ctccctcgga cctgctggca atagcttcct atttaagaac accccacttt tgggtcccag
        181 agagcgctca tctcgatttt tatcccggtg gcatactgag acactctggt gtcagagcgt
        241 caccgcgact cctgctgctt tctccctcaa cctcaaatta ttcaggacta tcacctacct
        301 ttccttggga gaccccaccc caccccacaa gccctgcagg ggcggggcct ccgcatccca
        361 cctttgcccg gggttcgcgc tctccgaagt tccgtggggc gccgcctccc ccatgccgcc
        421 ctcggggctg cggctgctgc cgcttctgct cccactcccg tggcttctag tgctgacgcc
        481 cgggaggcca gccgcgggac tctccacctg caagaccatc gacatggagc tggtgaaacg
        541 gaagcgcatc gaagccatcc gtggccagat cctgtccaaa ctaaggctcg ccagtccccc
        601 gagccagggg gaggtaccgc cgggcccgct gcccgaggcg gtgctcgctt tgtacaacag
        661 cacccgcgac cgggtggcag gcgagagcgc tgacccggag cccgagcccg aggcggacta
        721 ctacgccaaa gaagtcaccc gcgtgctaat ggtggaccgc aacaacgcaa tctatgacaa
        781 aaccaaagac atcacacaca gtatatatat gttcttcaat acgtcagaca ttcgggaagc
        841 agtgccagaa cccccattgc tgtcccgtgc agagctgcgc ctgcagagat tcaagtcaac
        901 tgtggagcaa cacgtagaac tctaccagaa atatagcaac aattcctggc gttaccttgg
        961 taaccggctg ctgaccccca ctgatacgcc tgagtggctg tcttttgacg tcactggagt
        1021 tgtccggcag tggctgaacc aaggagacgg aatacagggc tttcgcttca gtgctcactg
        1081 ctcttgtgac agcaaagata atgtactcca cgtggaaatc aatgggatca gtcccaaacg
        1141 tcgaggtgac ctgggcacca tccatgacat gaaccgaccc ttcctgctcc tcatggccac
        1201 ccccctggaa agggctcaac acctgcacag ctccaggcac cggagagccc tggataccaa
        1261 ctactgcttc agctccacag agaagaactg ctgtgtacgg cagctgtaca ttgactttag
        1321 gaaggacctg ggttggaagt ggatccacga gcccaagggc taccatgcca acttctgtct
        1381 ggggccctgc ccctacattt ggagcctgga cacacagtac agcaaggtcc ttgccctcta
        1441 caaccaacac aacccgggtg cttccgcatc accgtgctgc gtgccgcagg ctttggagcc
        1501 actgcccatc gtctactacg tgggtcgcaa gcccaaggtg gagcagttgt ccaacatgat
        1561 cgtgcgctcc tgcaagtgca gctga
        上游引物是:5'-CTTCAGCTCCACAGAGAAGAACTGC-3'
        下游引物是:5'-CACGATCATGTTGGACAACTGCTCC-3'
        经过评分虽然只有67分,可别人的模板可以跑出来,可为什麽我的模板总是二聚体,没有目的条带,我的模板跑内参和别的目的片断可以跑出来,现在我真的不知道是何原因?另外我的另一个片断在目的条带的后面有一个较亮的非特,请问我该如何优化条件?非常谢谢!
        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序