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        帮忙看一下我设计的引物

        丁香园论坛

        887
        我是新手,对设计引物还不太熟悉,下游CG含量高,没办法下手,麻烦大家帮我看一下
        部分DNA序列如下:
        1 actgaacttc acagggcaag gggagcccga ctccattcgc tgtgacacac gagcggagct
        61 gctgtcaaag ggctgcccag ctgatgacat catggaaccc aagagcctcg ctgagacccg
        121 ggacagccag gcgggcagtc ggaagcagct gtccccacag gaagtgacgc tctacctgag
        181 accaggtagg cttggctggc taggggtggg ccggccctaa tggcgcgtgt atccatgtgt
        241 ccctgcccca ggaggatgtc cccaacgccc catctgcagc tggtgcctag tctcgctttt
        301 agcactgagt tctgcgtcct aaaaaaaagg gagaataaac catctggaaa acactcctta
        361 tccctctctc agaagatgag gtattttttg gctgagtgaa ggctctgata aggcctgtaa
        421 actagaaaca caagtaaacc tttgaatcaa tgttgcccac ctgacttaac cacagaccga
        481 ggtataggac acagctctct gttagcactc caagaaacat ccttcaggaa ggtggcttgg
        541 tggaacagca gggggttatg gtggatggcc atgggcaggg ctggggtagc cacatggggg
        601 agctgatgct ggaaggtggg ctggcagagg ggacttgatg gtcatggctt tgtcgagcac
        661 caggcatcta cctgagagct ggggacacag gctatttgta ttgacaagga aagaagtcgt
        721 tacaagtgca ggtggtgatt aagatgacga ggagcagaaa ctagggcagc tgggattgag
        781 gaagtggggg ggggtgtccc aggatggcca gggagccctt ttggggccct ggcagtttgc
        841 ttagcagctg gtggtagaga aggccttacc agagagacca gagagatagt agaatgatta
        901 acagtgtgat aacatgacac tctatatctc tgtatccagc acatatgtat ccagatgttt
        961 ctatgtcaga acgtgtgctt gcctgaaatg gaatctgaat aggcatcctg catcatatcc
        1021 accagcataa gagaatgggg agagtcctga ggttctgagg cctgacaaga tgccataagt
        1081 gcccatgaac cccccccacc cccagaccag atagtacacc ctgactatct cccaaatcct
        1141 ggcaggtcag gcagttgcgt tcaacgtgac cttccggagg gccaagggct accccatcga
        1201 cctgtactac ctgatggacc tctcctactc catggtggat gacctcgtca acgtcaagaa
        1261 gctggggggt gacctgctcc gggccctcaa tggcatcacc gagtcgggcc gcattggtga
        1321 ggcagctact ccatcttccc ctgaaacccc aagccccggt cccaggcacc tctgcacctc
        1381 tgcaccccaa gggcagggcg ccaggcccct ccccacgtgc cgggccttcc tacccctctc
        1441 tggtaagagg ctcacggccc ctcactgtcc cccaggtttc gggtccttcg tggacaagac
        1501 ggtgctcccc ttcgtcaaca cgcaccccga gaagctgcgg aacccctgcc ccaacaagga
        1561 gaaggagtgc cagcccccgt tcgccttcag gcacgtgttg aagctcactg acaactccaa
        1621 acagttcgag acagaagtcg

        1146到1316是外显子区,两边是内含子区,目的片段是外显子区,1200处为突变位点,要做酶切,想从外显子两边设计引物,扩增片段长度大约在300到400bp,帮忙分析一下我用PRIMER设计的引物,
        上游:5'-CCA GCA TAA GAG AAT GGG GAG AG
        下游:5'-CCC AAA GTC CCC TTC TAC CT
        各位帮我看一下吧
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