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        【旧帖整理】miRNA、siRNA、RNA干扰原理,步骤及相关问题总结!有问题的也可以提,共同交流讨论!

        丁香园论坛

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        RNA干扰(RNAi):近年来的研究表明,将与mRNA对应的正义RNA和反义RNA组成的双链RNA(dsRNA)导入细胞,可以使mRNA发生特异性的降解,导致其相应的基因沉默。这种转录后基因沉默机制(post-transcriptional gene silencing, PTGS)被称为RNA干扰(RNAi)。

        MicroRNA(miRNA,微RNA):即为长度为22nt左右的5′端带磷酸基团、3′端带羟基的非蛋白编码的调控小RNA家族。

        小的干涉RNA(siRNA):是在RNA干涉过程中人工体外合成的小片段RNA,由约20个碱基对组成,包括5个磷酸盐,2个核苷和3个悬臂。

        miRNA与siRNA之间有许多相同之处:1.二者的长度都约在22nt左右。2.二者都依赖Dicer酶的加工,是Dicer的产物,所以具有Dicer产物的特点。3.二者生成都需要Argonaute家族蛋白存在。4.二者都是RISC组分,所以其功能界限变得不清晰,如二者在介导沉默机制上有重叠。5.miRNA和siRNA合成都是由双链的RNA或RNA前体形成的。

        miRNA与siRNA的不同点:1.根本区别是miRNA是内源的,是生物体的固有因素;而siRNA是人工体外合成的,通过转染进入人体内,是RNA干涉的中间产物。2.结构上,miRNA是单链RNA,而siRNA是双链RNA。3.Dicer酶对二者的加工过程不同,miRNA是不对称加工,miRNA仅是剪切pre-miRNA的一个侧臂,其他部分降解;而siRNA对称地来源于双链RNA的前体的两侧臂。4.在作用位置上,miRNA主要作用于靶标基因3′-UTR区,而siRNA可作用于mRNA的任何部位。5.在作用方式上,miRNA可抑制靶标基因的翻译,也可以导致靶标基因降解,即在转录水平后和翻译水平起作用,而siRNA只能导致靶标基因的降解,即为转录水平后调控。6.miRNA主要在发育过程中起作用,调节内源基因表达,而siRNA不参与生物生长,是RNAi的产物,原始作用是抑制转座子活性和病毒感染。

        miRNA分离\纯化\测序
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/1629780_1.html

        miRNA和RNA干扰相关资料
        http://www.dxy.cn/bbs/thread/8089146

        miRNA功能分析
        http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=5471896&sty=1&tpg=2&age=0

        miRNA PPT(我下载了一下很不错)
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/2839113_1.html

        miRNA的加工
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/2695751_1.html

        miRNA作用机理图
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/6989211_1.html
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/3276097_1.html (实验方法)

        miRNA切较回收
        http://www.dxy.cn/bbs/thread/8902150

        siRNA和miRNA区别
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/2498685_1.html
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/3072624_1.html

        小分子量的RNA怎么证明就是miRNA?
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/4492817_1.html

        miRNA的RT-PCR
        http://www.dxy.cn/bbs/thread/6902242

        miRNA和siRNA的PDF文献
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/1761357_1.html

        两个miRNA的序列数据库
        http://www.dxy.cn/bbs/thread/6928315

        MicroRNA Protocols
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/6682221_1.html

        RNA干扰技术
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/3257321_1.html

        MicroRNA重要文献
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/1614044_1.html

        小RNA,siRNA,miRNA研究进展
        http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=1884503&sty=3&keywords=miRNA

        siRNA转染操作讨论
        http://www.dxy.cn/bbs/thread/9093901
        http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/3087857_1.html
        http://www.dxy.cn/bbs/thread/7649157
        http://www.dxy.cn/bbs/thread/8412114

        siRNA转染阴性对照
        http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=7151795&sty=1&tpg=1&age=0

        magiclyj 战友整理的关于siRNA资料

        http://www.dxy.cn/bbs/thread/1013883

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