• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购
        点赞
        收藏
        wx-share
        分享

        TaKaRa产品问题集

        互联网

        2164

        M 其他相关
        问题集目录
        Q-1:使用IPTG(Dioxane free)时需要注意什么?································································2
        Q-2:使用X–Gal时需要注意什么?·····················································································2
        Q-3:使用DEPC处理水(RNase Free)时需要注意什么?·····················································2
        Q-4:使用10×Loading Buffer时需要注意什么?·································································2
        Q-5:使用6×Loading Buffer时需要注意什么?···································································2
        Q-6:使用核酸共沉剂时需要注意什么?·················································································2
        Q-7:使用E.coli Competent Cells JM109/DH5α时需要注意什么?·······································2
        Q-8:使用E.coli Competent Cells HB101时需要注意什么?·················································2
        Q-9:使用电转化感受态细胞时需要注意什么?·······································································3

        Q-1:使用IPTG(Dioxane free)时需要注意什么?
        A-1:使用IPTG(Dioxane free)时需要注意如下事项:
        1. 培养噬菌体时,Top agar中的添加量为:25 μl/3 ml(IPTG浓度为24 mg/ml时)。
        2. 含有IPTG的培养基4℃避光保存,须在1~2周内使用。
        3. 因IPTG对各种载体的诱导活性有差异,所以,在进行大规模诱导培养时,请先进行小试实验。
        Q-2:使用X–Gal时需要注意什么?
        A-2:使用X–Gal时需要注意如下事项:
        1. 培养噬菌体时,Top agar中的添加量为:50 μl/3 ml(X-Gal浓度为20 mg/ml时)。
        2. 含有X-Gal的培养基4℃避光保存,须在1~2周内使用。
        3. 使用DMF(二甲基甲酰胺)溶解。
        Q-3:使用DEPC处理水(RNase Free)时需要注意什么?
        A-3:本制品经高温高压灭菌后溶液中已不含DEPC,使用时应避免RNase污染。
        Q-4:使用10×Loading Buffer时需要注意什么?
        A-4:使用10×Loading Buffer时需要注意如下事项:
        1. 10×Loading Buffer中含有SDS,-20℃保存后SDS会出现沉淀,首次使用时,请于50℃左右水浴中保温溶解后使用。
        2. 开封后室温保存时,有时也会出现SDS沉淀,此时,请在水浴中保温溶解后使用。
        Q-5:使用6×Loading Buffer时需要注意什么?
        A-5:本制品不能作为蛋白质凝胶电泳(如:SDS-PAGE)中的Loading Buffer使用。
        Q-6:使用核酸共沉剂时需要注意什么?
        A-6:使用核酸共沉剂时需要注意如下事项:
        1. 本制品既可用于DNA样品,也可用于RNA样品。
        2. DNA浓度极低(小于10 ng/ml)时,回收率会有所下降。
        3. DNA溶液的体积小于400 μl时,DNAmate的添加量皆为4 μl;DNA溶液的体积大于400 μl
        时,可按每100 μl的DNA溶液添加1 μl DNAmate的比例增加DNAmate的使用量。
        4. 操作中不需要把DNA溶液低温放置,混匀后即可直接离心回收。
        5. 要严格按照操作方法的先后顺序加样,必须先加入DNAmate并充分混匀后再加乙醇。
        Q-7:使用E.coli Competent Cells JM109/DH5α时需要注意什么?
        A-7:使用E.coli Competent Cells JM109/DH5α时需要注意如下事项:
        1. 一定要用干冰运输。
        2. 不立即使用的感受态细胞请在-80℃下保存(融化后的感受态细胞不能再冻结保存)。
        3. 转化时请使用传热性能较好的试管。一般的1.5 ml微型离心管也可使用,但转化效率会有所下降。
        4. 对100 μl的感受态细胞,用于转化的质粒DNA量请控制在10 ng以下,并保证DNA溶液
        的体积在20 μl以下,否则会影响转化效率。 5. 除SOC培养基以外,LB培养基或Фb-broth也可以使用,但有时效率稍低。 6. 包装中附有0.01 ng/μl的pUC19 DNA,供作对照实验使用。
        Q-8:使用E.coli Competent Cells HB101时需要注意什么?
        A-8:使用E.coli Competent Cells HB101时需要注意如下事项:
        1. 一定要用干冰运输。
        3
        2. 不立即使用的感受态细胞请在-80℃下保存(融化后的感受态细胞不能再冻结保存)。
        3. 转化时请使用传热性能较好的试管。一般的1.5 ml微型离心管也可使用,但转化效率会有所下降(此时请在使用方法5.的42℃下放置60秒)。
        4. 对100 μl的感受态细胞,用于转化的质粒DNA量请控制在10 ng以下,并保证DNA溶液的体积在20 μl以下。否则会影响转化效率。
        5. 除SOC培养基以外,LB培养基或Фb-broth也可以使用,但有时效率稍低。
        6. 包装中附有0.1 ng/μl的pBR 322 DNA,供作对照实验使用。
        Q-9:使用电转化感受态细胞时需要注意什么?
        A-9:使用电转化感受态细胞时需要注意如下事项:
        1. 一定要用干冰运输。
        2. 不立即使用的Electro-Cells请在-80℃保存(融化后的Electro-Cells不能再冻结保存)。
        3. 导入分子量较大的DNA(>7 kbp)时,转化效率稍低。
        4. 使用SOC培养基的地方也可使用LB培养基,但转化效率会有所下降。
        5. 除SOC培养基以外,LB培养基或Фb-broth也可以使用,但有时效率稍低。
        6. 50 μl的电转化细胞中,转化的质粒DNA量不能超过10 ng,否则效率会下降。

        (责任编辑:大汉昆仑王)
        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序