- ￥447.90 - 1947.90
- 阿拉丁
- 上海
- H665865
- 2025年07月16日
企业认证
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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20°C储存;避免反复冻融
- 英文名：
HiFi PCR Mix for NGS
- 库存：
期货
- 供应商：
上海阿拉丁生化科技股份有限公司
- 规格：
H665865-5ml/H665865-1ml
| 规格： | H665865-5ml | 产品价格： | ￥1947.9 |
|---|---|---|---|
| 规格： | H665865-1ml | 产品价格： | ￥447.9 |
产品内容
|
产品简介
HiFi PCR Mix for NGS是由热启动酶、PCR Buffer、dNTPs、Mg2＋以及PCR稳定剂和增强剂等组成的预混体系 ， 具有高保真性、高延伸性、低偏好性的特点 ， 对复杂的DNA模板（如高GC含量模板）有均衡的扩增效率 ， 特别适合千二代建库中多重PCR的扩增。
本品所含的高效热启动酶，在常温下没有聚合酶活性，有效避免了在常温条件下由引物和模板非特异性结合或引物二聚体而产生的非特异性扩增 。独特的缓冲体系与热启动酶的组合， 显著提高了PCR的扩增效率， 扩增范围更广泛。本产品有效提升了基因组中高GC或高AT区域的扩增效率， 降低扩增偏好性从而提高测序覆盖度。
注意事项
1. 该产品不适用千有修饰的引物 。
2. 使用前请上下颠倒轻轻混匀， 尽量避免起泡， 并经短暂离心后使用。
3. . 避免反复冻融， 反复冻融可能使产品性能下降。如果在短期内需要频繁使用， 可在2-8°C 保存。
使用方法
以下举例为常规P CR 反应体系和反应条件 ， 实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
1. PCR 反应体系
|
注意： 引物浓度请以终浓度0.1-0.3µM作为设定范围的参考。
2. PCR 反应条件 |
注意：
1) 一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度 Tm低5°C , 无法得到理想的扩增效率时， 适当降低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度，巾此优化反应条件。
2 ) 可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少 ， 扩增量不足； 如果循环次数太多， 错配机率会增加， 非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。
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- 作者
- 内容
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文献和实验分子生物学技术和应用操作之后，最常见的有：PCR；限制性酶切消化；寡核苷酸合成，以及下一代测序（NGS）的片段化、末端修饰和连接步骤。 可从凝胶中纯化 PCR 产物和 限制酶消化的 DNA 用于下游应用，例如末端修饰，连接，克隆和测序。 在寡核苷酸合成之后，聚丙烯酰胺凝胶电泳是从盐和截短序列中分离和纯化全长寡核苷酸的主要方法之一。 对于 Illumina 和 Ion Torrent NGS 平台，作为测序文库制备的一部分，样品片段化，末端修饰并连接到衔接子上。在这些步骤之后，以称为大小选择的方法
oligo (IntegratedDNA Technology, Coralville, IA, USA) is recommended. 3. PCR reagents: Herculase II fusion polymerase (Agilent, SantaClara, CA, USA). Other high-fi delity polymerases, such asKapa HiFi (Kapa Biosystems, Wilmington, MA, USA) can alsobe
-14-dATP, Cat. No. 18247-015, for 50 reactions) Digoxigenin labeled probe: DIG-Nick translation Mix (Roche Diagnostics) (contains DIG-11-dUTP, Cat. No. 1 745 816, for 40 reactions) EDTA: 0.5M, pH 8.0 PCR Purification Qiagen Kit
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