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        细胞生存条件

        互联网

        2964

        1.基本营养物质
           (1)糖:六碳糖主要能源、维持渗透压,含葡萄糖1-5%。
           (2)氨基酸:维持生存需12种氨基酸(精、胱、亮、异亮、赖、蛋、苯丙、苏、色、组、酪、缬)。谷氨酰胺需量最大,缺乏时细胞生长不良。
        单 细胞培养 或细胞量少时,所需氨基酸的种类和量增多,细胞主要利用左旋氨基酸异构体。
           (3)维生素:细胞大部分需水溶性B族维生素,Vitc不可少,1-10mg/100ml可促进正常细胞生长繁殖。

        2.促生长因子、激素类物质

        3.其它物质

        基本元素、微量元素、促细胞贴附物质(纤粘连蛋白、层粘连蛋白laminin、IV型胶原、氨基多糖类)

        4.水

        主要成分和生存环境,要求高纯度水。

        5.温度

        哺乳动物及人源细胞最适培养温度为35℃―37℃,对低温耐受力比高温强。39℃以上受损→死亡;不低于0℃时(0℃-34℃),细胞能生存,但代谢降低、分裂延缓。

        6.气体环境和pH

        需O2、CO2,通氧量过大对细胞有毒害。CO2主要与维持pH有关,细胞培养最佳pH为7.2―7.4,通过缓冲系统和调节CO2含量,维持正常pH。开放培养要求5%CO2环境、HEPES(羟乙基哌嗪乙硫磺酸)10―50mmol/ml可防止pH变化。含Earle’s缓冲系统的培养基适合于5%CO2的培养条件,Hanks’缓冲系统的培养基仅含有0.35g/L NaHCO3,不能用于5%CO2的环境,若放入CO2培养箱,溶液将迅速变酸,使用时应注意。

        7.湿度和光

        开放培养相对湿度控制在95%。细胞培养需避光,紫外线或可见光可造成核黄素、酪氨酸、色氨酸等产生有毒的光产物,抑制细胞生长,降低其贴壁能力。

        8.影响细胞生长的其它因素

        接触橡胶用品、收集细胞时离心速度过大、细胞接种浓度过低等。

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