【求助】研究细胞内Protein translocation都有什么好方法?
丁香园论坛
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目前仅知道能用GFP做成融合蛋白,并在显微镜下观察,但也不了解更多细节。
有熟悉这方面的,能提供一些研究方法,和技术细节不。
能告诉哪些相关Publication也行。不甚感激。
有熟悉这方面的,能提供一些研究方法,和技术细节不。
能告诉哪些相关Publication也行。不甚感激。
忘了说了,主要是想看目标蛋白在细胞质与细胞核的分布情况,及其在一定条件下的变化。
Thanks again.
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免疫荧光法观察处理前后目标蛋白在细胞中的分布,不过抗体的细胞内定位一般不准,不太可靠
构建GFP tag的重组质粒,转染,处理,观察荧光的分布
分离细胞浆蛋白和细胞核蛋白,用Western鉴定目标蛋白在浆蛋白和核蛋白中的含量
后两条非常准确,但消耗的银子过多
构建GFP tag的重组质粒,转染,处理,观察荧光的分布
分离细胞浆蛋白和细胞核蛋白,用Western鉴定目标蛋白在浆蛋白和核蛋白中的含量
后两条非常准确,但消耗的银子过多
已经决定构建GFP tag的重组质粒了,很感谢楼上的解答。
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